抗独特型抗体和吡喹酮协同预防绵羊日本血吸虫病的研究——Ⅰ.抗独特型抗体疫苗和吡喹酮对绵羊肝脏虫卵肉芽肿形成的影响

本研究将日本血吸虫单克隆抗独特型抗体（抗－Ｉｄ）结合佐剂ＦＣＡ／ＦＩＡ免疫的绵羊设为抗－Ｉｄ免疫组，将在攻击感染日本血吸虫尾蚴前２小时肌注低剂量吡喹酮（ＰＺＱ）的绵羊设为ＰＺＱ组，将既用抗－Ｉｄ免疫又在攻击感染前肌注ＰＺＱ的绵羊设为协同组，同时设空白和ＦＣＡ对照组。在攻击感染血吸虫后的第１２周，剖杀各组绵羊，收集肝脏病理组织块，经切片和染色后，用显微镜测量各组肝脏单个虫卵肉芽肿直径。结果发现，抗－Ｉｄ组、ＰＺＱ组和协同组的肉芽肿直径分别为０．４１、０．４２和０．４０ｍｍ，均明显小于空白对照组（０．５１ｍｍ，Ｐ＜０．０５），也小于ＦＣＡ对照组。组织病理观察结果表明，试验组虫卵周围的多核巨细胞数量明显高于对照组。实验结果提示，抗－Ｉｄ免疫和预防性注射ＰＺＱ均能直接影响虫卵肉芽肿的形成，并且二者存在协同作用，对探讨血吸虫病免疫预防机理的研究具有一定的意义。     

日本血吸虫谷胱甘肽S—转移酶小鼠免疫试验

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏佐剂免疫了二批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％，粪便减卵率，ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２８、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。     

六种漂浮液对家兔粪便中血吸虫虫卵的浮集效果试验

比较研究了硝酸铅、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸镁、硫酸锌、硫酸锰等6种饱和溶液对人工感染日本血吸虫家兔粪便中虫卵的浮集效果,结果上述漂浮液对虫卵的阳性检出率分别为20％、26.7％、100％、60％、93．3％、100％,以硫代硫酸钠的浮集效果最好,其阳性检出率高,且虫卵清晰易辨,杂质较少。     

日本血吸虫(中国大陆株)虫卵全长cDNA文库的构建及分析

成熟虫卵是血吸虫病的主要致病因素和传播的唯一因子,抗卵免疫对于预防血吸虫病和阻断传播流行均具有重要意义。应用SMART cDNA文库构建技术,构建日本血吸虫虫卵全长cDNA文库。文库容量为7.55×106,滴度为7.2×1010,重组比率为97%。应用三个已知全长基因(SjPP,SjTEGT and SjeIF 5)引物在文库中成功钓取到相应的全长基因。另外还由文库直接扩增到一个日本血吸虫新基因烯醇酶基因。高质量的虫卵全长cDNA文库的构建,为抗病疫苗尤其是抗卵抗原的筛选和研究提供了重要资源。     

阿魏有效成分对感染日本血吸虫小鼠治疗作用研究

中药阿魏（Resina ferulae）属伞形科植物（umbellifeme）,又称大茴香。世界上约有150余种,现主要分布于地中海、中亚及其邻近地区;我国有26种1变种,主要分布于新疆。该属有许多药用种类。具有止痢、消积、解毒、杀虫等功能,民间常用于治疗消化系统疾病。为了解阿魏对日本血吸虫的杀灭作用,进行了以下试验。     

