鹿副结核病抗体间接ELISA检测方法的建立

本研究以副结核杆菌亲和层析抗原为检测抗原,检测以草分枝杆菌抗原吸收的待检鹿血清,建立检测鹿副结核病血清抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其抗原最佳包被浓度为40μg/mL,血清样品稀释度为1:80,兔抗鹿IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1:8000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。对不同地区4个鹿场的760头份鹿血清进行副结核病抗体检测,其中阳性61头份,阳性率为8%,获得副结核病在我国鹿群中的血清流行病学资料,从而为防制鹿副结核病提供一定的依据。     

副猪嗜血杆菌ompP2基因的克隆鉴定及序列分析

用PCR技术对华南地区分离的17株不同血清型副猪嗜血杆菌菌株ompP2基因进行克隆鉴定,并以CLUSTALS1和PHYLIP-3.68软件将ompP2基因序列进行比对和遗传进化分析.17株副猪嗜血杆菌茵株中均能扩出ompP2基因,克隆测序结果发现ompP2基因大小有所不同,与参考序列ABKM01000007的同源性在92％～99％之间.序列比较结果显示,ompP2基因与GenBank公布的副猪嗜血杆茵全基因组测序中的ompP2基因序列具有较高的同源性,不同菌株ompP2基因序列大小存在差异,为进一步验证ompP2蛋白的功能及相关研究奠定了基础.     

副猪嗜血杆菌血清型4液体发酵培养试验研究

为了研究适合副猪嗜血杆菌血清型4的液体发酵培养使用条件,试验测定了副猪嗜血杆菌血清型4在不同发酵条件下的OD600值。结果表明:最适培养条件为TSB培养基、100 mL/250 mL的装液量和0.004%烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)浓度,培养24小时时菌体生长OD600值达到最大,同时产生大量的酸,pH值降至最低。当OD600值小于1时,测得的副猪嗜血杆菌活菌数和OD600值呈良好的线性关系;OD600值越大,偏离的趋势越明显。     

一起鹅副黏病毒病的治疗

鹅副黏病毒病是20世纪90年代末新出现的一种鹅急性病毒性传染病.黑龙江省的流行病学调查结果表明,近年来全省已有近三十个养鹅场发生鹅副黏病毒病,而且呈逐渐流行趋势.2006年5月份,哈尔滨市某养鹅场从外省购进苗鹅5000只,15日龄起,小鹅陆续发生死亡,到23日龄时死亡300多只,用0.01%氟哌酸拌料喂饲、青霉素、链霉素肌注,均无效.经黑龙江省兽医卫生防疫站检验,确诊为鹅副黏病毒病.     

副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用

为了解副猪嗜血杆菌病在贵州对猪群的危害和流行规律、进一步开展副猪嗜血杆菌病的防治研究提供参考依据,特进行副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与初步应用研究。根据副猪嗜血杆菌（HPS）16S rRNA基因序列设计1对引物,通过优化组合试验,对贵州省分离的HPS进行PCR扩增,扩增出长为650bp的目的基因片段,而大肠埃希氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、葡萄球菌等扩增结果为阴性。采用该方法对贵州发病猪群中350头疑似病例进行PCR检测,检出率为8％～49％。该方法检测副猪嗜血杆菌敏感性高、特异性好,可用于副猪嗜血杆菌的快速诊断。     

副猪嗜血杆菌脂酰辅酶A合成酶活性质谱定性分析

利用已纯化的FadD1和FadD2进行体外重构生化反应,通过质谱分析技术对2个脂酰辅酶A合成酶进行活性定性分析。体外酶活反应产物经UPLC-MS/MS质谱分析显示,全扫描模式,中性丢失扫描模式或多反应监测模式均显示酶活反应产物有脂酰辅酶A的生成,而且FadD1对脂酰辅酶A的转化效率要明显高于FadD2。质谱分析数据进一步确认脂酰辅酶A合成酶的生化功能,表明其在HPS存活过程中发挥着重要的生理功能,是其致病的关键蛋白之一。成功建立了脂酰辅酶A合成酶体外质谱分析方法,可为病原细菌相关基因功能研究提供技术基础。     

定西市黄土丘陵沟壑区第Ⅴ副区侵蚀沟道分级分类研究

采用Strahler提出的地貌几何定量数学模型分级方法和基于沟道开析度、割裂度、主支沟系数的侵蚀沟道分类方法,对位于黄土丘陵沟壑区第Ⅴ副区的甘肃省定西市安定区安家沟流域和高泉沟流域具有典型性的15条侵蚀沟道进行分级分类研究。结果表明:主支沟状况和割裂状况能大致反映沟道的侵蚀特征,强度割裂型和主沟型沟道、中度割裂型和半主沟型沟道有一定相关性。提出了强度割裂型和主沟型沟道、中度割裂型和半主沟型沟道、弱度割裂型和半主沟型沟道的治理对策。     

土豆翻身了,牛奶你怎么办(上)

<正>一面红旗哗啦啦地飘,一心要把革命闹,土豆君终于欢天喜地迎来公元1949年——登堂入室——翻身做主人啦。日前,农业部副部长表示,未来几年,要让土豆逐渐成为水稻、小麦、玉米之外的我国第四大主粮作物。别再把土豆不当干粮了!土豆丝、土豆片、土豆泥、豆饼、土豆汤、炖土豆、烤土豆、涮土豆、土豆丸子、土豆包子、烤薯片……哎,核实一下,土豆不是被优酷     

副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(H.parasuis)单克隆抗体(MAb),本研究采用H.parasuis 5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了一株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有H.parasuis标准菌株;免疫共沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别的蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有"KTPAE-R"保守序列,对应于H.parasuis SH29755株和SH0165株的469位~475位的氨基酸残基。对OppA氨基酸序列比对结果表明H.parasuis与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1%~74.5%,本研究结果为进一步研究H.parasuis感染的病原学诊断建立了良好的基础。     

猪免疫抑制原因及应对策略

<正>当前部分猪场在接种疫苗的情况下,温和型猪瘟、猪副嗜血杆菌、附红细胞体、伪狂犬仍时有发生和流行,笔者认为造成免疫失败和其他疫病发生的很大原因是免疫抑制。免疫抑制是由于动物的免疫组织、器官和免疫细胞受到损伤,导致机体临时性或永久性免疫应答功能障碍,从而使得疫苗接种未能达到预期效果,预防和控制猪传染病的难度增大。1免疫抑制疫病及抑制因素