表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。     

小径木白桦锯材不同加热方式下含水率的变化

讨论小径木白桦锯材在连续加热和间歇加热方式下含水率的变化规律.结果表明:小径木白桦锯材的干燥速率在含水率15%以后明显降低,前期干燥过程锯材的干燥速率比后期的高2～3倍;间歇加热方式有利于内部水分向外扩散,间歇时间对干燥速率的影响很小;干燥过程中锯材厚度方向上的含水率梯度呈不对称分布,这与小径木的心材占较大比例有一定关系;间歇加热减少了锯材内含水率梯度的变化值,同时减少了应力的产生,从而提高了干燥质量.     

水稻品种对水稻细菌性条斑病抗性鉴定和抗性机制的研究

在室内选用致病力强的水稻细菌性条斑病菌株S_2对550个水稻品种进行了三次苗期的抗性鉴定,供试品种对细菌性条斑病的抗性存在明显的差异。抗性机制初步研究结果,发现供试抗病品种健叶内过氧化物酶活性、酚类化合物和可溶性糖含量均高于感病品种,而感病品种的游离氨基酸含量却高于抗病品种:接种后3天和6天测定抗病品种的酚类化合物和可溶性糖含量下降,感病品种却有所上升;无论抗、感病品种其过氧化物酶活性均上升;感病品种的游离氨基酸下降,而抗病品种到后期才稍有下降。高抗品种杜勒的气孔孔隙比其它所有供试品种都小,但各品种的叶片气孔密度与抗性无明显关系。     

Meropenem as an Alternative Antibiotic Agent for Suppression of Agrobacterium in Genetic Transformation of Orchid

A case of Meropenem as a novel antibacterial agent to suppress and eliminate Agrobacterium tumefaciens in the Agrobacterium-mediated transformation of orchid protocorm-like bodies （PLBs） has been reported in this article. The in vitro activities of meropenem and four comparator antibacterial agents against three Agrobacterium tumefaciens strains, LBA4404, EHA101, and GV3101, were assessed. In addition, the effect of meropenem on the growth of Dendrobium phalaenopsis PLBs was determined. Compared with other commonly used antibiotics （including ampicillin, carbenicillin, cefotaxime, and cefoperazone）, meropenem showed the highest activity in suppressing all tested A. tumefaciens strains （minimum inhibitory concentration [MIC] 〈 0.5 mg L^-1, which is equal to minimum bactericidal concentration [MBC]）. Meropenem, at all tested concentrations, except for 10 mg L^-1 concentration, had little negative effect on the growth of orchid tissues. The A. tumefaciens strain EHA101 in genetic transformation with vector plG121Hm in infected PLBs of the orchid was visually undetectable after a two-month subculture in 1/2 MS medium with 50 mg L^-1 meropenem and 25 mg L^-1 hygromacin. The expression and incorporation of the transgenes were confirmed by GUS histochemical assay and PCR analysis. Meropenem may be an alternative antibiotic for the effective suppression of A. tumefaciens in genetic transformation.     

外源NO对Ca(NO_3)_2胁迫下番茄幼苗PSII功能及光能分配利用的影响

为探讨外源NO缓解番茄幼苗次生盐渍伤害的光合生理机制,以秦丰保冠番茄幼苗为试材,在水培条件下,利用叶绿素荧光动力学技术研究喷施NO供体硝普钠(SNP)对80 mmol·L-1Ca(NO_3)_2胁迫下番茄幼苗PSII光化学效率、激发能分配和天线色素吸收光能利用的影响。结果表明,喷施SNP有效缓解了Ca(NO_3)_2胁迫对PSII的损伤,使第15天番茄幼苗叶片的PSII最大光化学效率(F_v/F_m)、天线转化效率(F_v'/F_m')、实际光化学效率(ΦPSII)、光化学荧光猝灭系数(q P)及吸收光能用于进行光化学反应(P)和非光化学耗散(Ex)的份额分别较胁迫处理显著提高了4.93%、39.31%、92.84%、39.00%、92.83%和10.33%;初始荧光(Fo)、非光化学荧光猝灭系数(NPQ)、双光系统间激发能分配不平衡偏离系数(β/α-1)和天线热耗散的份额(D)分别较胁迫处理显著降低了7.20%、13.22%、43.09%和24.70%。综上,外源NO能通过改善PSII光化学活性和增强PSII反应中心的非光化学耗散减轻Ca(NO_3)_2胁迫造成的光抑制,进而提高番茄幼苗的耐盐能力。本研究结果为利用外源NO缓解蔬菜设施生产的次生盐渍障碍提供了理论和技术依据。     

镉处理对绿豆种子萌发及蛋白质含量的影响

采用室内试验方法，研究了不同浓度的Cd^2＋溶液对绿豆种子萌发及蛋白质含量的影响。结果表明，当Cd^2＋溶液浓度低于20mg/L时，种子的发芽率不受Cd^2＋溶液浓度的影响；当Cd^2＋溶液浓度低于10mg／L时，种子的发芽指数不受Cd^2＋溶液浓度的影响；与对照相比。种子的活力指数与发芽势随着Cd^2＋浓度的增加而下降。种子内的蛋白质含量随着Cd^2＋溶液浓度的提高而升高，而蛋白酶活性和自由氨基酸的含量均下降。     

塔里木河流域叶尔羌高原鳅的生物学研究

为提高叶尔羌高原鳅人工饲养的成活率,对其年龄、摄食、繁殖习性、适应温度和窒息点及应激性进行了试验研究。结果表明,叶尔羌高原鳅喜栖黑暗,适夜间活动觅食;生长缓慢;生存的最低临界温度为5℃,最高临界温度为33℃,适宜水温在20±1℃;易受惊吓,宜养于无外界干扰流动的水体中,有弱趋光性;溶氧低于2 mg.L-1时活动不正常,当水体温度在20℃时,叶尔羌高原鳅的窒息点为1.18 mg.L-1;在一年中不同的时间,性比有所不同,属分批产卵型,成熟个体大小在不同的环境中也有不同。     

神农架自然保护区宜昌百合染色体核型分析

[目的]研究神农架自然保护区宜昌百合染色体核型,为研究宜昌百合遗传多样性、起源及系统演化提供一定的细胞学依据。[方法]采用常规制片法对神农架保护区的宜昌百合进行染色体核型分析。[结果]神农架保护区宜昌百合染色体数目为2n=2x=24,染色体基数x=12,染色体核型公式为K（2n）=2x=24=4m（2SAT）＋2sm＋8st＋10 t,主要由端部和近端部着丝点染色体组成。染色体相对长度组成为2n=24=4L＋4M2＋14M1＋2S,核型不对称系数为79.66%,属于＂3B＂型。[结论]神农架宜昌百合在百合属植物系统演化上处于比较进化的类型。     

一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法

番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性。结果表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带。扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测。