正交设计在大白菜愈伤组织诱导中的应用

通过L25(56)正交试验,优化及筛选最适合大白菜鲁白六号子叶及下胚轴愈伤组织诱导的4种植物生长调节剂和AgNO3的浓度组合.结果表明,在α-NAA、6-BA、TDZ、ABA和AgNO3中,α-NAA 对子叶愈伤组织诱导率的影响达极显著差异,ABA对子叶愈伤组织诱导率的影响达显著差异,确定以MS 1mg·L-1 α-NAA 1mg·L-1 6-BA 3mg·L-1 TDZ 0.5mg·L-1 ABA 10mg·L-1 AgNO3组合为最佳子叶愈伤组织诱导培养基,MS 0.8mg·L-1 α-NAA 2mg·L-1 6-BA组合为最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基.试验中还发现,愈伤组织发生的同时还伴随着不定芽的发生,不定芽发生率较高的外植体,其产生的愈伤组织较少,且多为致密型愈伤组织.     

Special DNA Methylated Sites Between Haploid of Twin-Seedling and Its Hybrids in Rice(Oryza sativa)

DNA methylation is one of the epigenetic phenomena which can be transferred to the offspring by cell division in the evolution of organisms.The epigenetic regulation accompanied by gene expression can be found directly in the phenotype of haploidy plants.DNA cytosine methylation at the 5’-CpCpGpG sites of haploid,Shuhui 527,Shuhui 363 and their hybrids was analyzed by methylation sensitive amplification polymorphism(MSAP) method.There were 765 DNA methylated sites detected and the methylation level was lower in hybrids than parents.Meanwhile,the different bands between hybrids and parents were analyzed and two types of methylated sites were detected,of which one inherited from haploid,and the other did not.The biological functions of genes related to methylated sites involved in cell structure,metabolize and response factor.Therefore,DNA methylated modifications can activate and silence the genes and play an important role in plant growth,development and evolution.     

重组水蛭素的原核表达及分离纯化

为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求,试验通过对水蛭素基因进行密码子优化,构建了重组水蛭素原核表达系统,并对D_{600 nm}值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索,同时通过引入试验设计（design of experiment,DOE）方案将4种因素对诱导效率的影响进行进一步系统的优化,使用His-Trap亲和层析对重组蛋白进行纯化,并通过凝血酶滴定法对重组水蛭素的活性进行测定。结果显示,试验成功构建重组水蛭素原核表达载体,水蛭素蛋白为可溶性表达。单因素变量优化后的诱导条件为：在菌体密度D_{600 nm}值为0.4时,加入1 mmol/L IPTG,37℃下诱导7 h,重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白66.5%;而DOE试验优化结果为：在菌体密度D_{600 nm}值为0.6时,加入0.82 mmol/L IPTG,31.9℃下诱导7.6 h,预测重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白72.7%,显著高于单因子变量法优化结果（P<0.05）。进一步分析发现,各影响因素之间存在明显的交互效应,影响了单因素试验结果的准确性。通过亲和层析纯化后的重组水蛭素纯度可达99%,抗凝活性为114 ATU/mg。研究成功构建了重组水蛭素原核表达载体,对其表达条件进行了优化,并获得了重组水蛭素蛋白,为水蛭素应用于生物医药奠定了基础。     

水稻花药离体培养后代主要性状的遗传变异研究

应用花药离体培养技术 ,对水稻不同遗传背景材料的去分化和再分化能力以及花粉植株后代性状遗传变异动态进行研究 ,并分析了花粉植株后代的有关同工酶。结果表明 :1.不同遗传背景材料的愈伤组织诱导率、绿苗分化率有明显差异 ,其中 94 P 70的培养力最高 ,其次是汕优桂 99,其余未分化出绿苗。2 .花粉植株一代 ( H1)性状表现多样性 ;H2 代有少数株系的性状优于 H1代 ,发生分离 ,大多数株系的主要性状相对稳定 ,并出现优于 H1代及亲本的性状。3.花粉植株 H2 代的大多数株系的酯酶和过氧化物酶谱带数与亲本相同 ,只有个别株系与亲本不同。     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao’和‘Zenith’两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响。结果表明:蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降。同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天。     

花生子叶再生系统的建立

本实验建立了适应花育21号、22号、23号、24号的高频再生体系,以当年收获花生种子子叶为外植体接种MS 6-BA20μmol/L 2,4-D7.5μmol/L,14 d后产生丛生芽,芽诱导率达91.5%,平均每个外植体产生7个丛生芽。20 d后转入MS 6-BA2μmol/L诱导伸长,然后转入MS培养基生根获得再生植株。     

提高高羊茅愈伤组织诱导率的研究

用不同浓度的2，4-D，不同种类的培养基，对3个不同品种高羊茅成熟种子进行愈伤组织诱导，结果表明：这3个高羊茅品种对2，4-D均不敏感，诱导浓度需高于一般禾本科诱导浓度2mg／L；3种不同培养基MS、CC、NB中，CC培养基为最适培养基。此外，本实验还对外植体处理方法进行了改进，将胚乳切除后，愈伤组织诱导率大大提高，愈伤组织质量也有很大程度改善。     

在夏季应用氯前列烯醇诱导流产山羊发情的研究

选择2～5岁繁殖正常、体况中等的黄淮山羊空怀母羊10只为对照组,妊娠60 d母羊4只注射己烯雌酚流产后3～5 d为试验组,应用氯前列烯醇诱导发情。结果表明,试验组羊雌二醇、孕酮1～9d均呈上升趋势;9d雌二醇与1d比较呈显著性差异(P<0.05);而4d孕酮高于1d和14d,呈显著性差异(P<0.05)。在整个试验期,试验组孕酮含量均低于对照组(P>0.05)。PGc二次处理试验组96 h内发情率50％,均为异常发情。综合分析认为,夏季母羊流产后12～14d卵巢出现产后首次卵泡波,流产早期不适合诱导发情。     

外源激素对间情期毕格犬发情及妊娠的影响

给６只间情期雌性毕格犬注射外源激素雌酮（Ｅ１）、孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和雌二醇（Ｅ２），结果有５只犬发情，３只受孕，产仔１４只。发情前期、发情期与自然发情犬无明显差别。发情犬血浆ＬＨ高峰出现在阴门见有血样分泌物后（１１．６±１．６）ｄ；在ＬＨ高峰期血浆孕酮（Ｐ４）明显升高，其后１２ｄ，Ｐ４含量达峰值；８０％阴道上皮细胞角化后（６．４０±０．６８）ｄ出现ＬＨ峰     

A INTERESTING SEQUENCE OF REAL NUMBER AND THEIR PROPERTIES

The yandongkai' s 2-stories "v' shape sequence of natural number is generalized to 2-stories and n-stories "v" shape sequence of real number,and some very interesting properties are given.x