紫花苜蓿MsMYB33基因克隆、亚细胞定位及转录自激活检测

MYB(V-myb Avian myeloblastosis viral Oncogene Homolog)转录因子数量较多、功能多样,在植物的发育过程中起着十分重要的作用。为了探究紫花苜蓿(Medicago sativa)中MsMYB33基因的亚细胞定位及自激活特性,本研究从紫花苜蓿中克隆MsMYB33基因,该基因开放阅读框为1 641 bp,编码多肽含有546个氨基酸。遗传进化树显示MsMYB33蛋白与鹰嘴豆(Cicer arietinum)中的CaMYB33蛋白同源关系最高。将MsMYB33与黄色荧光蛋白(Yellow fluorescent protein, YFP)进行融合表达,结果显示：MsMYB33蛋白定位于细胞核。通过DNA重组技术成功构建pGBKT7-MYB33酵母表达载体,并转化到Y2HGold酵母菌中。酵母自激活检测结果显示,MsMYB33具有自激活活性,进一步分析发现激活区域位于C端。本研究为进一步研究紫花苜蓿MsMYB33基因及MYB转录因子家族提供了科学依据。     

牛坏死杆菌对小鼠巨噬细胞的增殖和自噬影响的初步探究

为探究牛坏死杆菌对小鼠巨噬细胞系(RAW264.7细胞)增殖和自噬的影响,本研究将牛坏死杆菌A25株以MOI 10感染RAW264.7细胞作为实验组,以未感染的RAW264.7细胞作为对照组。分别于感染后1 h、2 h、4 h收集细胞,采用Ed U和MDC染色法观察细胞荧光,并计算各组细胞增殖率及细胞自噬小体的数量。Ed U染色法观察可见,各实验组随着感染时间的延长,绿色荧光的量逐渐减少,对照细胞绿色荧光的量基本无变化,且与对照组相比,随着感染时间的延长,感染组细胞增殖率均极显著降低(P<0.05);MDC染色法观察结果可见,与对照组相比,随着感染时间的延长,感染组细胞中的绿色荧光逐渐增强,且随着感染时间的延长,细胞中自噬小体的数量与对照组相比均极显著增多(P<0.01)。上述结果表明,牛坏死杆菌感染RAW264.7细胞后抑制细胞的增殖,并且诱导该细胞发生自噬。分别采用荧光定量PCR (RT-qPCR)和western blot检测上述各组细胞中自噬基因Beclin-1和P62 mRNA的相对转录水平及自噬蛋白LC3和P62的相对表达水平。RT-q PCR结果显示,与对照组...     

细胞自噬与猪流行性腹泻病毒相互作用的研究进展

猪流行性腹泻病毒（PEDV）是冠状病毒科甲型冠状病毒属的一种有囊膜的单股正链RNA病毒,对全世界养猪业造成了巨大的损失。PEDV与宿主之间的致病机制和免疫调节相互作用仍不清楚。有研究表明冠状病毒可以诱导细胞发生自噬,并且与病毒的复制有着密切的联系,病毒与细胞自噬之间的关系十分复杂,虽然病毒感染与细胞自噬之间的关系研究比较广泛,但细胞自噬在PEDV感染中的作用报道较少。研究PEDV与细胞自噬的相互作用可以加速对PEDV感染入侵机制的理解,为未来研究病毒治疗和抗病毒药物提供新的思路。     

鹅细小病毒诱导番鸭胚成纤细胞自噬

细胞自噬在病毒生命周期中发挥着重要作用,目前国内仍然没有鹅细小病毒(GPV)与细胞自噬关系的系统研究。本研究旨在探讨番鸭小鹅瘟病毒(MDGPV)PT株与短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV) M15株细胞适应毒感染番鸭胚成纤维细胞(MDEFs)后对细胞自噬的影响,以及细胞自噬对病毒增殖的作用。通过激光共聚焦方法观察自噬标记物LC3-Ⅱ特异绿色荧光聚集颗粒,借助蛋白免疫印迹检测LC3蛋白与p62蛋白的表达量,以及LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白转化分析,确定GPV感染能够促进细胞自噬发生。利用膜通透性半胱氨酸蛋白酶抑制剂阿洛司他丁、自噬诱导剂雷帕霉素以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤,调控自噬来研究细胞自噬对病毒增殖的影响,结果显示细胞自噬有利于GPV在MDEFs中的复制。结果表明GPV感染能够诱导细胞自噬,同时细胞自噬有利于病毒在宿主细胞中的复制。     

