农村快递末端共同配送问题探析——以山西省长治市石哲镇为例

随着农村地区电子商务的蓬勃发展,农村快递末端配送问题暴露日益明显,服务质量不高、配送效率低下、消费者体验差等现象严重阻碍了快递下乡进程。该文以山西省长治市石哲镇为例,分析了当前农村快递末端配送模式及存在问题,引进以中国邮政为主导的末端共同配送体系,并对比分析成本和效益,探讨该共同配送模式的必要性和可行性。结果表明,共同配送模式既能实现企业降本增效,又能提高末端服务质量。     

电子机械制动系统制动执行器建模与试验

电子机械制动系统以电驱动元件为制动执行器,取代传统的液压或气压制动执行器。阐述了电子机械制动系统的结构组成、工作原理及电子机械式制动执行器的结构,建立了制动执行器的数学模型,并对制动执行器原理机进行了试验验证。     

饲料回肠末端氨基酸消化率测定方法的研究

畜禽饲料回肠消化率是一项评评价饲料营养价值更有效的指标，和以配制日粮，更符合畜禽对营养物质的需要，饲料因种类，来源及加工处理不同，回肠消化率也表现出差异；同时饲料回肠消化率又受动物年龄，性别、生长阶段及生产目的影响。     

日粮纤维对猪回肠末端氨基酸及其内源性氨基酸流量的影响

影响猪内源性氮和氨基酸流量的因素很多,如饲料采食量、体重、抗营养因子含量、日粮蛋白质水平以及日粮纤维水平等。对纤维而言,由于物理和化学性质的不同,对猪消化道内营养物质的影响也不尽相同。而在影响内源性氮和氨基酸排泄的因素中,日粮纤维的来源和成分比纤维的水平更具有影响。     

桑树幼叶cDNA文库的构建及部分表达序列标签分析

基于为鉴定和克隆桑树功能基因提供基础信息的目的,采用RNA转录5′末端转换(SMART)法构建了桑树幼叶全长cDNA文库。该文库容量为1.02×106pfu/mL,重组率95%,符合构建基因文库的质量要求。从构建的桑树幼叶cDNA文库中随机挑取48个克隆进行表达序列标签(EST)测序,有效序列为32条,经UniGene数据库归并后为32条,UniGene比率为100%;与NCBI核酸数据库进行比对、查询和注释,在32条序列中有29条序列具有同源性,其中16条为全长序列,完整性比率为55.2%;初步发现具有已知功能基因的ESTs 6个,具有推测功能基因的ESTs 5个,未命名或未知功能基因的ESTs 21个。     

产气荚膜梭菌α毒素C末端的三拷贝串联表达与免疫原性分析

本研究旨在获得产气荚膜梭菌α毒素（CPA） C末端（第247－370位氨基酸,CPA_C）三拷贝串联融合蛋白,并评价其免疫原性。对已知的A型产气荚膜梭菌CPA_C编码基因（GenBank登录号：AY823400.1）进行优化设计,以同向串连的方式串联成三拷贝基因（GCPA_C3）,片段之间用柔性氨基酸linker （GGGS）连接,经人工合成后克隆至原核表达载体pET-30a （＋）中进行表达与纯化,获得CPA_C的三拷贝重组蛋白（rCPA_C3）。利用Western blotting方法检测rCPA_C3与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清的反应性。将rCPA_C3与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。在二免21 d后,对家兔经耳缘静脉注射1个家兔最低致死剂量（MLD）的A型产气荚膜梭菌毒素,检测rCPA_C3对家兔的免疫保护效果。结果显示,rCPA_C3主要以包涵体的形式表达,且能与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;每毫升的一免抗血清可中和30~50个、二免抗血清可中和70~100个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素。采用1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%（4/4）死亡,免疫组得到了100%（4/4）的保护。以上结果说明,rCPA_C3具有良好的免疫原性,为A型产气荚膜梭菌病基因工程疫苗的研制提供了重要的试验数据。     

