菌核生枝顶孢霉次生代谢物对桃褐斑致病菌的抑制效果

菌核生枝顶孢霉(Acremoniumsclerotigenum)作为枝顶孢属真菌的优势种,其次生代谢产物多样。为了明确其对植物病害致病菌的抑制效果,以桃褐斑致病菌(Alternariaalternata)为靶标菌,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定6种发酵液的抑菌活性。结果表明:PD培养基发酵液提取物对桃褐斑致病菌的抑制效果最好,对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为53.6734mg/L和808.1584mg/L;培养5d的PD培养基发酵液的抑菌效果最好,对菌丝生长和孢子萌发的EC50分别为1.4458mg/L和309.6318mg/L;菌核生枝顶孢霉发酵液对桃褐斑致病菌菌丝生长的抑制效果优于对孢子萌发效果。该研究结果为将其开发成生物源农药奠定了理论基础。     

Comparison of rhizosphere and endophytic microbial communities of Chinese leek through high-throughput 16S rRNA gene Illumina sequencing

Chinese leek (Allium tuberosum Rottler ex Sprengel) is a common vegetable in China. In our previous study, Chinese leek in rotation was found to have significant antifungal and nematicidal activity. This study's aim was to investigate the potential antifungal and nematicidal activity associated with rhizosphere or endophytic microbes of Chinese leek. Thus, a total of 79 261 high-quality sequences were obtained from Chinese leek rhizosphere soil, leaf and root samples. In the rhizosphere soil, the bacterial community comprised five dominant phyla: Proteobacteria (37.85%), Acidobacteria (10.99%), Bacteroidetes (8.24%), Cyanobacteria (7.79%) and Planctomycetes (7.1%). The leaf and root bacterial communities comprised two dominant phyla: Cyanobacteria (83.42% in leaf and 75.44% in root) and Proteobacteria (14.75% in leaf and 21.04% in root). Microbial diversity, richness and evenness in the rhizosphere soil bacterial community were higher than that in the endophytic bacterial communities. The rhizosphere bacterial community was significantly different from the endophytic bacterial communities. The endophytic bacterial communities from the leaf and the root were slightly, but not significantly different from each other. This study's findings would contribute to the isolation and identification of nematicidal and antifungal bacterial communities in Chinese leek.     

华石斛内生真菌组织分布特点及其抑菌活性

植物内生菌种类繁多,且具有较丰富的生物学功能。从海南特有药用植物华石斛(Dendrobium sinense)野生植株中分离内生真菌,初步探索其组织分布特点及抑菌活性。结果表明:从华石斛中分离内生真菌179株,通过ITS序列将之划为51个OTU,分属于25个属以上的类群,其中叶点霉属(Phyllosticta)为优势属。仅轮层炭壳属广泛存在于华石斛根、茎、叶中,其余类群皆存在一定的组织偏好性,其中18个类群只在一种组织中分布。叶中分离的菌株数最多,占比60.33%。不同培养基条件下分离得到的内生真菌种类也存在明显差异,以PDA和华石斛粉培养基分离到的内生菌类群最多,分别为12种,各占总分离类群的48%。12属36个菌株对至少1种供试菌具有抑制效果,其中抑菌生物活性最强的菌株为拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)1株和蓝状菌属(Talaromyces)1株。上述研究结果表明,华石斛内生真菌多样性丰富,部分菌株具有较强抑菌生物活性。这为华石斛内生菌资源的深入开发奠定理论基础,为进一步创制农用杀菌制剂提供依据。      

