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31.
从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
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在定量构效关系研究中各理化参数xi构成的描述矩阵,由于参数之间的相关性往往现态性或奇异性,由此获得的QSAR回归方程则不稳定,本文提出了一种新方法即病态指标剔除法:选择一个适当的临界值,打出相关系数大于或等于该临界值所涉及的指标,剔除部分病态指标。 相似文献
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《中国油料作物学报》2005,27(2):68-68
近日,从国家科技奖励大会凯旋而归的中国农业科学院油料研究所研究员李云昌、李培武双双捧回了由国家领导人亲自颁发的烫金荣誉证书。他们分别主持完成的“高产优质抗(耐)病广适性油菜新品种中油杂2号的选育与应用”和“双低油菜芥酸硫甙定量速测技术及仪器的研制与应用”两项科研成果获得了2004年度国家科技进步奖二等奖。这也是油料研究所继2001年同期获得两项国家奖励后又一次登上了国家领奖台。 相似文献
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聚合酶链反应(PCR)又称无细胞克隆技术,是一种根据生物体内DNA复制的某些特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术。近几年来,随着PCR技术的迅速发展及世界各国对畜禽传染病的日益重视,PCR技术在兽医实验室诊断中的应用已屡见不鲜。本文仅概述其在畜禽细菌性疾病诊断和研究中的应用。1沙门氏菌Nguyen根据肠炎沙门氏菌C7具有特异性的序列(2.1kbHingIII片断)设计出1对引物,从23种沙门氏菌中扩增出2.0kb的产物,其它19种肠道细菌对照没有扩增产物。李景鹏等根据H1基因序列设计1对引物扩增H1基… 相似文献
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39.
压力实时监测法在管道泄漏检测中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
检测输油管道漏油的方法很多,介绍了通过压力实时监测确定输油管道漏油点方法,以及实际应用情况。实践证明,通过压力实时监视确定输油管道漏油点的方法在实际输油运行中是切实可行的。 相似文献
40.
PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类 总被引:9,自引:0,他引:9
为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。 相似文献