猪胸膜肺炎放线杆菌结构蛋白基因ApxIVA特异性片段的表达和纯化

以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清8型分离株Hpn-405株基因组DNA为模板,PCR方法扩增ApxIVA特异性片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建成重组表达质粒pET-ApxIVA3,转入到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导重组蛋白的表达,SDS-PAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为18 ku,与预期片段大小相符;将经过超声破碎的菌液离心取沉淀经尿素洗涤溶解后用镍金属螯合层析柱进行纯化。Western-blot分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。     

基于空间数据库的林分生长模型的研究

将林分作为研究对象,以森林二类调查数据和相关图形为基础数据资料,选择林分生长模型,运用ScanIn地图矢量化软件系统进行专业的矢量化,借助于GIS相关软件建立属性数据库与图形数据库并运用ID连接,用二次开发语言VB编程开发功能,形成林分经营管理空间数据库,力求实现计算机分析、预测功能的更准确、更切实、更科学。同时,将此思路付诸于现实林分管理中,为科学地管理森林、经营森林、规划森林提供有效的帮助。     

冷却猪肉中小肠结肠炎耶尔森氏菌生长动力学模型的建立和评价

将特定的小肠结肠炎耶尔森氏菌(以下简称耶氏菌)接种到无污染的冷却猪肉表面,托盘包装后分别在0、5、10和15℃条件下贮藏,将不同温度下得到的耶氏菌生长实验值用于建立其生长动力学模型,结果表明修正Gompertz方程能很好地描述耶氏菌在冷却猪肉中的生长动态。lgNmax(最大菌数)受贮藏温度的影响不大,在4种温度下平均值为9.259±0.83(log10cfu/g)。温度对μmax(最大比生长速率)和Lag(延滞时间)的影响,采用平方根模型(Belehradek)描述呈现良好线性关系。用贮藏在3℃、8℃下耶氏菌的生长实验值验证建立的模型,偏差度分别为0.92、0.97,准确度分别为1.09、1.04,表明所建立的耶氏菌生长动力学模型的可靠性很好。     

膀胱无细胞基质在青紫蓝兔组织工程膀胱替代手术中的应用研究

研究膀胱无细胞基质（bladder acellular matrix graft,BAMG)在兔组织工程膀胱中的应用。按文献改进方法制作BAMG，从兔膀胱中分离出上皮细胞和平滑肌细胞，体外培养约4周，与无细胞基质材料复合成组织工程膀胱，对同一兔实施膀胱次全切术，用组织工程膀胱替代。术后进行膀胱造影，组织切片检查，提示组织工程膀胱功能良好。本方法获取的BAMG可用于兔的组织工程膀胱替代手术。     

叶用莴苣叶片对LED脉冲光的光合响应模型及光能利用

为探究LED脉冲光对作物光合特性的影响,探讨在不影响作物正常生长的前提下如何进一步降低能耗,提高照光效率,选用叶用莴苣（Lactuca sative L．）为试验材料,设置5个占空比水平（20%、40%、60%、80%和100%）和14个频率水平（1、2、4、8、16、32、64、128,256、512、1 024、2 048、4 096和8 192Hz）,共计70个处理,以连续光（占空比100%）为对照,探讨不同形式脉冲光对叶片净光合速率（Pn）的影响,并构建脉冲光占空比和频率与净光合速率之间的响应模型。通过对模型边际效应、交互作用以及光能利用率（LUE）的分析得出：占空比和频率都对Pn增长有促进作用,随着占空比和频率的增加,Pn也随之增加并最终趋于稳定状态直至与连续光处理的Pn无显著差异;占空比越高,叶用莴苣叶片的Pn达到饱和的频率越低;当Pn达到饱和状态时,脉冲光下的LUE要显著高于连续光。综上,占空比20%、频率512Hz为最佳占空比与脉冲光频率组合。该结果可为优化LED植物节能补光灯光源参数设计及研发提供理论支撑。     

