高糖对蜂蜜中鲁氏接合酵母生理特性的影响

为研究从蜂蜜中分离的鲁氏接合酵母在高糖培养基中的生理特性变化,本文对鸭脚木蜜的耐高渗酵母菌进行平板分离,筛选具有代表性的酵母菌菌落,摇培后提取其DNA,进行ITS序列扩增,经比对后获得酵母菌的种属信息;用30%、40%、50%、60%的高糖培养基进行培养,测定其生长、培养基残糖量和氧化酶活力的变化。分离鉴定后得到鲁氏接合酵母,与对照组相比,在40%、50%、60%组中生长速率降低,但30%培养基中出现二次生长;随着糖浓度的增加,酵母菌的糖耗量减少,在30%培养基中糖耗量最大;但在高糖培养基中酵母菌胞内SOD、POD、CAT活力增加。这些结果为筛选耐糖工程菌提供理论依据。     

多菌种低盐分段发酵生产豆豉工艺

为了缩短发酵时间,降低含盐量,对豆豉多菌种低盐发酵工艺进行了研究。以蛋白酶活力为指标,确定了毛霉G-1的制曲条件为：接种率4.5%,在25℃制曲60 h,在此条件下蛋白酶活力达到782.56 U/g。以氨基酸态氮为指标,研究确定了豆豉前发酵的工艺条件为50℃保温发酵10 d。添加鲁氏接合酵母AS 2.181,以感官品质为指标,确定了豆豉后发酵工艺条件为8%（质量分数）食盐,酵母接种率1.5%,25℃发酵6 d。通过这种工艺生产的豆豉不仅具有豆豉香气而且醇香、酱香和酯香浓郁,氨基酸态氮质量分数达到0.81 g/(100 g),总生产时间为19 d。通过该研究形成了多菌种低盐分段发酵生产豆豉的新工艺,发酵时间短,可为豆豉这种传统发酵食品的现代化技术改造提供参考。     

板式家具搁板接合方式对其变形的影响分析

分析了接合方式对板式家具搁板变形的影响,根据目前板式家具主要采用的搁板接合方式,选择了圆棒、金属销和偏心连接件等作为支撑与连接构件进行相应分析,从结构的刚性与搁板的承载能力方面来看,应优先选用可垂直拆装的偏心连接件.     

椭圆榫过盈配合量与木材密度的关系

通过樟子松、柳桉、山毛榉制成的椭圆榫接合的极限抗拔试验,发现椭圆形榫头宽度与其对应的榫眼长度的过盈配合中,这三种木材在平衡含水率14.0%时的最佳过盈配合量分别为0.80、0.47和0.26mm.在此基础上,进一步探讨最佳过盈配合量与木材密度的相关性,得到其回归拟合曲线近似为指数函数y=6.874e-4.604x.     

雷帕霉素产生菌吸水链霉菌NRRL5491接合转移系统的建立

对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3~6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍。采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10-6,足够用于基因置换等遗传操作。     

潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达

以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传代稳定,潮霉素抗性有了较大的提高,从100μg/mL提高到了400μg/mL以上,而产纤维素能力只略有下降。     

固氮链霉菌Streptomyces chartreusi WZS021接合转移系统的建立及优化

[目的]建立和优化固氮链霉菌Streptomyceschartreusi WZS021(简称菌株WZS021,下同)的接合转移体系,以丰富固氮链霉菌基因片段转移技术.[方法]以大肠杆菌Escherichiacoli ET12567(pUZ8002)为供体菌,携带整合型质粒pSET152的菌株WZS021为受体菌,进行菌株WZS021接合转移.[结果]选择高氏一号培养基为菌株WZS021接合转移培养基,50℃热激10 min,供受比为1:10,涂布20.0 mg/L安普霉素、接合转移12 h后覆盖抗生素,添加MgCl2终浓度为5.0 mmol/L时接合转移效率最高,达3.24×10-6.[结论]通过确定适用于菌株WZS021接合转移条件建立的菌株WZS021遗传转化体系,有助于今后插入标记基因确定该菌的固氮定殖位点及导入外源基因的操作.     

嗜线虫致病杆菌北京变种的抗生素抗性及质粒pLA2917的转化

用最小抑制浓度法对嗜线虫致病杆菌北京变种野生型菌株的抗生素抗性进行了测定。结果表明,该菌株对氯霉素、新霉素和卡那霉素敏感,而对链霉素、氨苄青霉素和青霉素具有不同程度的抗性。利用滤膜三亲交配的接合转移方法,以嗜线虫致病杆菌北京变种作为受体细菌,在卡那霉素、四环素和氨苄青霉素的选择压力下,筛选得到接合转移子。经过菌落PCR鉴定,证明质粒pLA2917已经成功转移到嗜线虫致病杆菌北京变种细胞内。对昆虫病原线虫共生细菌的质粒转移方法进行了讨论。     

猫杯状病毒分子致病机制的研究进展

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是引起猫科动物的一种急性、高度接触性传染病的病原,严重危害猫科动物的健康。本文从FCV的主要蛋白及其功能、病毒的复制与细胞的相互作用、病毒受体、病毒致细胞凋亡作用等方面综述了FCV分子致病机制的研究进展,以期为FCV的分子生物学特性、遗传与变异规律、新型疫苗的研发及抗病毒药物的筛选提供参考。     

猪源沙门氏菌携带I类整合子向人源细菌体外转移的研究

为考察猪源沙门氏菌携带的I类整合子向人源细菌在体外接合试验中的转移频率,在体外接合试验中应用PCR方法检测细菌间I类整合子的转移。结果表明:人源沙门氏菌I类整合子转移效率在1.6×10-3~2.5×10-4 cfu·m L-1(供体菌)之间,人源大肠杆菌I类整合子转移效率在1.5×10-5~8.3×10-6 cfu·m L-1(供体菌)之间,猪源沙门氏菌I类整合子未转移给人源金黄色葡萄球菌。因此,猪源沙门氏菌I类整合子携带耐药基因盒在体外可向人源革兰氏阴性菌发生转移,且转移频率较高。