普鲁兰酶氮端氨基酸的截短对其酶学性质的影响

淀粉是丰富的生物质资源,已被广泛地应用到食品、酿酒、医药等各个相关的领域.普鲁兰酶(pullulanase,pulA,EC 3.2.1.41)作为淀粉脱支酶,可以水解淀粉中的α-1,6糖苷键,最大限度地降解淀粉原料,提高淀粉利用率.因此,寻找一条国产化的道路开发我国自己的普鲁兰酶,具有长远的意义.课题组前期从淀粉厂附近的土壤中筛到一株普鲁兰酶的高产菌株变栖克雷伯氏菌(Klebiella variicola)strain 7,克隆获得pulA基因(GenBank登录号:KJ146839.1)后在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3)中异源表达.为提高该蛋白的表达量和分泌效率,同时改善普鲁兰酶的性质,本研究利用基因工程的手段构建了普鲁兰酶去信号肽突变体M1和氮端31个氨基酸的截短突变体M2,结果显示M1和M2最适温度均为45 ℃,二者的最适pH分别是6.0和5.6;M2的半衰期是37 min,是M1的6.17倍;M2的比酶活是582.204U/mg,是M1的1.6倍.动力学分析显示,以普鲁兰糖为底物时,M2的Vmax、Kcat、Km和Kcat/Km分别为0.001 3μmoL/(mL·s)-1、191.80-1 s.-1、0.30 mg/mL、693.30,与M1相比,M2的底物亲和能力增加,同时催化效率是M1的2倍.本研究通过普鲁兰酶氮端氨基酸的截短,为提高酶的比酶活和半衰期提供了新的方法和思路.     

10kV接地系统中接地电阻保护配置

介绍小电阻接地系统中小电阻安装在主变10 kV出口与安装在10 kV母线上时各自的优缺点,10 kV小电阻接地系统的运行注意事项。     

变电站接地网导通及接地电阻测量方法分析

接地是确保电力系统可靠运行和人身安全的基础,当电力系统发生故障时,故障电流通过接地系统迅速地泄入大地,将地电位降低到接触电压和人体跨步电压安全值以下,且不会对二次设备造成反击,以保证人身和设备的安全。因此在变电站运行中接地系统起着至关重要的作用。本文根据工作中的实践经验,对变电站接地网导通测试及接地电阻测量方法进行分析研究,并总结了变电站接地网日常运维的要点。     

pib基因启动子3'端缺失体的暗诱导特性分析

采用pib基因启动子3＇端缺失,将最下游的TATAbox、CAATbox和暗诱导元件YTCANTYY一起敲除来研究这两类顺式作用元件在该启动子中的功能和相互关系。结果显示：TATAbox和CAATbox以及3＇端序列缺失都不能使pib启动子丧失其启动活性,依旧保持其根部高效表达的特异性。含2、4和6个黑暗诱导元件YTCANTYY的pib启动子均具有暗诱导启动活性,24h暗处理后的3个构建转基因水稻（Oryza sativa ssp.japonica）根部的GUS活性都显著增加,茎、叶虽有增加但不明显,这表明pib基因启动子的暗诱导启动活性主要由YTCANTYY暗诱导元件所决定的,它不仅能够独立响应暗诱导还能补偿TATA、CAAT所缺失的功能。     

接地网改造经验

介绍了赤峰局接地网改造的措施及效果，同时对接地网及引下线校验中短路电流持续时间、材料的热稳系数、PT二次中性点的接地、接地短路电流的分流及二次电缆的保护等进行了分析，并提出了建议。     

住宅电气接地故障的防范

接地故障不同于一般的电气短路故障,而是带电导体通过金属材料与大地发生的短路故障。由于接地故障比较隐蔽,经常是多次火灾的起因,而且接地故障往往还伴随着发生电击人身伤害事故。因此,为了住宅居住人员的安全,有必要加强对接地故障的防范。一、不能随意更改按地系统。如原TN—C—S系统改变为TT系统,当发生用电设备金属外壳单相接地短路时,由于PE线未按TT系统的接地电阻要求接地,必然使设备金属外壳带上较高的电压(理论计算达157V),从而发生间接电击事故。二、严禁PE线与N线连接。若PE线与N线连接便成了TN—C系统,将造成不良后果…     

一起速断跳闸事故的思考

1事故现象2005年4月9日上午8时39分,我局某供电所分管的10kV出线574线路速断跳闸,570电容器柜速断跳闸。调度中心判断,574速断跳闸有可能是瞬间故障,值班人员查570电容器柜未见异常,可能误动。于是调度中心对574线路和570电容器柜分别试送一次。当合上574断路器时,信号报L3相接     

读者信箱

小于半桶水问：用哪些方法查找10kV单相接地？发生单相接地会有什么危害？单相接地是不是只在线路故障时才会有？单相接地的绝缘监测不一定正确的反映是不是真的有单相接地。有时会有中性点位移时也会出现单相接地信号。运行中会出现这样的情况吗？     

城镇低压电网中性线的重复接地如何做

《农村低压电力技术规程》（DL／T499—2001）规定,“城镇、电力用户宜采用TN—C系统”,还规定,“为了保证在故障时保护中性线的电位尽可能保持接近大地电位,保护中性线应均匀分配地重复接地”。所谓TN—C系统,就是配电变压器低压侧的中性点直接接地,中性线引出后具有双重作用,既作为三相四线制供电的中性线,又作为用电设备的保护线,所以在TN—C系统中．