铜尾矿库白羊草内生真菌的分布及rDNA-ITS系统发育

对北方铜业铜矿峪矿十八河尾矿库的优势植被白羊草内生真菌染菌率进行调查,采集活体植株进行叶鞘内生真菌分离,并对白羊草内生真菌的形态特征及孢子形态进行描述,同时,选取其中16株进行5.8S-ITS扩增、测序和系统发育分析。结果表明,从生长在4个不同恢复年限子坝的白羊草中分离出形态不同的内生真菌,其中以白色菌落居多,生长速度位于5.515~12.548 mm/d之间。孢子形态以球型和椭圆型为主,大小介于2.085~7.072 μm之间。分子鉴定结果显示16种内生真菌属于3个属,为赤霉属(Gibberella)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉属(Penicillium),恢复30年与5年的子坝白羊草内生真菌遗传距离最小,亲缘关系最近,恢复45年与15年的子坝白羊草内生真菌亲缘关系最远。铜矿库不同恢复年限的土壤环境可能导致白羊草感染内生真菌的多样性,这为进一步丰富铜尾矿库内生真菌资源,揭示生活在铜尾矿的白羊草内生真菌的生态功能提供理论依据。     

我国3种疯草的内生真菌培养特性研究

家畜取食疯草出现中毒或死亡的原因为疯草体内含可产生苦马豆素的内生真菌。我国的多种疯草中的内生真菌为同一种,同种疯草中的内生真菌因随种子传播而孤立于单一寄主,可能出现与其他疯草内生真菌不同的生物学特性。为此在通过形态学和分子生物学鉴定菌种的基础上研究了我国最主要3种疯草小花棘豆、黄花棘豆和甘肃棘豆中内生真菌菌株(LYZ0091、LYZ0093和LYZ0109)在不同温度、pH值和培养基上的菌落生长速率和形态特性。结果表明,1)3个菌株的菌落停止生长的最高温度不同,LYZ0109无法在30 ℃下生长,但LYZ0091和LYZ0093仍可生长,最适宜生长温度分别为20、25和25 ℃,在5、10和15 ℃下4周时LYZ0091的生长速率显著(P<0.05)高于LYZ0109,在20和25 ℃下则显著(P<0.05)低于LYZ0109;2)在pH 4~11下3个菌株均可生长,菌株之间无显著(P>0.05)差异;在培养基NA、PCA、PDA、PSA和WHDA上LYZ0109多显著(P<0.05)大于LYZ0091;3)在温度、pH值和培养基处理中3个菌株均未产生分生孢子,LYZ0091和LYZ0109的菌丝扭曲状,厚垣孢子少,而LYZ093无扭曲状菌丝,大量成串的厚垣孢子由基质底部向上呈树状生长。     

禾草内生真菌检测方法研究进展

从最初发现黑麦草(Lolium perenne)和高羊茅(Festuca arundinacea)引起家畜中毒到后来其携带的内生真菌被发现,以及进一步的研究证实,内生真菌的存在不但导致家畜中毒而且能显著提高宿主在群落中的竞争力,也因禾草内生真菌的这种重要生理和生态作用,使其逐步成为国内外研究的热点之一,这也给内生真菌检测技术的发展提供了契机。初期主要是借鉴病原真菌等微生物检测的一些较成熟的方法,对禾草内生真菌进行染色镜检或分离检测,但容易受宿主种类、物候期、检测部位等因素的影响,造成检测结果的不准确。随着分子生物学、遗传学等学科的快速发展,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR法(realtime PCR)等现代分子技术在禾草内生真菌方面的应用和改进,使得内生真菌的检测方法不断推陈出新,这些方法能在一定程度上对传统检测方法给予有效的补充。快速有效的确定禾草内生真菌的存在、分布规律、分类地位等,需要准确合理地选择特异性较强的检测方法,例如定性或定量检测,并结合经典的染色镜检和分离法对禾草内生真菌进行确定。本研究对以上内容进行了综述,以期更深层次的借鉴和发展关于其它微生物的经典检测方法,同时开发具有禾草内生真菌特异性的检测技术,这些技术不仅能够鉴定内生真菌存在与否,而且能对内生真菌进行定量和活性的检测,是发展的重要方向和热点。对内生真菌定性、定量和活性的检测是未来值得研究的重点。     

