鸡传染性法氏囊病病毒DK株VP2基因序列分析及其对SPF雏鸡的致病力

为探究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)DK分离株的致病性和遗传变异情况,本研究测定了该分离株的鸡胚半数致死量(ELD50)、对SFP雏鸡的致病力以及扩增病毒的VP2基因并分析其序列。结果显示,DK分离株对鸡胚的ELD50为104.5/0.2mL,以2×10^3ELD50剂量感染SFP雏鸡出现典型IBD的临床症状、剖检和组织学病变;实验鸡发病率为100%,致死率为44.4%;DK株VP2基因序列与参考株的同源性为93.1%~97.0%、氨基酸序列同源性为93.6%~97.5%,其基因序列和氨基酸序列均与Cu-1wt参考株(经典株)同源性最高;DK株VP2氨基酸序列的七肽区SASWSGS及249Q、253Q、279D、284A、290M、313V、330S氨基酸位点均与强毒株的氨基酸位点一致;但其222P、256V、299N3个氨基酸不符合IBDV超强毒株的特征;而其第222、249位氨基酸为P和Q,与抗原变异株(vIBDV)的T和K也不相同。结果表明:IBDVDK株为中等偏强毒力病毒。本研究为IBD的防控提供参考依据。     

牦牛PRLHR基因的克隆、序列分析及组织表达研究

试验旨在对牦牛催乳素释放激素受体（prolactin releasing hormone receptor,PRLHR）基因进行克隆、序列分析及组织表达研究。采集5头母牦牛和5头母黄牛的下丘脑、脑垂体前叶、卵巢、输卵管和子宫组织,采用RT-PCR技术扩增得到PRLHR基因cDNA全长,通过生物信息学方法分析该基因编码蛋白的生物信息学特征,利用实时荧光定量PCR技术测定PRLHR基因在牦牛及黄牛各组织中的表达量。结果显示,牦牛PRLHR基因序列长1 625 bp,其中CDS区1 113 bp、5'-UTR 22 bp和3'-UTR 490 bp,编码370个氨基酸,与黄牛、水牛、绵羊、猪和人的核苷酸序列有较高的同源性,在进化过程中十分保守;牦牛PRLHR为不稳定疏水蛋白,无信号肽,存在7个跨膜结构域;有13个丝氨酸磷酸化位点、6个苏氨酸磷酸化位点和4个酪氨酸磷酸化位点;有3个N-糖基化位点和10个O-糖基化位点;蛋白二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-转角分别为49.19%、31.89%、15.68%和3.24%;蛋白质三级结构预测显示,牦牛PRLHR蛋白具有GPCRs超级家族中PrRP家族的典型结构域。实时荧光定量PCR结果表明,PRLHR基因在牦牛输卵管组织中的表达量显著高于其他组织（P<0.05）;在牦牛下丘脑、脑垂体前叶、子宫和输卵管组织中的表达量极显著高于黄牛（P<0.01）。试验成功克隆得到牦牛PRLHR基因序列,并对其进行了生物信息学和组织表达特性分析,为进一步研究PRLHR基因在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定了基础。     

IBV AH1-99分离株N基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术成功扩增出IBV AH1-99分离株的N基因全长cNDA,将其克隆到pMD18-T载体上。经酶切分析、PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得该分离株N基因的重组质粒。序列分析结果表明,分离株N基因全长1 230个核苷酸,编码409个氨基酸。同部分IBV参考毒株相比,核苷酸同源性为85.8%~89.9%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%,在进化关系树中,AH1-99与国内分离株X、LX4亲缘关系较近。     

冬春谨防仔猪白肌病

仔猪白肌病也叫硒和维生素E缺乏症,是由于仔猪体内缺硒和维生素E而引起的一种仔猪代谢病.这种病由于土壤中缺硒,所以植物中含硒量也很低,这就使饲料中硒缺乏,因而母猪体内缺硒,自然引起哺乳仔猪体内硒的不足,再加上维生素E缺乏,便会发生仔猪白肌病.此病多发于20日龄左右的仔猪,在冬春季节地方性流行.我国东北、西北、华北、西南和华东沿海一带的部分地区为缺硒地带,故常有此病发生.     

