两种不同抗原制备方法对大肠杆菌O_(157):H_7单克隆抗体亚类的影响

单克隆抗体技术已深入到医学和生物学的各个领域,成为一种必不可少的工具,具有极为重要的理论研究价值和实用价值。据报道,全菌抗原的主要抗原位点是脂多糖(LPS),刺激机体产生的IgG抗体主要针对脂多糖,故不同血清型间无交叉保护作用;而提纯的外膜蛋白(OMP)作为抗原刺激机体产生的     

精子膜抗原的研究及其应用

为了研究精子膜抗原并研发避孕疫苗,试验从精子膜抗原结构和功能的角度出发(这是因为精子膜抗原不仅是精子发生、成熟过程的重要标志分子,与受精和胚胎的早期发育关系密切,而且其中部分抗原还可诱导机体产生相应的自身抗体,是导致免疫性不育的主要原因.)在研究精子膜抗原揭示受精过程和不育机制的基础上,将一些精子膜抗原作为候选成分来研...     

蛋白酶对豆粕的酶解研究

本试验研究蛋白酶对豆粕的体外消化率、小肽含量变化及胰蛋白酶抑制因子的影响,并探讨其对豆粕抗原的影响。蛋白酶对豆粕的体外消化结果为:43%豆粕和46%豆粕的消化率分别为70%和74%,相对于对照组分别提高了7.7%和13.8%。蛋白酶对豆粕中小肽含量及胰蛋白酶抑制因子影响结果显示:43%豆粕和46%豆粕经蛋白酶酶解1h,小肽含量迅速提高,含量分别为14.14%和14.99%,几乎达到峰值;经蛋白酶处理后的43%豆粕和46%豆粕胰蛋白酶相对剩余酶活与对照相比均有大幅度提高,分别为85%和60%。其对豆粕抗原影响表现为:经蛋白酶酶解后的豆粕7S和11S亚基已完全消失。     

类病毒佐剂抗原运送系统

对致病性微生物毒力机制以及致病因子与免疫系统相互作用的进一步了解,现已可鉴定出一系列的候选保护性抗原,及用于免疫预防可引起复杂致病机理的病原体。采用鉴定明确的亚单位抗原可诱导特异性免疫应答,并且避免了一些由采用灭活或致弱病原体制备的疫苗所引起的潜在相关危害,比如毒性反应、免疫病理、非保护性免疫主导反应以及表位变异。     

猪蓝耳病免疫失败原因及防治

危害猪群健康稳定的三大疾病:猪瘟、蓝耳和伪狂犬中,蓝耳是最难控制的一种病情。接种蓝耳疫苗能刺激猪体产生保护性免疫反应,养猪场需要根据当地蓝耳流行情况,并且通过抗体监测来制定免疫程序。1蓝耳疫苗情况1.1蓝耳灭活苗安全性好,不存在散毒危险。如果疫苗抗原与     

鸭疫里默氏杆菌ATP合成酶F1亚单位α亚基的部分生物学特性研究

为筛选和鉴定鸭疫里默氏杆菌(RA)的感染相关蛋白,本研究采用血清1型RA CH3株活菌和灭活菌体免疫鸭的阳性血清分别与血清2型Th4株的全菌蛋白进行交叉免疫蛋白质组学分析,结果表明ATP合成酶F1亚单位α亚基(ATP-F1-α)、Gro EL蛋白和TPR repeat-containing protein等的抗体仅存在于活菌免疫鸭的血清中,推测其可能为感染相关的交叉性抗原;而Tbd R1的抗体在活菌和灭活菌免疫鸭的血清中均存在。利用自杀质粒同源重组的方法构建了ATP-F1-α的基因缺失株,并将其与野生株CH3的生长曲线进行比较。结果表明,缺失株菌体形态与野生株相似,但其在TSB培养基中的生长几乎停滞。以上结果表明RA ATP-F1-α既是一种交叉抗原,又与细菌的生长相关。     

多头纤虫抗原特性的研究——多头绦虫节片抗原及原头节ES抗原的S…

为了探明多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节排泄分泌抗原的多肽组分，以供今后在免疫诊断与预防脑多头蚴病的应用，本试验应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ首次分析了多头绦虫成虫节片抗主多头蚴原头节ＥＳ抗原的多肽组分。应用１２．５％凝胶的连续系统，垂直板型电泳，考马斯亮头Ｒ－２５０染色的结果表明，成虫节片抗原共有１６条多肽带，其分子量范围２９￣１５４ＫＤ，其中主带４条，分别为７３，８８，１２８，１３４ＫＤ，原头节ＥＳ抗     

猪瘟病毒石门株不同代次E2基因主要抗原编码区序列差异分析

利用RT－PCR及序列测定对猪瘟病毒石门株不同代次毒株E2基因主要抗原编码区及同一代次不同年代主要抗原编码区序列进行了分析，结果所有毒株E2基因主要抗原编码区序列呈现较高的同源性，石门株不同代次毒株E2基因主要抗原编码区核苷酸及氨基酸同源性分别为97．7％－100％，97．3％－100％；同一代次不同年代主要抗原编码区序列核苷酸及氨基酸同源性均为98．6％－100％。只有3个代次毒株发生较小的变异，核苷酸及氨基酸呈现1－3个碱基或氨基酸的变异，其他代次的毒株序列完全一致。初步证实了猪瘟病毒分子结构的遗传稳定性，说明猪瘟病毒的变异可能更多的与种群病毒的优势选择有关。     

鸡毒支原体抗原在大肠杆菌中的表达

利用表达载体λgt11构建鸡毒支原体（MG）S6株基因文库。根据载体中lacZ基因插入失活的原理,重组子中大约69％为重组噬菌体。应用MG纯化抗体筛选文库,得到179个阳性克隆,不足重组噬菌体的1％。随机选择一个阳性克隆,收集其蛋白进行Western免疫印迹,检测到－38kD蛋白,表明在大肠杆菌中能全盛具有免疫学活性的MG蛋白,为MG的特异性血清学诊断提供良好工具。     

猪戊型肝炎病毒ORF2主要抗原表位区间接ELISA方法的初步建立

应用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端和N端的主要抗原表位区,重组蛋白命名为ORF2-C和ORF2-N,初步建立间接ELISA诊断方法。用重组蛋白ORF2-C和ORF2-N作为诊断抗原,对反应条件进行优化,初步建立ELISA诊断方法。抗原最适包被浓度ORF2-C为8 μg/mL、ORF2-N为12 μg/mL;血清最适稀释度均为1∶50,ORF2-C作用时间为50 min、ORF2-N作用时间为90 min;酶标抗体最适稀释度为1∶5000;ORF2-C判定标准：D450 nm值≥0.348为阳性,D450 nm值<0.348为阴性;ORF2-N判定标准：D450 nm值≥0.397为阳性,D450 nm值<0.397为阴性。与戊型肝炎病毒诊断试剂盒检测结果相比,阳性符合率分别为93.3%、86.7%。利用重组蛋白建立的ELISA方法特异性、敏感性和重复性均较好,且ORF2-C的检测效率明显高于ORF2-N,该方法的初步建立为进一步完善猪戊型肝炎病毒诊断方法奠定基础。