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101.
为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶3 000.特异性试验表明,该抗原不与犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬细小病毒阳性血清发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶1 280.此方法检测134份血清样品的结果与美国SYNBIOTICS试剂盒相比,总符合率达95.6%. 相似文献
102.
以真核表达的焦虫表面抗原重组蛋白 TaSP-Tams1-SPAG1作为 ELISA 板包被抗原,通过方阵实验确定抗原包被浓度,探索抗原包被时间、温度、一抗及二抗血清稀释度及作用时间,建立牛环形泰勒焦虫表面抗原重组蛋白 ELISA 方法.结果得出 TaSP-Tams1-SPAG1的最佳包被浓度为10μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100, ELISA 阳性反应的临界值为 OD 492nm ≥0.348,重复试验变异系数小于12%,所建立的 ELISA 方法不与牛巴贝斯虫及牛瑟氏泰勒虫血清发生反应.TaSP-Tams1-SPAG1为抗原建立的 ELISA 方法特异性强,敏感度高,重复性好,为牛环形泰勒焦虫病的准确检测及防治提供技术支持. 相似文献
103.
104.
105.
鸡白细胞介素-6原核表达及双抗夹心ELISA方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
应用分子生物学技术原核表达ChIL-6,以ChIL-6重组蛋白为免疫原,按免疫程序分别制备兔抗和鼠抗IL-6重组蛋白的多克隆抗体。应用此抗体建立双抗夹心EL-ISA方法后,为了优化此方法本试验对该方法的最佳试验条件、标准曲线、重复性和初步应用进行确定。结果显示,经SDS-PAGE和Western-blot分析,表明ChIL-6在大肠杆菌中正确表达,为了建立检测ChIL6的双抗夹心ELISA方法,本试验应用表达的重组蛋白制备兔抗和鼠抗多克隆抗体。建立的双抗夹心ELISA方法最佳反应条件为包被抗体的质量浓度为50mg/L,4℃过夜;酶标二抗稀释度为1:400,37。C1h;应用该方法检测感染金黄色葡萄球菌后的ChIL-6,其结果与本实验室之前应用人的ELISA试剂盒检测的结果相似。结果表明,本试验建立的检测ChlL-6的双抗夹心ELISA方法可用于临床。 相似文献
106.
[目的]探索ELISA双抗夹心法的最优实验条件,充分发挥其高灵敏、强特异的优点。[方法]从操作的主要步骤出发,在标准品和溶液的配制以及温育等方面进行对比分析。[结果]合格标准品标准曲线的斜率在1.70~2.00,R2在0.99以上;样品稀释浓度的最佳临界值为60ng/ml。[结论]ELISA是个很敏感的试验,在操作过程中,标准品应在-80℃冷冻保存,配制时应避免偏高、偏低或没有梯度,加样量要仔细,应控制为100μl每孔。谨慎选择酶标板,确保吸附性能好、空白值低、孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。洗涤浸泡时间确保为3min。 相似文献
107.
Pim Lindhout Wanda Korta Jeanne Dijkstra 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》1988,94(6):307-310
Samenvatting Een methode werd ontwikkeld om de resistentie van in de kas geteelde tomateplanten tegen tomatemozaïek virus (ToMV) te bepalen. Bladeren van een vatbare en een resistente cultivar werden afgesneden en geïnoculeerd met ToMV. Na 6, 10 en 17 dagen werden de geïnoculeerde bladeren getoetst op de aanwezigheid van virus met ELISA en door inoculatie van bladeren vanNicotiana glutinosa. Met beide toetsmethoden kon de virustoename in de vatbare cultivar al vroeg na inoculatie duidelijk worden aangetoond. In de bladeren van de resistente cultivar was een zeer kleine hoeveelheid virus pas laat na de inoculatie aantoonbaar. Met deze methode is het mogelijk om de resistentie tegen ToMV te bepalen, tevens zaad te winnen en landbouwkundige eigenschappen te evalueren, zonder de plant te infecteren. 相似文献
108.
用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
在常规ELISA间接法的基础上,应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。3龄幼虫饲喂表层涂有HaNPV人工饲料后9小时,即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原,而典型病虫显症需5~6天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ELISA试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫,表明在江苏和山东不同棉区均可检测到HaNPV病毒粒子,但地区间棉铃虫核型多角体病毒检出频率有显著差异 相似文献
109.
110.
Van den Bossche P Shumba W Njagu C Shereni W 《Tropical animal health and production》2001,33(5):391-405
Tsetse have been cleared from large areas of Zimbabwe during the past 65 years. In most areas, they are prevented from re-invading cleared areas by barriers of odour-baited, insecticide-treated targets. A trypanosomosis survey was conducted to determine the effectiveness of such barriers against re-invasion and to confirm the absence of tsetse in areas where they had previously been eradicated. Parasitological diagnostic methods and an anti-trypanosomal antibody detection enzyme-linked immunosorbent assay (antibody ELISA) were used. The prevalence of trypanosomal infections in the tsetse-cleared areas was generally low. However, the prevalence of anti-trypanosomal antibodies was unexpectedly high in some areas. This high proportion of cattle with antibodies could, in most cases, be explained by recent or historic information on the distribution and density of tsetse. The results from the survey demonstrated the value of anti-trypanosomal antibody detection as an additional sensitive tool for monitoring the effectiveness of tsetse control operations. 相似文献