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研究口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP) 2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面的意义.本研究将FMDV NSP 2C基因,克隆到穿梭载体pFast-bac- HT-B,将其转入含骨架载体Bacmid的DH10Bac,经蓝白斑筛选得到重组骨架质粒Bacmid-2C.将Bacmid-2C转染昆虫细胞Sf9,鉴定正确后,经3次增殖获得高滴度的P-3代病毒后,在High Five细胞中进行目的蛋白的表达.SDS-PAGE结果显示在High Five细胞中得到了相对分子质量约为38.93 ku的目的蛋白2C,Western blotting及Dot-ELISA结果显示,该表达产物对FMDV感染动物阳性血清有良好的反应性.以电泳纯化的2C蛋白为抗原建立间接ELISA,检测健康非免疫动物、免疫动物及FM-DV试验感染动物血清,结果表明2C-ELISA不但能区分免疫动物和感染动物的血清,而且还能检测FMDV感染早期动物血清中的2C抗体.说明昆虫细胞表达的2C蛋白可作为FMDV疫苗免疫动物与自然感染动物鉴别诊断的良好抗原.2C基因在Bac-to-Bac系统中的成功表达为建立通过检测几种NSP抗体,筛查感染及隐性带毒动物,净化畜群的方法奠定了基础. 相似文献
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为制备鲤春病毒血症病毒(SVCV)单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的SVCV免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤细胞技术,制备2株抗SVCV的MAb,分别命名为2A3和3H7。经间接ELISA检测腹水效价为1:10240和1:12150。亚类鉴定证实,这2株亚类均为IgG1型。经非竞争酶免疫试验测定2A3和3H7的抗体亲和力常数分别为4.86×108L/mol和1.86×109L/mol,3H7相对亲和力高于2A3。MAb 2A3和3H7的饱和度均为1:400,叠加试验所得增值指数为63.2%,大于50%。抗体反应增值结果表明:两株MAb分别针对不同抗原位点。免疫印迹分析检测表明,两株纯化的MAb均可与SVCV抗原发生特异反应。 相似文献
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Concordet D Vergez F Trumel C Diquélou A Lanore D Le Garrérès A Pagès JP Péchereau D Médaille C Braun JP 《Veterinary clinical pathology / American Society for Veterinary Clinical Pathology》2008,37(1):96-103
BACKGROUND: Urea and creatinine are the most frequently used indirect markers in plasma and serum of glomerular filtration rate in dogs. Both have been shown to lack sensitivity but their diagnostic efficiency for the diagnosis of kidney disease has been minimally investigated. OBJECTIVE: The purpose of this retrospective study was to investigate the influence of possible factors of variation on both analytes and to determine whether specific decision rules should be drawn up for subpopulations of dogs. METHODS: The results of urea and creatinine measurements, breed, sex, age, and health status (healthy, renal disease, or nonrenal disease) of 3822 dogs were collected from the archives of 5 veterinary clinics. Data were analyzed with univariate and multivariate decision rules with and without adjustment. RESULTS: There were significant effects and interactions of almost all of the sources of variation. Slight improvements in diagnostic efficiency were obtained by adjusting the decision rules to these sources of variations. Univariate decision rules gave approximately the same diagnostic efficiency for urea and creatinine concentrations, with sensitivity and specificity in the range of 70% and 90%, respectively, using the upper limit of the reference interval as the threshold value. Multivariate decision rules provided only minor improvements in diagnostic efficiency. CONCLUSION: Simultaneous measurement of both urea and creatinine is of limited diagnostic value over the analysis of a single variable. Creatinine is the preferred analyte as it is affected by fewer extrarenal factors of variation. 相似文献
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将患有蹄病的牛按病情严重程度分三级,在每级中各选出12头,并将36头随机分成4组,每组共9头。第1组为对照组,第2组每头牛日粮中加35%石粉18g,第3组每头牛日粮中加硫酸锌1.2g,第4组每头牛日粮中同时加35%石粉18g和硫酸锌1.2g。同样护理,每星期对试验牛群进行修蹄及常规治疗。经过1个月的治疗第1组治愈1头,有效3头,无效5头;第2组治愈2头,有效6头,无效1头;第3组治愈3头,有效4头,无效2头;第4组治愈7头,有效2头,无效0头。卡方检测除第2、3两组差异不显著外,其他各组之间差异显著。说明在日粮中适量提高钙和锌对奶牛蹄病有良好的预防和治疗作用。 相似文献
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为探究籽瓜种质资源的多样性,深度挖掘籽瓜优异种质应用潜力,采用相关性、主成分与聚类分析方法对100份籽瓜种质资源的21个农艺性状进行表型鉴定及遗传多样性分析。结果表明:籽瓜种质资源遗传多样性丰富,7个质量性状的多样性指数范围为0.53~1.65,14个数量性状变异系数为10.41%~35.56%,各表型性状间具有遗传相关性。以欧氏距离为遗传距离进行聚类分析,可将100份籽瓜种质资源聚为5大类群,其中第Ⅴ类群具有高产特性,可作为育种亲本材料。主成分分析提取前7个主成分,其成分累计贡献率达到了74.185%,可以作为籽瓜种质资源主要评价指标;籽瓜种质资源的综合得分范围为-2.78~2.86,依据综合得分排序,筛选出了3份优异籽瓜种质资源材料。本研究从多角度系统评价籽瓜种质资源遗传多样性,可为后续籽瓜种质资源高效利用及遗传育种提供科学依据。 相似文献
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本研究克隆了二化螟(Chilo suppressalis)、台湾稻螟(Cauricilius)、芦苞螟(C.luteellus)、甘蔗条螟(C.sac-chariphagus)、三化螟(Tryporyza incertulas)、亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)、甘蔗红尾白螟(Scirpophaga ex-cerptalis)、黄纹髓草螟(Calamotrophapaludella)、桃蛀螟(Conogethes puncti eralis)、棘禾草螟(Chilo hyrax)和稻蛀茎夜蛾(Sesamia in.erens)11种常见蛀茎害虫102个个体的线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因片段.序列分析显示:该COⅠ基因片段长为709 bp,序列都未发生缺失或插入现象,碱基颠换率(55.42%)高于转换率(44.58%);种间遗传距离平均值为0.140(0.088~0.179),种内遗传距离平均值为0.004(0~0.015),两者之间没有重叠区域;聚类分析表明,不同种蛀茎害虫分别形成独立的进化分支,分支自展值均为100%.研究结果表明该COⅠ基因序列具有适宜的变异信息,种内相对保守,种间变异显著,适用于蛀茎害虫的物种识别,并为开发蛀茎害虫DNA条形码技术奠定了基础. 相似文献
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