河南部分小麦育种亲本的高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

利用SDS-PAGE电泳技术对河南147份小麦(Triticum aestivum L.)品种(系)等育种亲本的高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)组成进行了分析.结果表明,这些材料在Glu-A1位点具有3种亚基类型Null(36.73%),1(60.54%)和2*(2.72%);Glu-B1位点具有7种亚基类型7+9(45.58%),7+8(35.37%),14+15(10.20%),6+8(0.68%),13+16(2.04%),17+18(4.76%)和7(1.36%);Glu-D1位点上具有3种亚基类型2+12(51.02%),5+10(40.82%)和5+12(8.16%);亚基组合类型有27种,较丰富,以"N,7+9,2+12","1,7+9,2+12","1,7+9,5+10"和"1,7+8,5+10"亚基组合为主,概率分别为14.97%,12.24%,11.56%和10.88%.     

Molecular characterization of Blastocystis isolates from children and rhesus monkeys in Kathmandu, Nepal

To investigate the possible transmission of Blastocystis organisms between local rhesus monkeys and children in Kathmandu, Nepal, we compared the subtype (ST) and sequence of Blastocystis isolates from children with gastrointestinal symptoms and local rhesus monkeys. Twenty and 10 Blastocystis isolates were established from 82 and 10 fecal samples obtained from children and monkeys, respectively. Subtype analysis with seven sequence-tagged site (STS) primers indicated that the prevalence of Blastocystis sp. ST1, ST2 and ST3 was 20%, 20% and 60% in the child isolates, respectively. In contrast to human isolates, ST3 was not found in monkey isolates and the prevalence of ST1 and ST2 was 50% and 70%, respectively, including three mixed STs1 and 2 and one isolate not amplified by any STS primers, respectively. Since Blastocystis sp. ST2 has been reported as the most dominant genotype in the survey of Blastocystis infection among the various monkey species, sequence comparison of the 150 bp variable region of the small subunit rRNA (SSU rRNA) gene was conducted among ST2 isolates of humans and monkeys. Sequence alignment of 24 clones developed from ST2 isolates of 4 humans and 4 monkeys showed three distinct subgroups, defined as ST2A, ST2B and ST2C. These three subgroups were shared between the child and monkey isolates. These results suggest that the local rhesus monkeys are a possible source of Blastocystis sp. ST2 infection of humans in Kathmandu.     

大肠埃希菌F18菌毛结构亚单位抗原特性的研究

利用已经表达的大肠埃希菌F18ab和F18ac菌毛各结构亚单位(FedA、FedE、FedF)的融合蛋白GST-FedA/ab、GST-FedA/ac、GST-FedE/ab、GST-FedF/ab、GST-FedF/ac分组肌肉注射免疫成年健康家兔,分别制备抗GST-FedA/ab、GST-FedA/ac、GST-FedE、GST-FedF/ab、GST-FedF/ac的多价血清.玻板凝集试验结果表明,抗GST-FedA/ab、GST-FedA/ac、抗GST-FedE/ab、GST-FedF/ab、GST-FedF/ac多价血清均能同时凝集F18ab+大肠埃希菌F107/86株、F18ac+大肠埃希菌8813株.通过荧光抗体染色法对抗FedA/ab、FedA/ac、FedE/ab、FedF/ab、FedF/ac的单因子血清的研究,发现F18菌毛"a"抗原因子分布于FedA、FedE、FedF亚单位上,"b/c"抗原因子分布于FedA、FedF亚单位上.     

类M蛋白亚单位疫苗的佐剂筛选

将铝胶、ISA206和CpG三种佐剂分别与热盐酸提取的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp. zooepidemicus)ATCC35246株类M蛋白配合,制成疫苗接种20日龄的小鼠,并设不加佐剂的类M蛋白亚单位疫苗免疫对照组.二次免疫后用ATCC35246株活菌攻击,铝胶、ISA206、CpG和对照组的保护率分别为75%(12/16)、81.25%(13/16)、68.75%(11/16)和56.25%(9/16).试验结果表明ISA206的免疫增强作用高于其他两种佐剂,可望与类M蛋白亚单位疫苗配合,用于预防猪链球菌病.     

