Development of Specific PCR Primers for Identification and Detection of Rhizopycnis vagum

Rhizopycnis vagum is a recently described coelomycete known to belong to the complex of root rot pathogens contributing to vine decline of cucurbits in several parts of the world. However, the fungus has also been reported to infect tomato, and as an endophytic associate of mycorrhizal roots of wild, asymptomatic Pinus halepensis and Rosmarinus officinalis plants in Italy. To accelerate epidemiological and ecological investigations on this fungus, a PCR primer pair was developed. Primers Rv1-F and Rv1-R were designed, based on alignment of internal transcribed spacer (ITS) sequences (ITS1-5.8S-ITS2), which amplified a 396-bp fragment from all R. vagum isolates tested, including isolates pathogenic to melons and endophytic isolates from mycorrhizae. Specificity of the primer pair was verified both in silico (BLAST searches using each primer string as a query) and in PCR assays, where the primers failed to amplify DNA from any isolate of fungi taxonomically related to R. vagum (e.g. Massarina walkeri and Stagonospora spp.) and other vine decline and common soilborne pathogens (e.g. Monasporascus cannonballus, Acremonium cucurbitacearum, Fusarium spp. and Rhizoctonia solani). Under optimum conditions, detectable amplification of the specific sequence required 0.05 pg of target DNA. Amplification of the expected 369-bp fragment was also obtained from DNA root extracts of nearly asymptomatic Cucumis melo plants inoculated with R. vagum under greenhouse conditions.     

金针菇、杏鲍菇菌丝对四种重金属耐受和富集特性的研究

以金针菇和杏鲍菇菌为试材,在平板培养基和液体发酵培养基中添加不同浓度梯度Pb、Cd、As、Hg重金属,通过测量菌丝日均生长速度、菌丝体干质量、菌丝体及发酵液中重金属含量等指标,进行重金属富集模型建模,研究不同菌类对不同种类重金属耐受及富集特征,以期为菌类富集重金属机理提供参考依据。结果表明:重金属Pb、Cd、As、Hg对菌丝生长及菌丝球量表现为低浓度(低于1mg·L^-1)促进、高浓度(高于5mg·L^-1)抑制,适宜浓度(1～5mg·L^-1浓度)的重金属Pb、Cd、As对菌丝的生长有一个明显前期抑制后期菌丝恢复正常生长的现象。金针菇和杏鲍菇菌丝体均表现为对重金属Cd和Pb高度富集,最大富集量分别达到Cd 619、424mg·kg^-1 DW以及Pb 449、844mg·kg^-1 DW,对重金属As和Hg富集量较小,最大富集量分别为As 49、21 mg·kg^-1 DW以及Hg 44、40mg·kg^-1 DW。不同菌类菌丝体对同一种重金属的富集饱和点不同,如金针菇菌丝体对Pb的富集饱和点是452 mg·kg^-1 DW,杏鲍菇菌丝体对Pb的富集饱和点是902mg·kg^-1 DW。同一菌类对不同重金属的富集饱和点差异较大,如杏鲍菇对Cd的富集饱和点为429mg·kg^-1 DW,对As的富集饱和点为22.4mg·kg^-1 DW。     

黑曲霉菌丝体及发酵液抗菌活性初步研究

对黑曲霉(Aspergillus niger xj)抗菌活性进行研究以筛选天然抗菌药物。利用PDA液体发酵培养黑曲霉,菌丝体用90%乙醇加热回流提取,减压回收溶剂得浸膏,浸膏用水分散,依次用石油醚和醋酸乙酯萃取,分别回收溶剂得到石油醚、醋酸乙酯和水部分。另设发酵液直接用石油醚和醋酸乙酯萃取,分别回收溶剂得到石油醚、醋酸乙酯和水部分。采用滤纸片扩散法对得到的粗提物进行抗菌活性测定。结果表明,在供试浓度为50 mg/mL、指示菌为金黄色葡萄球菌的检测条件下,发酵液醋酸乙酯部分具有明显的抗菌活性,菌丝体及发酵液石油醚部分的抗菌活性相对较弱,其余粗提物未检测到抗菌活性。     

桑黄液体发酵菌丝体提取物抑菌活性研究

采用琼脂打孔法和微量二倍稀释法比较了桑黄液体发酵菌丝体的不同溶剂提取物及不同极性部位对5种常见致病菌的抑菌作用,并初步探讨了热处理、紫外线和介质pH值对其抑菌作用的影响。结果表明：桑黄菌丝体5种提取物均对测试菌株具有较好的抑菌活性,其中甲醇提取物抑菌活性最佳。在甲醇提取物各极性部位中,乙酸乙酯萃取部的抑菌活性最强。热处理及紫外线照射对提取物抑菌活性没有明显影响;随着介质pH值的增大,提取物抑菌活性呈下降趋势。     

