日本血吸虫抱雌沟蛋白筛选噬菌体展示抗原对小鼠血吸虫病免疫效果观察

在前期研究中我们利用日本血吸虫抱雌沟蛋白筛选日本血吸虫噬菌体展示cDNA文库,共获得10种阳性噬菌体克隆。本研究选择其中5种噬菌体克隆单独或联合免疫小鼠,观察其对血吸虫成虫合抱的影响以及对血吸虫病的免疫预防效果。结果显示,19号克隆单独免疫和6号、18号混合免疫在预防实验中分别取得了40.53%和31.14%的减虫率及35.31%,44.65%的肝脏减卵率。研究结果提示,19号、6号和18号噬菌体展示的EST序列编码基因具有一定的抗血吸虫生殖免疫效果,在血吸虫疫苗研究方面具有重要价值。     

三联Dot-ELISA与粪检法检测牛日本血吸虫的比较研究

本试验以疫区随机抽取的148头黄牛为研究对象,应用血清学诊断方法三联斑点酶联免疫吸附试验(三联Dot-ELISA)与粪检方法检测日本血吸虫病。通过三联Dot-ELISA与粪检的检测效果、检测费用的评价与分析,研究结果表明:三联Dot-ELISA与粪检结果符合率高,具有灵敏度高、特异性好、简捷方便、费用低等特点,适用于疫区家畜血吸虫病的诊断、普查,是比较理想的现场检测方法,值得推广。     

日本血吸虫凝溶胶蛋白基因在虫体不同发育阶段的转录水平分析

肌动蛋白细胞质骨架负责细胞形态的维持,其多方面的功能涉及到细胞的运动性,如小囊泡运输与胞质分裂。肌动蛋白微丝的排列与组装受到大约100种肌动蛋白结合蛋白的调控。     

湖北钉螺作为一种侧殖吸虫中间宿主的发现

作者在研究血吸虫的过程中,发现湖北钉螺是一种侧殖吸虫的中间宿主,并且该吸虫在螺体内有“早熟现象”。     

日本血吸虫基因重组抗原rSj06868对小鼠的免疫保护效果

为克隆、表达日本血吸虫假想蛋白SJCHGC068068编码基因（暂命名为Sj06868）并观察重组抗原的免疫预防效果。应用PCR技术从日本血吸虫7 d童虫、14 d童虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆到Sj06868基因的46-438 bp DNA片段,BLASTn分析未发现其他物种中的同源性序列,也未发现其保守序列和相关功能结构域。以pET32a为表达载体、Sj06868基因在大肠杆菌Rosetta（DE3）中获得高效表达,表达产物rSj068068分子量为36 kDa,能被感染血吸虫14 d兔血清识别。将纯化的重组抗原与佐剂ESSAI ISA 206 CELL混合后免疫BALB/c小鼠,与佐剂对照组和PBS对照组相比,分别获得了31.63%、29.19%减虫率以及55.63%、56.27%肝脏虫卵减少率。用ELISA检测各组血清中抗rSj068068特异性抗体结果显示,免疫组在攻击感染前、佐剂对照组和PBS对照组在感染后均产生了较高水平的特异性抗体。本研究结果说明,Sj068068是日本血吸虫特有的童虫期高表达基因,rSj068068在抗血吸虫疫苗和血吸虫感染的诊断方面均有潜在应用价值。     

初步建立LAMP技术检测粪样内华支睾吸虫虫卵DNA的方法及反应条件优化

华支睾吸虫病(clonorchiasis)是由华支睾吸虫(Clonorchiasis sinensis)寄生于终末宿主人、哺乳动物肝胆系统内引起的以肝胆病变为主的一种重要的人畜共患寄生虫病,一般表现为消瘦、营养不良,严重影响人类健康以及畜牧业的发展。该病是我国最严重的食源性寄生虫病之一,已被卫生部列为我国重点防     

miRNAs在日本血吸虫不同发育时期的表达情况研究

本研究基于前期对日本血吸虫体内miRNAs的高通量测序及免疫共沉淀研究结果,利用半定量RT-PCR技术对24个miRNAs在15、20、28 d的日本血吸虫雌雄虫体内的表达情况进行了检测,并进一步利用实时定量RT-PCR验证表达差异明显的miRNAs。结果表明bantam、miR-1989、miR-31这三个miRNAs的表达具有期特异性,且均在雌虫中高表达;miR-219在雄虫体内高表达;其余的miRNAs在各个时期均有表达,但表达情况没有明显差异。研究结果对深入理解这些miRNAs在日本血吸虫性成熟或者生殖产卵方面的功能奠定了基础。     

日本血吸虫四跨膜孤儿受体(TOR)克隆及其第一个膜外区基因的表达

埃及血吸虫和曼氏血吸虫四跨膜孤儿受体(trispanning orphan receptors,TOR)受体可以结合补体C2a,可能在血吸虫免疫逃避过程中起重要作用。为研究日本血吸虫TOR受体的特性和功能,利用PCR扩增到Sj TOR基因并进行了生物信息学分析;同时克隆了Sj TOR基因N端第一个膜外区(ed1)基因,构建了重组质粒p ET-28a-Sj TOR-ed1,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达后用组蛋白亲和层析纯化获得重组蛋白Sj TOR-ed1,Western blot结果显示r Sj TOR-ed1能被日本血吸虫阳性小鼠血清识别。该研究为进一步开展研究日本血吸虫TOR受体的功能提供了基础。