数种5—羟色胺受体拮抗剂对日本血吸虫运动性的影响

采用肉眼观察法测定不同５－羟色胺（５－ＨＴ）受体拮抗剂对日本血吸虫运动性的影响。结果表明：（１）１０－３ｍｏｌ／Ｌ和１０－４ｍｏｌ／Ｌ的５－ＨＴ作用虫体３０ｍｉｎ后，虫体运动显著增强，而１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，虫体运动稍有增强。１０－３ｍｏｌ／Ｌ色胺（ｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）也可显著增强虫体运动，但１０－４ｍｏｌ／Ｌ、１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，作用则不显著。（２）用１０－３ｍｏｌ／Ｌ赛庚啶（ｃｙｐｒｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ）、曲拉唑酮（ｔｒａｚｏｄｏｎｅ）、米安舍林（ｍｉａｎｓｅｒｉｎ）、螺环哌啶酮（ｓｐｉｒｏｐｅｒｉｄｏｌ）、氟哌丁苯（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ）作用虫体１ｈ后，除ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ外，其余均可对虫体产生不同程度的拮抗作用。（３）先用１０－４ｍｏｌ／Ｌ５－ＨＴ培养虫体３０ｍｉｎ，当虫体运动增强后，再用上述拮抗剂作用虫体１ｈ，发现ｃｙｐｒｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ、ｍｉａｎｓｅｒｉｎ、ｔｒａｚｏｄｏｎｅ对虫体有拮抗作用，ｓｐｉｒｏｐｅｒｉｄｏｌ略有拮抗，而ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ有一定协同兴奋作用，这些拮抗剂不仅对内源性５－ＨＴ有作用，而且对外源性５－ＨＴ均有拮抗性。初步判定，日本血吸虫体内存在５－ＨＴ受体。     

日本血吸虫合成表位肽疫苗对小鼠的保护性免疫

为观察日本血吸虫合成表位多肽疫苗诱导的保护性免疫,将用日本血吸虫抗原免疫血清筛选噬菌体随机12肽库得到的、具有较好免疫保护性的4个模拟抗原表位短肽进行人工合成,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测它们的抗原性.将合成多肽分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)连接后免疫昆明小鼠,第3次免疫后收集血清,检测其针对各个多肽和可溶性成虫抗原(AWA)的IgG抗体滴度,以及补体介导的小鼠体外杀日本血吸虫童虫作用.结果显示,4个合成多肽均能被相应的抗体识别,具有良好的抗原性;能诱导产生特异性IgG抗体.这些抗体在补体参与下能在体外有效毒杀血吸虫童虫.与正常小鼠血清比较,4个合成多肽免疫血清的杀童虫率分别为31.7%,41.3%,21.1%和17.3%,均具有显著性;与KLH免疫血清相比时,杀童虫率分别为23.7%,34.4%,11.8%(P=0.077,无显著性)和7.5%(P=0.102,无显著性).这些结果表明,这4个合成表位多肽具有良好的抗原性和免疫原性,与KLH连接后能诱导明显的抗体反应和显著的细胞毒作用.     

动物血吸虫病防制的主要进展、问题和今后工作重点

1 我国动物血吸虫病流行现状日本血吸虫病曾在我国南方12个省、市、自治区的400个县(市、区)流行,据统计全国曾有钉螺面积140亿m~2,病人1000万,病畜百万头以上。解放后,在党和各级政府的领导下和血防工作者的辛勤劳动下,我国血防工作取得了举世瞩目的成就,至今已有227个县(市、区)达到消灭血吸虫病标准,55个县达到基本消灭标准,占总疫区县数的70%,但尚有7个     

中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的RAPD遗传标志分析

中华拟德氏吸虫(Paradeontacylix sinensis)是冷血吸虫,日本血吸虫(Schistosoma japonicum)是温血吸虫的重要代表。分别对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫的全基因组进行随机扩增多态性研究,筛选出31种随机引物,对2种成虫扩增得到189条多态性基因片断,S6、S46对中华拟德氏吸虫全基因组有特异性,分别扩增出一条大小约399bp和695bp的特异性强条带;引物S2对日本血吸虫基因组有特异性,只扩增1条1670bp的特异性强条带。多数引物对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫全基因组扩增出大小相似的条带,推测中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的亲缘关系密切。     

血吸虫DNA疫苗的研究新进展及展望

血吸虫病是一种严重危害人类及家畜健康的寄生虫病,目前对该病的防治主要通过化学药物来完成,但不能有效地防止该病的再感染.据报道,全球约6亿人生活在血吸虫疫区,2亿人受感染,1.2亿人出现临床症状,年死亡人数多达数十万.在我国,血吸虫病主要分布于长江流域的13个省市,以湖北、湖南、江西、安徽和江苏5省最为严重,给人民健康带来了严重危害.由于日本血吸虫寿命长、危害大、动物宿主多,因此单一用药不能阻断其传播.同时由于血吸虫感染人体后不能产生较好的免疫保护力,使血吸虫病的防治效果难以巩固,因此有必要研制能使宿主产生长期抵抗血吸虫感染的疫苗以促进血吸虫病的防治.血吸虫疫苗的研究经历了死疫苗、减毒活疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗多个阶段,近几年来基因疫苗的研究发展迅速,具有良好发展前景.