苹果砧木M26试管苗不定根发育过程中蛋白质的变化

为进一步了解木本植物不定根发生、发育的机理,对苹果砧木M26试管苗不定根的发生、发育过程进行解剖观察,利用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对M26试管苗在接入生根培养基前后,不同时期表达的蛋白进行了研究。结果发现:在不定根原基形成和发育的阶段性过程中,茎基部蛋白质的种类和数量出现明显差异。生根培养后,在继代苗茎基部表达的5条蛋白条带减弱或消失,其分子量分别为26.8 kDa、37kDa、40.3 kDa、43 kDa和66 kDa;明显表达了4条新的蛋白条带,其分子量分别为26 kDa、27.7 kDa、32.5 kDa、和45 kDa,同时有4条蛋白条带(38.5 kDa、42 kDa、53.2 kDa和55.5 kDa)其表达丰度提高。多种蛋白条带的消失和出现,可作为M26试管苗不定根产生的生化标志。在不定根原基逐步形成发育的同时,有3条蛋白条带的表达丰度也逐步提高,可作为不定根形成过程表达的特异标记蛋白带。     

羊和猪胎盘肽的制备及其生物活性的初步研究

利用超滤法从羊和猪胎盘中提取出了胎盘肽,采用改良的加脲Tricine—SDSPAGE电泳法测定羊胎盘肽的分子量为4,386Da;利用紫外光扫描得其最大吸收峰分别为225．4nm和209．6nm;并通过建立体外抑制兔淋巴细胞模型,利用MTT比色法测定所提取胎盘肽的免疫调节作用,结果显示：羊和猪胎盘肽均可使顺铂抑制的兔外周血T淋巴细胞的转化率显著提高。其中羊胎盘肽以1：10^2、1：10^3和1：10^4三组效果最为明显（P〈0．01）;而猪胎盘肽以1：10^2、1：10^3两组效果最为明显（P〈0．01）。     

NaCl胁迫对黑小麦根系DNA损伤的影响

[目的]探究氯化钠(NaCl)胁迫对黑小麦根系DNA损伤的影响,为寻求减轻环境因子对植物DNA损伤的方法及培育耐盐黑小麦品种提供参考.[方法]以黑小麦品种漯珍1号为材料,采用5个NaCl质量浓度(0、3、6、9、12和15 g/L)溶液处理黑小麦幼苗根系,通过彗星电泳试验,利用CASP 1.2.2分析代表黑小麦幼苗根系DNA损伤的尾部DNA含量、尾长和尾矩等指标.[结果]随着NaCl质量浓度的增加,彗星头部渐小,拖尾渐长,黑小麦根系DNA损伤片断的迁移水平逐步上升.尾部DNA含量、尾长和尾矩均随着NaCl质量浓度的增加呈升高趋势,在15 g/L处理下,三者的升幅分别达67.56%、139.40%和39.88%.随着NaCl质量浓度的增加,Olive尾矩(OTM)均有提高,但增长率慢慢下降,12~15 g/L的增长率降至5.42%,说明黑小麦具有一定的耐盐性.[结论]NaCl胁迫会引起黑小麦根系DNA损伤,且受损程度随着NaCl质量浓度的增加而愈发严重,但黑小麦对NaCl胁迫仍存在一定抗性.     

风湿祛痛胶囊中地龙药材的鉴定

目的地龙是巨蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum (E.Perrier)、通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓Pheretima guillelmi (Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的干燥体。具有清热定惊,通络,平喘,利尿的功效。近年来,由于需求量大,出现地龙掺假的现象,于是采用分子生物学方法来鉴定地龙的真伪,同时建立一种鉴定地龙的方法。方法提取地龙粉末、地龙水提物、地龙醇提物、风湿祛痛胶囊的DNA,采用PCR方法得到PCR产物,并电泳鉴定其产物大小,鉴定地龙真伪,通过实验验证方法的稳定性。结果研究发现含有地龙的制剂的PCR产物均在260bp之间有单一条带,并摸索得出鉴定的条件为:95℃预变性5 min,35个循环(95℃变性30 s,58℃30 s,72℃30 s),72℃延伸5 min,经过验证具有稳定性。     

大伙房水库翘嘴红鲌和青梢红鲌杂交后代同工酶电泳鉴定

辽宁省大伙房水库于1957年建成，属丘陵型水库。青梢红鲌(Erythrocutter dabryi)和翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)是在建库初期，随长江鲢鳙鱼苗放养而混入水库的。目前，二者已形成了优势群体。1980年，我们分析了这两种鱼的形态学特征，发现了一部分变异个体，其体型和下颌骨厚度介于二者之间，有青梢红鲌和翘嘴红鲌杂交的迹象。     

鲤鱼血清蛋白,血红蛋白,LDH和EST同工酶的电泳分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了鲤鱼性成熟期雌雄个体的血清蛋白、血清脂蛋白和血红蛋白,结果是雌雄个体血清蛋白电泳图谱有差异,雌性(14条)比雄性(13条)多1条蛋白带;血清脂蛋白和血红蛋白无性别差异。同时,测定了鲤鱼血清、肝胰脏、心脏、背部肌肉和眼晶体的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶和酯酶(EST)同工酶,LDH具有组织特异性,除在肝胰脏分离出9条酶带外,在血清中也分离出8条酶带,表明有LDH—c基因的作用,EST同工酶表现出明显的多态性,表明在鲤鱼各组织中有多个基因座位起作用。     

同工酶影响因素的探讨

同工酶技术是生物化学和分子生物学不断发展的产物。早在1895年,Fischer就提出了同工酶的概念。195 7年Hunter和Markert发明了酶谱技术,即:将凝胶电泳与组织化学染色方法相结合来鉴定分离酶类。这种技术的特点是对多种酶的同工酶的鉴定具有很强的解析能力。它打开了真正认识同工酶的大门,促进了各国学者对同工酶的广泛研究。同工酶技术经过几十年的发展,已经比较成熟,在遗传育种、生理学、病理学、系统分类学等学科方面都有广泛的应用。应用范围包括植物、动物和细菌等。但它也同其它学科一样是一门正在不断发展尚需不断完善的学科。1　影…     

介绍鱼类组织中蛋白质及同功酶的电泳方法

<正> 近年来用醋酸纤维薄膜、琼脂糖、淀粉凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持物的电泳分离技术,对生物的各种组织蛋白及同功酶的研究已广泛应用。目前利用蛋白电泳和同功酶谱的变化来鉴定鱼类、了解种的地理分布、生理情况以及遗传育种、生物进化等方面已成为一种有效的实验生化技术。几年来,我们摸索了一些方法,通过实验在某些方面作了改进,效果较为满意,现将方法和经验分别作介绍,供参考。     

用A-PAGE鉴定谷子遗传多样性

蛋白质是结构基因编码的产物 ,其组成不因环境条件的改变而改变 ,可以作为对其编码的结构基因的标记。大量研究表明 ,禾谷类作物种子贮藏蛋白具有相当大的多态性 ,不同品种贮藏蛋白的电泳谱带存在较大差异 ,因此提供了一种表征基因型差异的有效而简便的方法[1～ 3] 。谷子种子的主要贮藏蛋白是醇溶蛋白 ,占种子总蛋白的4 5 %～ 6 0 % [4 ] 。在研究材料很少的情况下 ,碱性检测条件下谷子醇溶蛋白十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)检测出的遗传差异很小或几乎没有[5,6 ] 。近年来 ,禾谷类作物种子醇溶蛋白以酸性聚丙烯酰胺凝…