木材干燥窑排潮执行器的改进

正木材干燥窑排潮执行器均为塑料体设备,且安装在室外房顶。每年春季,由于东北地区昼夜温差极大,设备被冻裂的情况经常发生。为此,本文对现有的木材干燥窑排潮执行器进行了改造。1改进方案1.1改进设备所需材料旧洗衣机电机1个;废旧自行车牙盘、小链轮、链条;C1、C2 400V12μf电容器2个;1∶30小型减速器1个;DZ47-16A/3P断路器1个,     

来源于水牛瘤胃未培养微生物的内切葡聚糖酶的碱性羧基末端结构域的功能鉴定

本碱性羧基末端结构域（basic C-terminal domain,BTD）是瘤胃细菌的碳水化合物活性酶（carbohydrateactive enzymes）中未知功能的一个结构域。BTD都位于酶或蛋白质的羧基最末端,大小为30～80个氨基酸（aa）,含有较多的碱性氨基酸,一般该结构域等电点都大于10。本工作构建了来源于水牛瘤胃未培养微生物的内切葡聚糖酶C5614-1的BTD缺失酶C5614-1RBTD57（缺失C5614-1羧基末端的57个aa）和C5614-1RBTD40（缺失C5614-1羧基末端的40个aa）以及C67-1的BTD缺失酶C67-1ΔBTD（缺失C67-1羧基末端的42个aa）,酶学特性分析发现BTD缺失酶与野生酶对pH和温度的稳定性是相似的,说明BTD结构域对酶的酶学特性方面贡献不大。尽管缺失了C5614-1的羧基末端57个氨基酸后,缺失酶C5614-1RBTD57对温度和pH的稳定性明显降低,但同时缺失酶对Avicel的结合能力也显著下降,说明该缺失酶是因为该酶的碳水化合物结合组件（carbohydrate binding module,CBM）的部分缺失而导致了酶的稳定性的改变。本文还对BTD可能的功能做了预测。     

家蚕溶茧酶基因的克隆、序列分析及原核表达

【目的】获得家蚕溶茧酶基因的全长序列,实现溶茧酶基因在大肠杆菌中的融合表达。【方法】利用cDNA末端扩增技术（RLM-RACE）克隆了家蚕溶茧酶基因cDNA序列（GenBank 登录号：EF428980）。【结果】家蚕溶茧酶基因cDNA序列全长1 047 bp,其中780 bp的蛋白质编码区可编码260个氨基酸,预测蛋白质分子量为27.6 kD,等电点（pI）为8.89。家蚕溶茧酶基因包含4个内含子。用Signal P 3.0 Server程序分析家蚕溶茧酶基因,预测其从第1～22位为信号肽序列。SMART分析结果预测其第34～254位氨基酸序列具有类胰蛋白的丝氨酸蛋白酶活性。重组质粒pET-32a-Cocoonase 转化E.coli BL21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,家蚕溶茧酶基因以融合蛋白形式表达,相对分子量为48 kD。【结论】本研究成功地克隆、表达了家蚕溶茧酶基因,分析和预测了它的结构和功能,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。     

罗田甜柿Ty1-copia类逆转座子RNaseH-LTR序列的分离和特性分析

逆转座子序列信息的获得,对了解其在基因组中的行为及系统学研究有重要价值。本试验从罗田甜柿（Diospyros kaki Thunb. 'Luotian-tianshi'）基因组中分离31个RNaseH-LTR（Long Terminal Repeat,长末端重复）序列,并利用IRAP（Inter-Retrotransposon Amplified Polymorphism,逆转座子间扩增多态性）技术对部分序列相应的逆转座子家族在柿属植物中的转座活性及分布情况进行初步探讨。序列分析结果表明,至少有10个Ty1-copia类逆转座子家族得到扩增;其家族间普遍表现高度异质,碱基替换、插入或缺失突变,以及翻译成氨基酸后发生不同程度的终止密码子突变、氨基酸取代和移框突变等,是产生高异质性的原因;此外,其家族内部某些序列间的相似性极高,可能是寄主基因组与逆转座子间互惠关系的体现。应用部分逆转座子引物的IRAP分析结果表明,相应的逆转座子家族在柿属植物中普遍存在,其分布广泛,拷贝数高,转座活性强,具有进一步开发为多种逆转座子分子标记的潜力。