纳米氧化铁抑制鸡巨噬细胞沙门氏菌感染的作用研究

为研究纳米氧化铁对鸡巨噬细胞沙门氏菌感染的抑制作用,试验选择鸡巨噬细胞（HD11）进行沙门氏菌攻毒,并加入纳米氧化铁处理,对细胞形态、活力、抑菌率、活性氧水平及自噬蛋白表达等指标进行检测。结果显示：与对照组相比,在20～200μg/mL浓度梯度内,纳米氧化铁对HD11细胞活力无显著影响（P>0.05）,但对HD11细胞内的沙门氏菌均有显著抑制作用（P<0.05）,抑菌率为28.7%～66.2%;沙门氏菌和纳米氧化铁在单独和共同处理的情况下,均显著提高HD11细胞的活性氧水平（P<0.05）;沙门氏菌和纳米氧化铁共同处理,显著提高细胞自噬蛋白的表达（P<0.05）。研究表明,纳米氧化铁抑制HD11细胞内沙门氏菌的感染,从而为沙门氏菌减抗防治研制提供新思路。     

近二十年喀什地区植被覆盖的时空变化与影响因素分析

以2000—2019年喀什地区NDVI时序数据集为试材,采用统计分析法、斜率回归趋势线法、地统计分析等方法,研究了近20年来喀什地区植被覆盖的时空变化及其影响因素,以期为喀什地区生态环境和社会经济可持续发展提供服务。结果表明：1)喀什地区2000—2019年的NDVI均值在时序上呈微小的上升趋势,均值为0.177,20年的增长率为0.66%,变异系数为8.90%,并在2003年发生突变。2)近20年的NDVI在空间上呈区域性和时段性上升与退化并存特征,显著的聚集分布,并且植被覆盖整体空间上呈增加趋势。3)相关性分析表明,自然和人文社会因素的影响在空间上具有区域性差异的特征,NDVI高值集中分布于地形平坦和水资源丰富的绿洲地区。不同土地利用类型的NDVI均值大小呈耕地>城乡用地>林地>草地>未利用土地>水域的特征。水系、交通线和居民点附近NDVI均值较高,各城市化因素与NDVI均值呈显著正相关。4)近20年喀什地区NDVI在时空上呈微弱的增长趋势,且自然和人文社会因素共同引起喀什地区植被覆盖的时空变化。     

大棚桃树品种选择要点

大棚栽培桃树品种选择应掌握以下要点:一是要早熟或极早熟。只有早熟品种,才能早上市,抢占市场,效益高。二是需冷量低。只有需冷量低,才能提早扣棚,促进生长和早熟。三是品质好。要选择果个大、色泽艳丽、含糖量高、耐贮运的品种。四是花粉量大。要求复花芽多,花粉量大,自花结实率高,这是丰产、稳产的基础。五是要配置授粉树。在同一棚中要配置1～2个花期基本一致的授粉品种树,     

园林景观微信公众号运营策略分析——以智筑网为例

现今,移动端阅读已成为受众获取信息的主要方式,传统媒体纷纷踏入新媒体及自媒体领域,媒体门槛无限降低,人人可以成为媒体的一部分。这也对有网络营销需求的园林景观从业者带来了一定的机遇和挑战。本文介绍微信公众号起源,发展现状及趋势,通过对比研究5个园林景观相关的微信公众号,剖析运营现状,指出存在的问题,并总结适合园林景观行业的微信公众号运营策略。     

苹果幼园间作技术

近年来,宝鸡地区新建矮化密植苹果园面积较大,矮化自根砧或双矮果园普遍采用宽行密植、网格立架扶干栽培模式（株距1-2 m,行距3.5-4.0 m）。由于行间较宽,幼树期（1-3年）间作较为普遍,笔者对间作物种类、收益及对幼树生长的影响进行了多点调查,并对间作技术提出具体要求。