农药残留检测中酶联免疫吸附技术的研究进展

随着农药种类和用量的不断增加,农药的残留对人体的危害以及食品进出口的影响日益严重,因此进行农药残留检测工作非常重要,其中最重要的是建立高效的检测方法。而EIA技术中的酶联免疫吸附(ELISA)技术特异性高、灵敏性强,在农药残留检测中的研究和应用也越来越多。笔者主要综述了农药残留的现状、酶联免疫吸附技术原理和分类及其在农药残留检测方面的应用,并根据当前研究现状及存在问题进行了研究展望并提出了发展建议。     

四川茶园土壤中农药残留现状分析

对四川主要产茶县的423个茶园土壤样品中的14种常用农药的残留量进行了检测和分析。结果表明:14种常用农药均被检出;总有机氯农残(∑-OCP)的检出率高达25.24%,其中六六六和滴滴涕的检出率均较高,分别为7.38%和10.00%,三氯杀螨醇的检出率最高,为10.71%,有24个土样中的残留量大于1.0mg.kg-1,最大残留量为1.519mg.kg-1;总有机磷农药在茶园土壤中的检出率很高,检出点数为150个,检出率达35.46%,其中水胺硫磷的检出率为9.22%,最大残留量为0.062mg.kg-1,甲胺磷和久效磷检出率均为7.09%;总菊酯类农药的检出率相对较低,为10.24%,其中氰戊菊酯的检出率相对较高,为5.00%,最大残留量为0.312mg.kg-1。对比可知,不同地区的土样中农药残留量的差异较大。     

抗蚜威在黄瓜和土壤中的残留消解动态研究

将抗蚜威按90~150 g/hm2商品推荐使用剂量进行田间试验,应用气相色谱法进行残留量分析检测。结果表明:抗蚜威在黄瓜及土壤中消失率分别在施药6 d和7 d后达到90%以上,其消解动态方程分别为Ct=1.184 5e-0.339 5t、Ct=5.257 5e-0.390 5t,半衰期为1.7~2.0 d。抗蚜威在黄瓜及土壤中的残留量随着时间延长而递减,符合一级反应动力学方程。     

甲酸对苜蓿草渣青贮饲料营养价值的影响

在晾晒24 h的苜蓿草渣中分别加入0,10,20 g／kg的甲酸进行青贮。结果表明。苜蓿草渣青贮后,无论有无甲酸,3个青贮组与原料组相比,干物质及有机物质的消化率、有机酸含量都显著的提高(P<0.01)。添加甲酸能明显降低青贮料的pH值,氨态氮、丁酸的含量并能保存更多的蛋白质。10 g／kg甲酸添加组的青贮效果最好。     

氰戊菊酯和乐果在不同作物上的残留降解

本文报道了氰戊菊酯和乐果在不同作物上的消解动态。研究结果表明,上述二种农药在小麦、鸡毛菜、桃子上的起始残留浓度和降解速度都不同,起始残留浓度依次为麦叶>鸡毛菜>麦穗>桃子,这主要与作物比表面积有关,氰戊菊酯的降解半衰期在鸡毛菜上为1.98天、麦穗为5.21天、桃子为7.19天、麦叶为11.65天,乐果在鸡毛菜上的半衰期为0.95天、麦穗为1.85天、麦叶为1.93天、桃子为4.48天。在其他条件基本一致时,农药降解半衰期与作物的生长系数有很大关系。     

QuEChERS-dSPE-UPLC-MS/MS筛查中药材地龙中41种兽药残留

建立了基于超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)的动态多反应监测模式(d-MRM)快速筛查中药材地龙中7大类(喹诺酮类、磺胺类、糖皮质激素类、硝基咪唑类、抗病毒类、非甾体抗炎类、镇静安眠类)41种兽药残留的分析方法。样品采用QuEChERS提取,分散式固相萃取管(dSPE EMR-Lipid)进行净化,采用d-MRM采集模式进行定性和定量检测,外标法定量,41种兽药测定在各自线性范围呈良好的线性关系,相关系数(R 2)均大于0.9917,检出限为0.1000~3.105μg/kg,定量限为0.3184~7.532μg/kg,3个添加水平的回收率为62.8%~112.3%,精密度为1.1%~8.9%。该方法前处理简单、重现性好、灵敏度高,适用于中药材地龙中41种兽药残留的快速筛查。     