产β-甘露聚糖酶内生菌的筛选、鉴定及酶学性质研究

试验从萌发的花魔芋实生种子中筛选出一株产β-甘露聚糖酶的内生菌,对该菌株进行鉴定并研究所产β-甘露聚糖酶的酶学性质。采用透明圈法初筛,DNS法测酶活力,摇瓶发酵复筛获得产酶最高的菌株,利用16S rDNA序列分析对该菌株进行鉴定并对所产酶的基本酶学性质进行研究。结果显示,该高产β-甘露聚糖酶的内生菌株与路德维希肠杆菌（Enterobacter ludwigii）同源性达99%。所产β-甘露聚糖酶的最适温度为60℃,在30~50℃条件下较稳定;最适pH为6.0,在pH 4.0~9.0的条件下较稳定;Zn²⁺（117.84%）、EDTA（115.80%）、Cu²⁺（113.76%）对β-甘露聚糖酶有较强的激活作用,Mn²⁺（22.02%）对其有强烈的抑制作用;以魔芋粉为底物时,Km值为26.65 mg/mL。该菌摇瓶发酵72 h后,β-甘露聚糖酶酶活力达9.48 U/mL,具有良好的酶学性质,在动物饲料工业中具有广阔的应用前景。     

一株具有抗菌活性的水浮莲内生放线菌的鉴定

[目的]从水浮莲(Pistia stratiotes L.)中分离获得对动植物病原菌具有拮抗活性的内生菌,对其进行系统鉴定及特性分析.[方法]采用纸片法进行拮抗实验,并对其形态特征、培养特征、生理生化特征进行检测分析, 16SrDNA序列的PCR扩增.[结果]筛选得到1株具有拮抗特性的放线菌XJPL-LA-67,该菌株的上述几个特征与链霉菌Streptomyces griseorubens的高度一致,与此同时,依据其16SrDNA序列分析,XJPL-LA-67序列的同源性与Streptomyces griseorubens高达99;.[结论]将水浮莲内生放线菌XJPL-LA-67确定为链霉菌Streptomyces griseorubens.     

印度东北部黄兰种植区丛枝菌根真菌的侵染和分布(英文)

调查了印度东北部梅加拉亚邦(Meghalaya)3个黄兰种植区(Umdihar,Umsaw和Mawlein)内丛枝菌根真菌和暗隔真菌的侵染。分离和鉴定了丛枝菌根真菌孢子,根据不同黄兰种植区内菌根菌种分布和丰富度评价了菌根菌多样性和寄主选择性。结果表明,丛枝菌根真菌侵染显著高于暗隔真菌。丛枝菌根真菌和暗隔真菌的侵染分别是50.91%～58.95%和1.84%～4.11%。真菌孢子密度在三个种植区内变化较大(p0.05)。在所鉴定的7个属29个菌种中,球囊霉属菌种的丰富度最高。Sorenson系数在0.35-7.0之间。种植区内菌种丰富度在2.0～2.9之间。总的菌种丰富度与总的相对丰富度显著相关(p=0.001)。真菌分布、相对丰富度和主成分分析结果表明,大果球囊霉(Glomus macrocarpum)、Glomus multicaulic、缩不囊霉(G.constrictum)和无梗囊霉是黄兰最偏好的菌种,可能是由于寄主的营养获得和生长较为适当。图6表5参27。     

盐胁迫对深色有隔内生真菌D575和D377生长及营养代谢的影响

为了研究樟子松根部深色有隔内生真菌的耐盐性,笔者采用菌物学、生物化学等方法,研究了樟子松根部深色有隔内生(dark septate endophyte, DSE)真菌D575 和D377 在菌株生长和营养代谢方面对盐胁迫的响应。结果表明,在NaCl 和Na2SO4胁迫条件下,菌株D575 和D377 的生长和营养代谢与盐浓度呈明显的相关性,不同盐浓度条件下菌株生长和营养代谢差异显著(P＜0.05),在CNaCl≤0.2 mol/L 和CNa2SO4 ≤0.2 mol/L 的低浓度盐胁迫条件下,D377 和D575 菌丝生长和对碳、磷相对利用率受抑制程度均较低,生长速率同对照相比相差不大,随着盐胁迫浓度的增高（CNaCl≥0.3 mol/L 和CNa2SO4 ≥0.3 mol/L）,菌株生长受到明显抑制,代谢缓慢。菌株间比较,DSE菌株D575对盐胁迫的耐受性好于菌株D377。