天然植物标准提取物正进入饲料和兽药行业

介绍了国内天然植物标准提取物行业现状、分类,指出了目前行业存在的问题,综述了天然植物标准提取物的生物活性研究进展。     

封育对干热河谷稀树灌草丛退化草地土壤种子库和植物多样性的影响

于2004年对金沙江干热河谷地区典型稀树灌草丛退化草地进行了围栏封育。在封育后第1年和第2年,以未围栏封育退化草地为对照,对草地土壤种子库和植被的物种组成、密度变化、多样性变化及土壤种子库与植被群落的相似性进行了调查和分析。结果表明,随着围栏封育年限的增加,土壤种子库密度和植物密度增加极显著（P〈0．001）,其物种组成主要以一年生草本为主。在围栏封育过程中,土壤种子库和物种丰富度明显下降,物种多样性降低,植被均匀性下降。随着封育年限增加,土壤种子库物种组成相似性指数和植被物种组成相似性指数均降低。     

野外放养状态下鸡的饲养管理问题探讨（下）

5剔除有毒有害牧草,减少中毒病的发生 前文已经述及．放养场地的有些牧草是有毒有害植物,大量采食会引起中毒。因野草萌发、生长所需的温度和降水量不同,野外天然草场的有毒有害植物也表现出不同的生长期。也就是说,野外放养时不同季节均可发生中毒,并且毒素有很大的差异．甚至会发生同一种植物不同季节表现出不同毒性的情况。所以,对于野外放养,剔除有毒有害牧草是一项经常性的工作,并且不同地区不同时间段剔除的有毒有害植物对象不同。     

浑善达克沙地植物区系分析

通过对浑善达克沙地植物区系资源的组成、植物科的多样性、生活型、生态型、以及沙生植物多样性及其分布特征分析,得出该区植物种类的多样性较高,科的优势现象十分明显,植物种趋向集中分布于大科和较大科;该区植物的生活型以多年生草本植物占绝对优势,表现出草原植物群落种类组成特点,存在大量隐域性生境和沙地等特殊景观,乔木和灌木种类较典型草原多;中生植物在该区占有相当大的比例,体现了该区地理位置和地理环境的特殊性。     

单核细胞增生性李斯特氏菌hly基因的克隆表达

以单核细胞增多性李斯特氏菌（Listeria Monocytogengs,LMO）LMO-0586基因组DNA为模板,运用PCR扩增得到片段大小为1646bp的致病基因李氏溶血素（hly）基因,并克隆到pMD18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-hly。经测序正确后,将hly基因克隆至表达载体pGEX上构建表达质粒pGEX-6P-1-hly。在IPTG诱导下,携带pGEX-6P-1-hlyA的E．coli BL21（DE3）高效表达分子量约为82KDa的可溶性蛋白及包涵体形式的蛋白。为进一步研究溶血素蛋白的结构、功能,LMO的分子流行病学调查、诊断试剂盒的开发提供依据。     

猪链球菌2型38 000蛋白主要功能区基因的克隆与表达

根据GenBank中已发表的猪链球菌2型38000蛋白基因核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用PCR方法,以四川分离株猪链球菌2型基因组DNA为模板扩增38000蛋白主要功能区基因。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接转化宿主菌DH5α,提取阳性质粒,进行PCR和酶切鉴定。将目的片段定向克隆到表达载体pET32a中,经测序正确后,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、0.8mmol/LIPTG条件下进行诱导表达,结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为35000的重组蛋白,表达产物经纯化后,免疫印迹法(Western blotting)证实该重组蛋白可以与猪链球菌2型阳性血清发生特异性反应。