发酵香菇渣对断奶仔猪生长性能、结肠挥发性脂肪酸含量及微生物结构的影响

为研究发酵香菇渣（fermented shiitake residues,FSR）对断奶仔猪生产性能、十二指肠消化酶活性、空肠紧密连接蛋白相关基因表达、结肠挥发性脂肪酸及结肠微生物区系的影响,本研究选用100头健康的壹号土猪断奶仔猪（小耳花猪×杜洛克猪,公母各50头）,随机分为2组,每组5个重复,每个重复10头猪,进行饲养试验。对照组饲喂基础饲粮（NC组）,试验组饲喂基础饲粮+5%发酵香菇渣。试验期33 d。饲养试验结束时,从每个组中选择6头仔猪（公母各半）进行屠宰取样。检测指标包括生长性能、十二指肠黏膜消化酶活性、空肠紧密连接蛋白mRNA相对表达量、结肠挥发性脂肪酸含量和肠道微生物结构。结果显示,与对照组相比,试验组显著提高了断奶仔猪的末重和平均日增重（P<0.05）,显著降低了料重比（P<0.05）;显著提高了十二指肠黏膜胰蛋白酶和β-淀粉酶活性（P<0.05）;显著提高了结肠挥发性脂肪酸丙酸、丁酸、异丁酸和异戊酸水平（P<0.05）;显著增加了结肠纤维杆菌门（Fibrobacteres）和链球菌属（Streptococcus）的相对丰度（P<0.01;P<0.05）,对空肠紧密连接蛋白1（TJP1）和紧密连接蛋白2（TJP2）基因mRNA的表达无显著影响（P>0.05）。综上所述,饲粮中添加5%发酵香菇渣可提高断奶仔猪肠道消化酶活性,增加结肠挥发性脂肪酸含量,调节肠道微生物区系组成,有利于提高断奶仔猪的生长性能。     

沙拉沙星间接竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立

为建立动物源性食品中沙拉沙星（SAR）残留的快速检测方法,本试验通过对盐酸沙拉沙星进行分子改造和偶联蛋白合成完全免疫原,免疫小鼠制备SAR单克隆抗体。通过棋盘法确定最佳包被原浓度及一抗稀释度,优化确定最佳反应条件,从而建立间接竞争化学发光酶联免疫（ic-CLEIA）检测方法,并通过灵敏度、精密度、交叉反应率、添加回收试验对该方法进行评价。紫外扫描结果显示,完全免疫原偶联成功;制备的SAR单克隆抗体效价达1：4×10⁶;包被原浓度为0.25 μg/mL,抗体稀释比为1：750 000,4 ℃包被过夜,5%脱脂乳封闭,竞争孵育1 h,酶标二抗稀释比为1：10 000,孵育1 h为ic-CLEIA最佳反应条件;建立的ic-CLEIA方法标准曲线呈线性,线性范围为0.0625~10 ng/mL,R²=0.995,灵敏度IC₅₀为1.45 ng/mL;其平均批内和批间变异系数均<10%;除与二氟沙星的交叉反应率达到98.08%以外,与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均<8%,与其他非氟喹诺酮类药物均无交叉反应;SAR标准溶液的最低检测限（LOD）为0.32 ng/mL,SAR在鸡肉样品中的LOD为0.46 μg/kg;添加回收率在88.3%~106.7%范围内,其变异系数≤12.2%。结果表明,本研究建立的ic-CLEIA方法检测速度快、灵敏度高,适用于动物源性食品中SAR残留的大量检测,为SAR残留检测提供了新的方法。     

残膜回收机捡膜杆齿的载荷分析

残膜回收机捡膜杆齿的载荷是设计残膜回收机的重要依据，它决定了机械的性能和成本。为此．对残膜回收机捡膜杆齿的载荷进行了分类研究，并建立了作用在捡膜杆齿上载荷的经验公式及解析方程，对各类载荷特点进行了较深入的分析。通过计算机仿真分析，得出了作用在捡膜杆齿上的模拟载荷曲线，为残膜回收机的设计提供了理论依据。     

太湖地区主栽高产水稻品种对土壤和肥料氮的利用特性研究

在太湖地区宜兴市采用~(15)N微区示踪试验,研究了太湖地区推广种植高产水稻武运粳23号(W23)和镇稻11号(Z11)及育种较早相对低产品种武育粳3号(W3)在不同供氮水平下齐穗期前后对土壤氮和肥料氮的吸收累积特性,土壤氮残留及其环境效应。结果表明:W23和Z11在N200(N,200 kg/hm~2)和N270(N,270 kg/hm~2)水平下整个生育期吸收累积3种类型氮量(总氮、土壤氮和肥料氮)均显著高于W3。不同水稻品种齐穗期前吸收累积3种类型氮量无显著差异,W23和Z11齐穗期之后对土壤氮和肥料氮的吸收能力均明显强于W3,特别是肥料氮,分别比W3高89.3%~134%和119%~157%;施氮量增加促进了W23和Z11齐穗期前对土壤氮的吸收,但对不同水稻品种齐穗期后对土壤氮和肥料氮的吸收无明显影响;不同水稻品种在两种供氮条件下的稻田土壤肥料氮残留(15N示踪),全氮、碱解氮、NH4+-N和NO3–-N均无明显差异;在同等施氮条件下,高产品种W23和Z11整个生育期稻田氮向环境的排放量低于W3,是相对环境友好型水稻品种。