伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.     

犬常见皮肤病诊治及预防

犬皮肤病类型多样,病因复杂,常见于背、腹和尾部。病犬被毛粗糙、无光泽,皮肤增厚并出现鳞斑,有的皮下有肿块,有的皮肤表面出现丘疹、水泡、点状红斑或脓疱等。犬的皮肤病对人类也有一定的危害,如可导致人患头癣、体癣、丘疹性荨麻疹或痒疹、过敏性皮炎等。此外犬皮肤病症状虽有相似之处,但临床治疗中要弄清病因,正确诊断,才能收到良好疗效。     

鱼粉的显微镜检查法

鱼粉的显微镜检查法唐煜（甘肃省饲料监察所兰州７３００３０）１饲料镜检的一般步骤２几种常见掺假物的显微特征２．１棉籽饼粕棉纤维、壳是确定棉籽饼粕存在的主要依据。棉纤维卷曲粘附在壳上或包埋在粉块中,棉籽壳较厚,内外表面有小凹陷,壳的断面可见五层不同色泽的...     

山羊疥螨诊治

<正>1临床症状患羊皮肤出现结节和炎性痂皮,大多消瘦,皮肤弹性降低,被毛粗糙,脱毛。2实验室诊断采取患羊皮屑置于载玻片上,滴加50%甘油水,于低倍显微镜下检查。结果发现圆形虫体,其背面隆起,腹面扁平,虫体灰白,前端口器呈蹄铁状,腹面有4对或3对粗短足。据此诊断为羊群正受疥螨病的危害。3治疗3.1用药试验选择晴朗、温暖的中午,在背风、向阳、平坦的地方同时进行用药试验。挑选症状严重的羊15只分成3组,     

犬蠕形螨的诊治及预防

2005年8月中旬—9月上旬,先后有畜主带3只以四肢末端红肿、溃疡及血样肿块为特征的患犬前来就诊。根据临床检查,结合病料显微镜检查发现虫体,确诊为蠕形螨感染。现将诊治情况报道如下。1临床症状患犬四肢末端及指(趾)间红肿、局部破溃。前肢病情较严重,后肢病情程度较轻。2诊断     

粉纹夜蛾培养细胞对家蚕微孢子虫的吞噬及与孢壁蛋白的关系

解明家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)入侵宿主细胞的相关因素,有助于深入研究Nb对家蚕的侵染机制。利用激光共聚焦显微镜观察Nb孢子接种粉纹夜蛾(Trichoplusiani,Tn)培养细胞48h后孢子的分布状态和培养细胞的生长情况,并对接种Nb孢子后的Tn培养细胞培养物总蛋白进行SDS-PAGE分析,证实经0.2mol/LKOH预处理的Nb孢子可以被Tn培养细胞所吞噬。对Nb孢子孢壁蛋白的SDS-PAGE分析显示,Nb孢子经KOH预处理后,大小为80kD和12kD的孢壁蛋白带缺失或明显减弱,30kD的孢壁蛋白带丰度降低。推测KOH预处理使Nb孢子部分孢壁蛋白被分解(部分或完全)或使蛋白结构发生变化,由此影响了Nb孢子与Tn培养细胞的相互作用关系,有利于Tn培养细胞对Nb孢子的吞噬。     

奶牛子宫颈管黏液性状与受胎率的关系

1 材料和方法 我们于2005年6月3～30日,选择了3个奶牛养殖小区散养的荷斯坦经产牛作为供试牛,观察了97头奶牛黏液及发情症状.方法是在授精前采取奶牛外阴部流出的黏液,并用注射器采取奶牛阴道内的黏液,肉眼观察其颜色、黏稠度,显微镜观察黏液羊齿状结晶的形成状态,结合奶牛发情表现进行了调查.     

狐人工授精技术要点

1采精首先要准备好公狐保定架、集精环、稀释液、显微镜、电刺激采精器、冰箱、水浴锅和液氮罐等器械。采精室要保持干净卫生,室温保持在24～28℃,用紫外灯在室内照射2～3h消毒。所有的器械和     

云南山羊痘电镜及PCR诊断技术研究

山羊痘是由山羊痘病毒引起的以体温升高、全身性丘疹或结节、水疱、内脏病变为特征的一种急性、热性、接触性、高发病率、高死亡率的烈性传染病。本研究对云南省部分地区发生的山羊痘疫病作了流行病学调查、临床诊断、病理剖检、电镜检测及PCR检测鉴定,并在不同地区、不同疫点采集多份病料进行检验。应用电子显微镜技术对病料进行常规负染、超薄切片镜检检测,