In vitro selection of tomato transformants at the immature embryo stage

Summary A method is described for selecting resistant transformed tomato genotypes in vitro at the stage of immature embryos. The utilization of HLH nutrient medium with the selective agent kanamycin is proposed. Normal development of seedlings from immature embryos, which do not form callus, is a good and true indicator for isolation of resistant genotypes. The immature embryos do not germinate and develop on MS selective medium.     

不同生长素类型及ABA搭配对小麦幼胚再生效果的影响

生长素是小麦幼胚产生胚性愈伤组织的关键成分,培养基中适宜的生长素种类、浓度和组合决定着小麦幼胚再生效果。本研究以小麦基因型CB037幼胚为材料,在分别确定dicamba、2,4,5-T和picloram的适宜用量的基础上,比较了2,4-D、dicamba、2,4,5-T、picloram在适宜浓度下诱导再生的效果,筛选...     

四种鸢尾属植物种子休眠和萌发研究

燕子花(Iris laeviga ta)、玉蝉花(Iris ensa ta)、溪荪(Iris sanguinea)、黄菖蒲(Iris pseudacorus)是鸢尾科4种喜水湿植物。经萌发实验证明,除溪荪种子没有休眠外,其它3种种子都有休眠。经去除种皮、低温沙藏、赤霉素处理和胚培养4种处理,证明燕子花、玉蝉花、黄菖蒲中抑制种子萌发的主要因素是胚乳。不同种打破休眠的有效方法不同,其中50 mg/L GA3处理可提高黄菖蒲种子的发芽率,达到84.4%,而低温沙藏30 d可使玉蝉花种子的发芽率达到94.4%,低温沙藏90 d则可提高燕子花的发芽率达到87.8%。     

基因枪法转化小麦幼胚瞬时表达

自Vasil et al．（1996）利用基因枪将获得小麦对除草剂Basta具有抗性的再生植株以来，基因枪介导的小麦遗传转化研究发展很快（Altpeter et al．，1996）。在小麦基因枪转化中，优化基因枪转化因素，提高转化效率仍然是基因转化的关键问题。本实验研究了不同金粉用量、质粒DNA浓度及轰击枪数对小麦幼胚瞬时表达的影响，通过GUS染色和细胞压片，分析了gus基因的瞬间表达。     

Bovine Immunodeficiency Virus in Relation to Embryos Fertilized In Vitro

The association of bovine immunodeficiency virus (BIV) with embryos derived by in vitro fertilization from oocytes of experimentally infected heifers or oocytes/embryos exposed to the virus in vitro was investigated. Using a nested-PCR assay, proviral DNA of BIV was not detected in follicular fluid or in embryos derived from BIV-infected donors. In vitro exposure of oocytes to BIV during maturation or insemination with BIV-infected semen resulted in zona pellucida-intact embryos testing negative for BIV provirus. However, exposure of zona pellucida-free day-7 embryos to the virus resulted in a positive BIV assay for 28% of the batches of embryos, suggesting that the zona pellucida has a role in protecting against BIV infection. The presence of BIV in the IVF system had no apparent effect on the development of bovine embryos to the blastocyst stage.     

小麦转化受体体系的建立--小麦幼胚组织培养研究

建立了一个以小麦幼胚为转化受体,转化后快速成苗的体系.筛选出适合于不同小麦品种的愈伤组织诱导培养基MS+2mg·L-1 2,4-D+0.4mg·L-1 IAA+0.2mg·-1 KT,愈伤诱导率达94.87%～99.04%.幼胚接种后,暗处理与弱光、强光合理配置利于绿芽的快速形成,在分化培养基中添加2.0g·L-1活性炭或1mg·L-1多效唑利于小麦再生苗的正常生长,从而提高移栽成活率.     

巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对小鼠胚胎体外发育的影响

以小鼠自然受精与体外受精胚胎为模型,探索鼠源巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在小鼠胚胎早期发育过程中的生理功能。分别使用添加不同剂量(对照组:0 ng.mL-1;试验组:0.5、2和10 ng.mL-1)GM-CSF的化学限定培养基连续培养小鼠自然受精、体外受精原核期与2细胞期胚胎,检测其胚胎着床前发育效率(卵裂率、囊胚率)及囊胚的质量(囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率、凋亡指数)。结果发现,对自然受精胚胎而言,原核时期添加不同剂量的GM-CSF,其卵裂率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均差异不显著,但10 ng.mL-1试验组的囊胚率显著低于对照组(61.6±5.1)%(P0.05);2细胞时期添加不同剂量的GM-CSF,其囊胚率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均差异不显著,但试验组中的囊胚凋亡指数均显著低于对照组(P0.05)),并且试验组中2 ng.mL-1的囊胚凋亡指数最低,显著低于0.5 ng.mL-1(P0.05),其他试验组之间的囊胚凋亡指数没有统计学上的差异性。对体外受精胚胎来说,原核时期添加GM-CSF,其卵裂率、囊胚率、囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率在各组之间均无显著性差异;在2细胞时期,10 ng.mL-1组的囊胚率显著低于对照组及其他2个试验组(P0.05),但各组之间的囊胚总细胞数、ICM/总细胞数的比率均无显著性差异。本研究结果表明,在化学限定培养基中添加一定剂量的GM-CSF有利于改善小鼠自然受精与体外受精囊胚的质量,但剂量过高可能不利于小鼠受精胚胎的早期发育。     

取材时期和母树来源对水曲柳体细胞胚诱导的影响

以水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)不同母树、不同发育阶段的未成熟合子胚切离子叶为外植体,研究了外植体发育时期和母树来源对该树种体细胞胚诱导的影响。结果表明:外植体的取材时期、母树来源及二者的交互作用对水曲柳体胚诱导均具有极显著影响(p0.01),影响大小依次为取材时期采种母树交互作用;7月下旬到8月上旬是水曲柳体胚诱导的最佳采种时期,此时种子的胚乳已固化,合子胚形态分化完成,胚大小达到胚腔的2/3左右,47株母树的平均诱导率分别达到15.86%和16.77%,最高的4株母树的诱导率达到53.33%~66.67%。     

猪早期孤雌胚组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化酶基因mRNA表达水平相关性研究

 【目的】 探讨猪孤雌胚早期发育过程中组蛋白H4K5乙酰化水平与组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)基因mRNA表达水平之间的关系。【方法】收集早期猪孤雌胚(2-细胞、4-细胞、桑椹胚和囊胚),运用细胞免疫组化和激光共聚焦显微镜,通过检测这些胚胎的相对荧光强度来评判其H4K5的乙酰化水平;运用实时定量PCR的方法检测猪早期孤雌胚发育过程中HDAC1基因mRNA表达的动态变化。【结果】从2-细胞到囊胚开始,其H4K5的乙酰化均在细胞核内表达,且各阶段表达量逐步提高,至囊胚期达最高(分别为1124.77±127.78、1305.81±184.23、1795.19±318.67及2149.63±529.47),差异显著(P＜0.05);从2-细胞到囊胚,其HDAC1基因 mRNA表达逐步降低(分别为1.00±0、0.91±0.009、0.85±0.008及0.67±0.006),各阶段差异显著(P＜0.05)。【结论】从2-细胞到囊胚,其H4K5的乙酰化水平与HDAC1基因mRNA表达水平之间呈负相关。     

酸枣成熟胚离体培养研究

为了建立酸枣成熟胚离体培养再生体系,以酸枣成熟胚为试验材料,研究启动培养基和增殖培养基对不同贮藏处理酸枣成熟胚萌芽率及增殖的影响。结果表明：以常温保存1a的成熟胚萌芽率较高（57.78％）,最佳启动培养基为不添加任何植物激素的M S培养基,而最适增殖培养基为1/2MS＋1.0 mg/L 6 BA＋0.3 mg/L NAA＋1.5 g/L PVP。