浅谈HACCP在机制针形名茶中的应用

对HACCP作简要介绍，根据HACCP体系的要求，分析了机制针形名茶过程中各个环节可能出现的危害因素，用HACCP的原理确立了关键控制点，并且建立了相应的控制措施。     

魔芋粉饲喂肉鸭的价值探讨

试验用含魔芋粉0%、2%、3%、4%的饲粮饲喂12日龄的樱桃谷杂交肉鸭SM3,探讨魔芋粉作为一种饲料原料的饲用价值。结果表明:用含魔芋粉的日粮饲喂肉鸭,对肉鸭的日增重、耗料量和增重饲料成本没有明显影响(P>0.05),但对鸭的总增重和经济效益有一定影响。在本试验中,添加2%的魔芋粉使肉鸭的总增重增加,经济效益最好。     

酵素叶面肥对碧螺春品质与矿质元素含量的影响

本试验探讨3种酵素叶面肥对碧螺春茶叶品质与矿质元素含量的影响。结果表明,春季喷施酵素叶面肥有助于提升碧螺春茶叶品质,以提升效果最明显的叶面肥为例,与喷施清水处理相比,喷施叶面肥后碧螺春鲜叶水浸出物含量、游离氨基酸总量和茶多酚含量分别提升13.70%、12.29%和12.84%;碧螺春茶叶上述指标分别提升11.24%、12.74%和11.61%。此外,喷施酵素叶面肥有降低碧螺春茶叶酚氨比的趋势。与喷施清水处理相比,喷施酵素叶面肥最高可降低茶叶酚氨比0.97%。另外,喷施酵素叶面肥能够降低碧螺春鲜叶重金属元素含量,提升有益人体的铁、锌和硒元素含量。主成分分析结果表明,喷施第3种酵素叶面肥的碧螺春鲜叶综合得分最高,建议推广第3种酵素叶面肥,达到茶园逐步替代化肥的目的。     

富硒绞股蓝功能性茶冻的研制

绞股蓝是一种药食同源的草本植物,被誉为“南方人参”,兼备了较高的营养价值与药用价值,具有清热解毒、调节血糖血脂、改善记忆力、抗动脉硬化、抗心肌梗塞、预防癌症等功效。然而,目前绞股蓝相关产品仍以绞股蓝茶为主,存在味苦、浮沫多的弊端,成为绞股蓝推广销售的主要瓶颈问题。本论文以陕西安康所产富硒超微绞股蓝茶粉为主要原料,以魔芋葡甘聚糖、黄原胶、甜味剂等为辅料,以感官评价为主要指标,利用正交试验与Box-Benhnken设计-响应面法筛选出最优的富硒绞股蓝功能性茶冻配方工艺。相较于传统绞股蓝茶,所得产品(1)克服了绞股蓝茶味苦、浮沫多的弊端,丰富了绞股蓝茶产品形式;(2)茶冻状态突破了传统茶冲泡形式下功能成分利用率低的限制,极大提高了硒等功能活性物质的摄取率;(3)以膳食纤维-魔芋葡甘聚糖为成胶成分,既使产品具有细腻、弹爽的口感、透明均匀的色泽,同时赋予其调节肠道菌群、缓解便秘的功能特性,显著增强了产品的功能活性;(4)以甜味剂代替传统茶冻中的蔗糖, 更适于控糖人群和代谢综合症人群食用。该研究结果为绞股蓝基功能性产品的研制与推广提供了技术和理论借鉴。     

鸭Ⅰ型肝炎病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

为建立一种快速检测鸭Ⅰ型肝炎病毒(DHV I)的方法,本研究根据基因库中DHV Ⅰ基因的保守序列,设计特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,建立了DHV I的RT-LAMP可视化检测方法。该方法的敏感性可达10fg,高于常规PCR方法 100倍;全部反应可在1 h内完成;可以通过肉眼观察颜色直接判定结果;对其它鸭常见病原体的检测结果均为阴性。实验结果表明建立的RT-LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,可用于DHV Ⅰ感染的快速检测。     