应用套式PCR分段扩增犬瘟热病毒融合蛋白的全基因

为研究犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白各段功能,根据ＣＤＶＯｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了１０条寡聚核苷酸引物。对此１０条引物进行不同的配对,将１株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增,利用１次ＰＣＲ扩增得到了７个基因片段,最长的达１６６９ｂｐ,最短的为３１４ｂｐ;应用套式或半套式ＰＣＲ,扩增得到了能覆盖整个融合蛋白基因的８个片段     

海兰褐蛋鸡早期生长模型的拟合与分析简

为了掌握海兰褐蛋鸡早期的生长发育规律,运用Gompertz、vonBertalanffy和Richards三种非线性模型对0～10周龄的海兰褐蛋鸡体重数据进行了拟合与分析。结果表明：三种模型均能很好地模拟海兰褐蛋鸡早期的生长过程,拟合度均在0．99以上,但vonBertalanffij模型拟合效果更好,此模型拟合的生长曲线拐点周龄为19．98周,拐点体重为2358．44g,最大周增重为159．94g／周。yonBertalanffy模型在模拟海兰褐蛋鸡早期生长状况方面为理想的数学模型,此研究结果可作为科学饲养该鸡种的重要参考。     

塞北兔生长发育及生长曲线的拟合

采用Logistic非线性动物生长模型拟合塞北兔初生到6月龄的平均体重,进行生长曲线分析．结果表明：①根据Logistic生长曲线方程原理,确定了塞北兔生长曲线方程参数a=24．2593,b=0．9297,并对方程进行了拟合,建立了塞北兔生长曲线方程y^^=6596．5589／（1＋24．259 3e^-0.9297x）（P〈0．05）;②Logistic方程能很好的拟合塞北兔的生长过程,拟合度均在0．95以上,生长的拐点时间为3．43月龄,拐点体重为3298．28g,极限体重参数6596．5589g。     

新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达

用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒），对病毒进行纯化，抽提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆入ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ位点之间，获得２个毒株Ｆｃ基因克隆ｐＵＣＦ４６Ｆｃ和ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／ＳａｌⅠ双酶切法、ＰｓｔⅠ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，获得重组子ｐＢＶＬａＦｃ。ＰＣＲ和内切酶酶切法鉴定表明，Ｆｃ插入的位置和方向都正确无误。用Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α通过热诱导法进行了表达。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测了表达产物。结果表明，有１条能够与ＮＤＶ多抗反应的特异条带，分子量约１５７００，与预期大小一致，说明是Ｆｃ基因的表达产物     

Type 2 diabetes mellitus with pancreatic β cell dysfunction in 3 horses confirmed with minimal model analysis

Reasons for performing study: Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is diagnosed rarely in equine practice although it may be under‐recognised. A greater awareness of the condition and therapeutic considerations would be to the benefit of such cases presenting in practice. More investigation into the pharmacological management of these cases is needed. Objectives: Three cases of diabetes mellitus were investigated using a specific test for insulin sensitivity and pancreatic β cell function in order to define accurately and characterise the existence of T2DM in all 3 subjects. Methods: The insulin‐modified frequently sampled i.v. glucose tolerance test was performed in each case and the data so obtained were subject to minimal model analysis of insulin‐glucose dynamics. Cases were then monitored following treatment using a combination of dietary modification, metformin, glibenclamide and pergolide. Results: Marked insulin resistance was identified in each case and, furthermore, severe pancreatic β cell dysfunction was present therefore classifying each case as end stage T2DM. Treatment was nevertheless associated with restoration of normoglycaemia in all cases. Conclusions: T2DM in horses may be more common than generally considered. In some cases individuals may respond to therapy aimed at restoring insulin sensitivity and pancreatic function. Drugs used in other species for the treatment of T2DM have not yet been adequately tested in horses. Potential relevance: T2DM should be considered as an important differential diagnosis in mature to elderly horses and ponies suffering from weight loss, polydipsia and polyuria. Clinicians should be encouraged to offer treatment and management advice when such cases are encountered.