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应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA 总被引:1,自引:0,他引:1
运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴,取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴,绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明,本方法操作简单,结果可靠,稳定性高,适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。 相似文献
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蚕沙及蚕沙冲剂中1-脱氧野尻霉素的离子色谱法测定 总被引:13,自引:0,他引:13
蚕沙是一种临床常用的中药材,中医认为具有祛风除湿、活血定痛的作用。蚕沙含有丰富的营养物质,其中铜、铁、磷、锌及其他微量元素含量均较高,含有18种氨基酸,包括人体必需的8种;蚕沙还含有单宁和维生素C.在医药上用作收敛剂,对腹泻、鼻衄、牙龈出血及痔出血等均有良好的疗效;蚕沙含有的果胶活性高于其他植物性果胶(如苹果果胶、柑橘果胶等),对各种致病菌有较强抑制和杀灭作用,能防治肠道失常症,对便秘有显著的疗效。蚕沙为蚕吃桑叶后排出的 相似文献
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笔者根据罐头加工标准和市场鲜售趋势,经过三年的试验,筛选出了子实体色白、出菇整齐、菌盖圆整、不易开伞、产量高等商品指标优于“三明一号”的S.F.V—9菌株。现报导于下: 一、生物学特性 1.在PDA培养基上的形态:S.F.V—9菌株菌丝白色,绒毛短而较松,粉孢子极少。 相似文献
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