苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建

首先提取苦瓜的基因组DNA,然后根据Genbank中已公开发表的MAP30序列,设计一对特异引物MAP301,MAP302,并增添特异定位于内质网的小肽Kozak序列。采用PCR技术,从苦瓜的基因组DNA中扩增出一分子量为800bp左右的片段,回收克隆测序,结果表明,克隆获得片段与已公开发表的MAP30序列同源性达100%,将阳性克隆进行酶切,获得的目标片段与用同样酶切所获得的植物表达载体pEV1和pEV2大片段连接,酶切鉴定重组子构建成特异表达于果实的载体。     

小西葫芦绿斑驳花叶病毒生物学特性及传播方式

小西葫芦绿斑驳花叶病毒(Zucchini green mottle mosaic virus,ZGMMV)是我国新报道的侵染葫芦科作物的烟草花叶病毒属病毒.从感染病毒的葫芦叶片中分离出ZGMMV,摩擦接种西瓜(Citrullus lanatus)、葫芦(Lagenaria siceraria)、西葫芦(Cucurbit...     

小型哈密瓜新品种‘金脆丰’

 ‘金脆丰’为优质抗病杂交一代小型哈密瓜新品种。全生育期112 d 左右,果实发育期42 d 左右。果实椭圆形,果皮金黄色,果面覆致密网纹、果肉桔红色,肉质脆,单瓜质量1.8 kg 左右,可溶 性固形物含量15% ~ 18%,品质较优。抗枯萎及多种叶部病害,产量30 ~ 35 t · hm-2。外观美,耐贮运, 商品性好。     

用雌性系配制的甜瓜新品种‘寿研1号’及其指纹图谱

 厚皮甜瓜‘寿研1号’是以回交转育的雌性系‘白9298gy’为母本, 以‘玉9635’自交系 为父本配制的一代杂交种。中熟, 果实发育期33～36 d。果实高圆形, 单瓜质量115～210 kg, 果皮光滑洁白, 果肉细腻, 白色略带浅绿, 糖度16.5%左右。易坐果, 耐低温, 抗病性强, 适于保护地栽培。用8对引物构建了其重复概率为1 /291 600的SSR分子标记的指纹图谱。     

坐果剂处理对甜瓜果实生长发育与产量的影响

以厚皮甜瓜西农新早蜜1号品种为试材,以人工授粉为对照,研究氯吡脲和噻苯隆2种坐果剂对果实发育与产量的影响.结果表明:与对照相比,2种坐果剂对果实发育、总产量、早期产量、果实膨大速度、可溶性固形物含量、籽粒发育等无显著影响.说明在甜瓜生产中可用坐果剂代替人工授粉促进坐果.     

甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究

用限制性内切酶从目的基因供体质粒pBI-aPG上切下大小约2.3kb的目的基因,将它定向连接在受体质粒pCAMBIA2301载体上,构建成含有GUS基因和NPTⅡ基因的甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体pCB-aPG。采用直接转化法将pCB-aPG导入根癌农杆菌菌株LBA4404,采用该菌株对普通烟草进行了遗传转化研究。在Kanamycin选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株,经过GUS基因组织化学法检测以及PCR方法鉴定,证实了该反义基因已导入烟草基因组中。此项研究为下一阶段用该反义基因转化甜瓜品种以改良甜瓜果实耐贮运性打下基础。     

甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65μmol·L^-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7。实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测。     

Molecular and biological characterization of melon-infecting squash leaf curl China virus in China

It has been reported that squash leaf curl China virus (SLCCNV) infects some Cucurbitaceae crops except for melon (Cucumis melo L.). A new disease of melon exhibiting severe leaf curl and dwarfing was observed in Hainan Province of China. In this study, the pathogen was identified as SLCCNV through biological and molecular characterization. The isolate (SLCCNV-HN) possess a bipartite genome, DNA-A (HM566112.1) with the highest nucleotide identity (99%) to SLCCNV-Hn (MF062251.1) pumpkin and SLCCNV-Hn61 (AM260205.1) squash isolates from China, whereas DNA-B (HM566113.1) with the highest nucleotide identity (99%) to SLCCNV-Hn (MF062252.1). Phylogenetic analyses based on the full-length SLCCNV-HN DNA-A and -B sequences indicated that SLCCNV-HN melon isolate is clustered with SLCCNV-Hn pumpkin, SLCCNV-Hn61 and SLCCNV-SY squash isolates from southern China, forming an independent cluster. Infectious clone of SLCCNV-HN was constructed and the melon plants were inoculated and the infection rate is 100%, the systemic symptoms in melon showed identical to those of melon plants infected in fields. Additionally, melon plants transmission of this virus by Bemisia tabaci with a transmission rate of 95% (19/20) showed leaf curl and dwarf symptoms 15 days post transmission, thereby fulfilling Koch's postulates. Analysis of genomic organization and phylogenetic trees indicated that SLCCNV-HN melon isolate belongs to the Begomovirus genus. To the best of our knowledge, this is the first characterization of melon-infecting SLCCNV through its genome, infectious clone and transmission.     

七个苦瓜自交系主要经济性状配合力和遗传参数分析

选用7个苦瓜自交系按双列杂交法配制21个杂交组合,分析了9个主要经济性状的配合力和遗传力.结果表明:各性状的一般配合力和特殊配合力效应均达到极显著水平.亲本P3综合性状最优,可以在育种中直接利用;组合P3×P7综合性状最优.除瓜长和始收期外,其它性状主要以非加性效应为主.     

秋水仙素诱变薄皮甜瓜同源四倍体研究

为了获得四倍体薄皮甜瓜材料,研究薄皮甜瓜多倍体的特征特性,以二倍体薄皮甜瓜金美为材料,以0.2%、0.4%、0.6%的秋水仙素采用滴苗和浸种2种方法进行诱变四倍体试验,并通过染色体观察和细胞学鉴定对其进行倍性分析。结果表明,滴苗法比浸种法诱变率高,其中以0.4%秋水仙素滴苗诱变率最高,为6.67%;与二倍体相比,四倍体植株子叶和真叶长宽比变小,茎增粗,节间变短,花冠变大,果肉变厚,种子增宽,可育性降低,中心可溶性固形物含量增高;保卫细胞变大,气孔密度变小,保卫细胞内叶绿体数目增加;获得了同源四倍体材料。