猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建与筛选

在体外将猪带绦虫虫卵孵化为有活力的六钩蚴。采用商品化试剂盒抽提六钩蚴总 RNA、m RNA,反转录为双链c DNA,再加 Eco R Adapter。在去除小片段后 ,dsc DNA与 λgt11噬菌体 DNA连接 ,经蛋白包装 ,构建了猪带绦虫六钩蚴λgt11c DNA文库。该文库效价为 3.5× 10 9pfu/ m L ,重组 DNA片段大小为 0 .5～ 3.2 kb,平均为 1.6 kb,蓝白斑比 1∶ 9。用抗体探针对文库进行免疫学筛选 ,在消除非特异性反应的基础上筛选约 10 6 重组子 ,共得到 118株强阳性克隆 ;应用 PCR鉴定上述部分阳性克隆 ,均扩增到 0 .5 kb以上的片段。结果显示 ,构建的文库合格 ,含六钩蚴所有抗原基因 ,可用于六钩蚴 c DNA克隆的筛选 ;用免疫学与 PCR联合筛选 c DNA文库 ,可消除假阳性     

无公害添加剂组合对肉仔鸡生产性能的影响

选1日龄商品代艾维因混合健雏480只，按单因子随机试验设计分为4组，每组4个重复，每重复30只进行试验。对照组饲喂基础日粮 5mg／kg维基尼亚霉素；试验l，2，3组鸡21日龄前分别饲喂基础日粮 0．1％生命素 0．5％迈克活菌酶；基础日粮 500玎骧／kg糖萜素 0．5％迈克活菌酶；基础日粮 300mg／／kg糖萜素 0．3％迈克活菌酶 0．06％生命素。21日龄后分别饲喂基础日粮 0．1％生命素 0．3％迈克活菌酶；基础日粮 300叫kg糖萜素 0．3％迈克活菌酶；基础日粮 200mg／kg糖萜素 0．2％迈克活菌酶 0．05％生命素。各组基础日粮完全相同。试验结果表明：3个试验组供试鸡的体增重分别比对照组提高10．24、9．61和12．48％．料重比分别降低7．50、7．08和11．67％，每只鸡实际赢利分别增加0．5ll、0．671和1．019元，生物学综合评定值分别为106．12、105．75和108．56。不同无公害添加剂组合对维基尼亚霉素具有显著替代作用。     

野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析

海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下.     

T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。     

温、湿度的控制及其对鸡球虫病的影响

1温、湿度对鸡球虫病发生的影响鸡球虫病是孢子虫纲球虫目艾美耳属的球虫所引起的一种肠道寄生性原虫病,其感染途径和方式是因为鸡啄食了被孢子化卵囊(感染性卵囊)污染过的饲料、饮水、土壤等。健康鸡从食入卵囊到子代卵囊从粪便中排出约4～7天,从感染鸡粪便中第一批排出到最后     

半胱胺不同添加方式对生长肥育猪胴体品质的影响

在生长期和肥育期的猪基础日粮中分别添加360mg／kg和450mg／kg半胱胺(CS)(试验I组每6d添加1d，5d间隔期喂基础日粮)或分别添加60mg／kg和75mg／kgCS(试验Ⅱ组)，研究CS不同添加方式对生长肥育猪酮体品质的影响。屠宰试验表明：胴体瘦肉率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别提高5．24％(P＜0．05)和4．63％(P＜0．05)，胴体脂肪率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别降低9．52％和8．53％(P＜0．05)。肉质测试表明，CS对背最长肌肉质无明显影响。经包被处理的CS间断性添加和持续添加对朋体性状和肉质均无显著性差异。试验I组和试验Ⅱ组的皮下激素敏感脂酶和血清中生长激素含量分别比对照组提高41．38(P＜0．05)、31．11(P＜0．05)和38．23(P＜0．05)、24．44％(P＜0．05)。     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠和脾脏一氧化氮合酶的表达

采用NADPH—d(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate—diaphroase)组织化学法观察了雏鸡感染柔嫩艾美耳珠虫(E．tenella)后一氧化氮合酶(N0S)在盲肠和脾脏中的分布与表达情况。试验结果表明，所有正常鸡盲肠粘膜下层和肌层均有较深的着色，根据以往的资料和N0S的表达特性初步判断为神经元型N0S(nNOS)；试验鸡在感染后3～5d，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮也有较深的着色，并从感染后7d开始着色减弱；而对照组鸡盲肠粘膜上皮和肠腺上皮以及对照组和试验组的脾脏几乎不着色或着色很浅。试验结果提示，盲肠粘膜上皮和肠腺上皮的着色可能是诱导型N0S(iN0S)表达的结果，而由其产生的N0参与雏鸡球虫感染过程。     

猪主要疫病免疫技术

猪主要疫病疫苗种类1以有无增殖力可分为“弱毒活苗”与“灭活疫苗”；2以增殖系统不同可分为“动物组织疫苗、禽胚疫苗、细胞疫苗、生物反应器—转基因动物与植物疫苗（分为可食和不可食两种）”四大类；3以生物学差异可分为“病毒疫苗、细菌疫苗、原虫疫苗”三大类；4以工艺差异可分为“冻干疫苗、湿苗、各类佐剂疫苗（油佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂、脂质体佐剂、中草药佐剂等）”三大类；5以技术水平可分为“第一代传统完整病原体疫苗、第一代传统亚单位疫苗、第二代生物工程疫苗（包括基因工程活载体疫苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗、基因…     

禽类养殖场防疫管理存在的问题及对策

随着市场经济的繁荣和发展，养禽业得到长足的发展，丰富了城乡居民的菜篮子，增加了农民的收入，为农村经济的发展增添了活力。然而，一场禽流感引发出很多平时被忽视的养禽场防疫管理上的问题。     

微生态制剂的作用机理及应用

动物微生态制剂是根据动物微生态学基本原理研制而成，用于调节动物机体微生态平衡，具有直接通过增强动物对肠内有害微生物的抑制作用或非特异性免疫功能来预防疾病的特点，是促进动物生长或提高饲料转化率的一类药物或饲料添加剂。由于它是由正常菌群微生物所制成的生物制品，因此称为活菌剂或生理菌苗。