猪传染性胸膜肺炎新型亚单位菌苗对小鼠的效力研究

利用大肠杆菌表达猪胸膜肺炎放线杆菌的分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ，提取表达产物包涵体，再加入我国流行的猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌，和等量弗氏佐剂乳化后制成亚单位菌苗，免疫BALB／c小鼠，间隔2周加强免疫1次。每次免疫后采血检测毒素I、Ⅱ、Ⅲ的EuSA抗体和7型菌的血凝抗体，第2次免疫2周后用5LDso的猪胸膜肺炎放线杆菌1型、7型菌株进行攻毒。结果发现第2次免疫后抗体水平显著升高，用2种血清型进行攻毒后其保护力分别为83．3％和91．7％，从死亡小鼠的体内分离到了攻毒菌株，初步的动物试验表明此种新型亚单位菌苗对同型和异型的APP菌株具有较好的保护力，为进一步研制高效的亚单位菌苗打下基础。     

大豆SMV病源相关蛋白的诱导与耐病性获得

本研究利用ＳＤＳ－ＰＡＧ技术,研究了不同抗病性品种（系）接种ＳＭＶ１号株系后,病源相关蛋白的表达变化。结果表明：大豆接种ＳＭＶ后,感病品种蛋白亚基增加数目较多,同时也伴随着一些正常表达的蛋白亚基的降解。而高抗ＳＭＶ１号病毒的大豆株系,接种ＳＭＶ病毒后,蛋白亚基增加１－２条,其正常工作的蛋白组分均没有消失,蛋白亚基消失与表达的变化与品种的耐病性获得相一致。这一结果,目前尚未见报道,深入研究病源相关蛋     

Role of the α subunit of nicotonic acetylcholine receptor in the selective action of imidacloprid

Examination of agonist interactions of imidacloprid on recombinant chicken α4β2 and Drosophila SAD/Chicken β2 hybrid receptors, expressed in Xenopus oocytes by nuclear injection of the cDNAs, indicates that imidacloprid is a partial agonist. Replacement of the α4 subunit for the Drosophila SAD subunit lowered the imidacloprid EC₅₀ 37-fold, whereas EC₅₀s for other agonists increased 4-50 fold, suggesting that the α subunit contributes to the high affinity of insect nicotonic receptors for imidacloprid. ©1999 Society of Chemical Industry     

色氨酸合成酶基因工程菌的研究

随着L-色氨酸在食品工业和医药保健等领域的开拓,市场需求日益增长,色氨酸合成酶能合成L-色氨酸,使得色氨酸合成酶逐渐成为研究热点。通过阐述色氨酸合成酶的性质、作用机理、酶固定化及应用,为进一步色氨酸合成酶研究提供理论基础。     

猪FSHβ亚基基因结构区插入突变的研究

通过聚合酶链式反应(PCR)对长白猪、杜洛克、大白猪、民猪和野猪的卵泡刺激素β亚基基因(FSHβ)结构区插入片段进行扩增,统计了不同基因型在不同猪种内的分布情况以及5个群体的平衡状况,并对0.5 kb的扩增产物进行了克隆和测序。结果表明:A、B基因频率在民猪内的分布与在大白猪、长白猪和杜洛克内的分布均差异显著,而与野猪差异不显著,杜洛克则与其他4个猪种均差异显著;序列分析表明,在已发表的猪FSHβ亚基基因全序列的+809与+810碱基之间,5个猪种内均存在插入片段,对插入片段进行BamHⅠ多态性分析发现本研究所检测样品中存在多态性,无BamHⅠ酶切位点的插入片段为典型的逆转座子结构,有BamHⅠ酶切位点的则不是,所有插入片段中均存在一个RNA聚合酶Ⅲ启动子及2个AluⅠ内切酶识别位点,插入片段的位置正好是FSHβ亚基上的2个糖基位点之间,它的存在很有可能会影响到FSH的生物活性。     

大肠杆菌F18菌毛FedE蛋白的表达与鉴定

根据已经发表的F18菌毛E亚单位的基因序列(fedE)设计1对引物,利用PCR技术从重组质粒TFl07E中扩增到一段序列,并按预定的阅读框架插入到表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedE,并转化大肠杆菌BL21获得重组菌PPFedE。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明：该序列大小为459bp,与GENEBANK中的FedE结构编码序列(Z26520)完全一致。通过对菌体裂解物的SDS—PAGE电泳分析以及Western blotting鉴定,证明重组大肠杆菌PPFedE的可以表达融合蛋白形式的FedE(命名为GST-FedE),即FedE蛋白(16．297ku)与谷胱苷肽转移酶(27．335ku)相连组成分子量为43．632ku的融合蛋白。