检测鸭呼肠孤病毒抗体间接ELISA方法的建立

RT—PCR扩增鸭呼肠孤病毒（Duckreovirus,DRV）的dB基因,克隆到pET-32a（＋）表达载体,再转化大肠杆菌Transetta（DE3）;含有重组质粒pET—σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Westernblotting显示,σB重组蛋白能够与兔抗DRV多抗血清特异性结合。以高亲和NI—NTA树脂在变性条件下纯化、梯度尿素复性的σB重组蛋白为包被抗原,建立了检测DRV抗体的间接ELSIA方法。分别以间接ELSIA方法和血清中和试验对DRV感染鸭血清和SPF鸭血清进行检测,两者的符合率为100％。该间接ELSIA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒和禽流感病毒阳性血清均无交叉反应。     

河南省樱桃谷鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析

对河南省樱桃谷鸭主产区信阳、新郑、焦作三地628份樱桃谷鸭血清样本应用PCR技术进行鸭乙型肝炎病毒（DHBV）检测,并将三地DHBV阳性样本各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,信阳、新郑、焦作三地樱桃谷鸭DHBV自然携带率分别为10.5%、8.9%、17.6%;3株DHBV基因组全长分别为3 021、3 027、3 024bp,均含有编码P、S和C蛋白的3个开放阅读框,各开放阅读框氨基酸同源性比较显示差异显著的区域位于P蛋白。序列分析显示,3株DHBV河南株核苷酸同源性为89.8%~93.9%,与参考株为89.4%~99.5%。遗传进化分析及P蛋白关键位点分析结果表明,信阳分离株为西方基因型,其余2株为中国基因型。本试验掌握了河南省樱桃谷鸭主产区DHBV自然感染情况,并成功克隆了3株樱桃谷鸭DHBV全基因序列,为该病毒的进一步研究提供了有益信息。     

鸭肝炎病毒VP1蛋白B细胞抗原表位预测及变异分析

以鸭肝炎病毒(DHV)SN株VP1基因序列为基础,运用Garnier-Robson、Chou-Fasman和Karplus-Schulz方法预测VP1蛋白的二级结构,并分别运用Kyte-Doolittle方法、Jameson-Wolf方法和Emini方法预测蛋白的亲水性、抗原指数和表面可及性,最后结合吴玉章的方法综合分析预测其B细胞抗原表位.结果显示,VP1蛋白C端第132～137、177～186、209～219区段有较好的亲水性、表面可及性和较高的抗原指数,并且在二级结构上含有易形成抗原表位的无规则卷曲和β-转角,可能是VP1蛋白的B细胞抗原优势表位;DHV SN株与弱毒疫苗株在推测的VP1 B细胞抗原表位177～186和209～219两个区域氨基酸序列变异较大.     

鸭坦布苏病毒E蛋白具有独特交叉反应性中和表位的鉴定

利用抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)中和单抗1G2,结合E蛋白多肽扫描技术,鉴定了最小抗原表位²²⁷GSSAGTWQN²³⁵。Western blot显示,残基²³¹G或²³³W的突变后,表位完全失去了与1G2抗体识别的功能,表明²³¹G或²³³W是抗体1G2识别的关键氨基酸位点。通过免疫荧光分析(IFA)显示,MAb 1G2与JEV、WNV和ZIKV的E蛋白发生交叉反应,表明该表位是黄病毒的交叉反应性表位。蛋白质和病毒模型显示,表位定位于成熟病毒粒子可接近的表面,在E蛋白结构域Ⅱ的hi环中。本研究首次证明,中和抗体1G2靶向交叉反应表位定位在E蛋白结构域Ⅱ的hi环,该表位的鉴定有助于提高对黄病毒血清诊断中存在交叉反应问题的认识和理解。     

应用单克隆抗体的免疫组织化学法研究雏鸭体内鸭瘟病毒的分布

本实验应用了免疫组织化学的单克隆抗体间接酶标染色法，对人工感染鸭瘟病毒雏鸭的组织切片进行染色观察。旨在研究病毒在鸭体内分布，对其进行定位。研究结果显示，鸭的心脏、肝脏、脾、胸腺、肠、法氏囊、胰、肺、肾等组织的细胞浆内均出现了染色的特异阳性反应物。结果表明，鸭瘟病毒广泛分布于感染雏鸭的各种组织器官，并造成一定的组织病理变化。