白玉菇的营养生理研

【目的】研究白玉菇的营养生理特性。【方法】以白玉菇菌株XBG-05为材料,测定其在不同培养基上的菌落直径、菌丝生长速率及菌落长势,比较不同的碳源（果糖、葡萄糖、甘露糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、可溶性淀粉、乙醇、甘露醇、甘油）、氮源（异亮氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸、色氨酸、硝酸钾、硫酸铵、磷酸二氢铵、氯化铵、尿素、硝酸铵、硝酸钠、蛋白胨、麦芽浸粉、酵母膏、牛肉膏和胰蛋白胨）、无机盐（硫酸镁、氯化钾、硝酸钠、氯化钠、氯化钙、磷酸二氢钾）、维生素（维生素B₁、维生素B₂、烟酸和叶酸）和植物生长调节剂（吲哚乙酸(IAA)、激动素 (KT)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄氨基嘌呤(6-BA)）对白玉菇菌丝生长的影响效果。【结果】 白玉菇的碳源谱较宽,其中对蔗糖的利用效果最好,其次为麦芽糖和甘露糖;白玉菇对复合氮源的利用效果最好,对无机氮源和氨基酸的利用效果次之;磷酸二氢钾、叶酸、烟酸及2,4-D、IAA、KT对白玉菇菌丝生长均具有显著的促进作用,而氯化钙、硫酸镁和6-BA则表现出抑制作用。【结论】 白玉菇菌丝生长的最适宜碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏;适量添加磷酸二氢钾、叶酸、烟酸和2,4-D、IAA、KT可以较好地促进白玉菇菌丝的生长。     

蛹草菌菌丝体培养条件的选择

不同培养基、环境因素（温度、ｐＨ、光照）、营养条件（碳源、氮源）对蛹草菌菌丝体生长影响的研究结果表明：蛹草菌菌丝体在ＰＤＡ综合培养基和沈农５号培养基上生长状况最好，在ＰＤＡ培养基、ＰＤＡ麸皮培养基生长最差．菌丝体在１５～２５℃范围内均能生长，其中在２５℃条件下生长状况最好，而且随着温度的升高，生长状况明显增强，３０℃和件下生长成侵，３５℃停止生长．菌丝体对酸碱度要求不严，在ｐＨ５．０～８范围内均能生长，其中在ｐＨ６．５～７．０生长最好．菌丝体在非光照条件下比在光照条件下生长旺盛．对不同碳源、氮源吸收各异，其中以甘露醇为碳源，以牛肉膏为氮源生长状况最佳．     

拮抗链霉菌Men-myco-93-63及其发酵液对棉花黄萎病菌生长的影响

本研究采用抑菌圈法和菌落生长法测定桔抗链霉菌 Ｍ ｅｎ－ｍｙｃｏ－ ９３－ ６３（５２３）及其发酵液对棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）Ｔ－９和河北省强致病力菌株Ｖ－ｈ菌体生长的影响。结果表明：链霉菌Ｍｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３及其发酵液对棉花黄萎病菌菌体具有强烈的抑制作用,明显降低了棉花黄萎菌的生长量。同时发现,拮抗链霉菌及其发酵液对不同致病菌株表现不同的抑菌效果;Ｍｅｎ－ｍｙｃｏ－９３－６３发酵稀释液可使Ｖ．ｄａｈｌｉａｅ出现融菌现象。     

冬虫夏草及其菌丝体研究进展

本文从冬虫夏草及其菌丝体的药化、药理(含临床应用)、冬虫夏草的人工栽培及菌丝体的深层培养诸方面概述了近年来的研究工作,对今后的研究工作提出建议与设想。     

拟康氏木霉产胞外多糖发酵培养基及培养条件的研究

以生物量和胞外多糖产量为指标,采用单因素和正交试验对摇瓶培养的拟康氏木霉(Tricho-dermapseudokoning)的液态发酵条件进行优化。优化后的拟康氏木霉发酵控制参数为:最佳培养基配方为麦麸30g/L,玉米粉30g/L,葡萄糖7.5g/L,KH2PO41g/L;发酵培养时间为6d;培养基的初始pH值为5.0～6.0;发酵温度为30±1℃。最佳培养条件下菌丝干重及胞外多糖的产量分别5.272g/L、0.622g/L。     

杨树菇深层液体发酵培养基及培养条件的优化

探索了培养基组分和培养条件对杨树菇菌丝体生物量的影响。结果表明,杨树菇液体发酵培养基的最优组合为:40g/L蚕蛹粉、20g/L可溶性淀粉、2g/LKH2PO4和1g/LMgSO4·7H2O;最优培养条件为:装液量320mL/L,接种量100mL/L,pH6.5,摇床转速180r/min,在(25±0.5)℃条件下恒温振荡培养8d,菌丝体生物量可达0.03g/mL。