表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE2分泌的影响

[目的] 进一步探讨牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid,TCDCA）在抗炎免疫方面的潜在调节作用。[方法] 以AA大鼠成纤维样滑膜细胞作为研究对象,采用ELISA方法检测TCDCA和IL-1β作用下AA大鼠成纤维样滑膜细胞上清液中PGE₂的含量,分析TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE₂分泌情况的影响。[结果] TCDCA能够对IL-1β刺激下AA大鼠纤维样滑膜细胞PGE₂的分泌产生下调作用（P<0.05）。[结论] TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE₂的分泌具有抑制作用,为TCDCA在兽医临床应用提供依据。     

黑茶茶多酚类物质的提取及其抗氧化性能研究

以湖南安化天尖、茯砖及广西六堡3种黑茶为考察对象,研究黑茶中茶多酚的提取工艺以及抗氧化性能。针对超声波不同提取条件,采用正交试验,确定黑茶中茶多酚的最佳提取工艺条件;采用清除二苯代苦味酰自由基(DPPH)的能力和邻苯三酚自氧化体系来评价其抗氧化活性。结果表明:采用超声波热水复合浸提法提取黑茶中茶多酚的最佳提取条件为超声波提取功率250 W,提取固液比1∶25,提取温度55℃,提取时间45min,茯砖黑茶中茶多酚的提取率5.21%;同时测得茯砖黑茶具有较好的抗氧化能力,对DPPH自由基有较强的清除能力,但与维生素C(VC)相比,其抗氧化能力比VC的能力弱;其清除超氧阴离子自由基能力的IC50为0.507μg/mL。     

多糖提取及对家禽生长、免疫和产蛋性能影响研究进展

多糖是由多个单糖通过糖苷键结合而成的高分子化合物。食用菌及植物的组织中均存在丰富的天然多糖类物质。多糖具有抗氧化、提高免疫力、改善肠道健康等多种生理功能,作为功能性添加剂在饲料中被广泛应用。文章对多糖的提取方法及对家禽生长、免疫、产蛋性能影响进行综述,为进一步获取优质多糖及在饲料中的应用提供参考。     

Histological and proteomics analysis of apple defense responses to the development of Colletotrichum gloeosporioides on leaves

Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. is an important fungal pathogen known to cause glomerella leaf spot (GLS). The objective of this study was to analyze the infection of C. gloeosporioides on leaves of apple cv. Fuji (resistant) and cv. Gala (susceptible) and apply proteomics techniques to study the apple defense responses 48 h after inoculation (h.a.i.). On both of cultivars, C. gloeosporioides started to germinate at 3 h.a.i. on adaxial surface and produced appressoria adhering to epidermal cell juxtapositions. Histological analysis showed more stratified parenchyma in leaves of cv. Fuji than cv. Gala associated with differences in the chemical composition of cell walls. Total and unique proteins expressed by cvs. Fuji and Gala at 3, 12, 24 and 48 h.a.i. were detected by comparative proteomes analysis. A total of 42 unique proteins expressed at 24 and 48 h.a.i. were identified by MALDI/TOF mass spectrometry, and most of these proteins were identified as directly involved in defense responses.     

除草剂百草枯的检测方法研究进展

综述了近几年百草枯残留的主要检测方法,其仪器分析法主要为液相色谱法、气相色谱法、质谱联用法及其他一些方法,并对今后百草枯的检测方法进行了展望。     

煮熟和干燥处理对黄藤笋抗氧化活性的影响

通过测定黄藤熟笋、生笋(鲜切笋)、熟笋干和生笋干的水和4种不同浓度乙醇提取物中的自由基清除能力、总还原能力、总多酚含量和总黄酮含量,研究了煮熟、干燥加工方法对黄藤笋提取物抗氧化活性的影响。结果表明,煮熟处理能保持或提高提取物的抗氧化活性,干燥处理则相反。乙醇提取物比水提取物具有更高的抗氧化活性,以50%~75%的乙醇提取溶剂效果最好。熟笋在所有溶剂中的自由基清除能力、总还原能力、总多酚含量和总黄酮含量均表现出最高水平,表明煮熟是黄藤笋适宜的加工利用方式。     

哺乳动物Acot2基因的研究进展

酰基辅酶A硫酯酶2(Acot2)是酰基辅酶A硫酯酶(Acots)家族成员之一,其将酰基辅酶A(CoA)水解成游离脂肪酸和CoA,具有维持细胞水平的游离脂肪酸和酰基CoA(游离脂肪酸的活化形式)的潜力,在脂质代谢中发挥重要作用。本文对Acot2基因的定位、结构特征、生理功能及其调控进行综述,以期对Acot2基因的进一步探究提供参考。     

红叶石楠提取类胡萝卜素的工艺条件研究

在单因素试验基础上,采用正交试验优化红叶石楠绿叶中类胡萝卜素的提取工艺条件,并用柱层析分离纯化粗提液中的类胡萝卜素。结果表明,在40℃下以丙酮∶乙醇=1∶1为提取剂,料液比1∶10,浸提时间1.5 h,类胡萝卜素含量可达51.26μg/g。该类胡萝卜素粗提液经过柱层析法初步分离纯化,纯化倍数可达1.41。     

溶剂抽提对柚木材色及光诱导变色的影响

【目的】柚木在阳光照射下由浅棕色转变成金黄色从而变得更加珍贵,对柚木光变色机理的研究可以增加柚木的商品价值,也是建立木材材色调控技术方法的基础,本文旨在探讨溶剂抽提对柚木光变色的影响。【方法】采用溶剂水、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、苯、石油醚、苯-乙醇混合物(1:1、2:1、4:1、9:1)对柚木试样进行抽提,探究溶剂极性对柚木试样的色差的影响,然后再对抽提完的试样进行氙光光照处理,通过色差的分析探究不同溶剂抽提对柚木光诱导变色的影响。【结果】1)混合溶剂苯-乙醇抽提后抽提物溶液的颜色最深,极性溶剂抽提出的显色物质含量较多。2)柚木试样经抽提后可以增加柚木的明度色品指数L^*,尤其是2:1的混合溶剂苯-乙醇抽提后L^*增大最为显著,抽提的更完全。3)光照苯-乙醇抽提后的柚木试样,其红绿色品指数a^*增加较少,说明苯-乙醇抽提物是主要柚木试样呈现红色的物质基础。4)苯-乙醇抽提后b^*值减小较多抽提试样光照后b^*值反而增加较多,这表明苯-乙醇抽提掉的物质有可能就是木质素,木质素部分被苯-乙醇混合溶剂抽提出来,抽提后光照作用下木质素更容易降解呈现出更多的黄色。【结论】溶剂抽提处理和光照处理,对柚木材色都有显著的影响。不仅苯-乙醇混合溶剂抽提处理对柚木材色影响较多,而且苯-乙醇混合溶剂抽提试样在进一步光照处理后材色变化也很大,其中2:1的苯-乙醇溶剂是最为合适的用于研究柚木光变色成分变化的溶剂。