生物及非生物诱导因子对水稻白叶枯病的诱导抗性及其与 活性氧代谢的关系

以对白叶枯病高抗的水稻品种余水糯和高感的水稻品种浙辐802为材料,于2叶期用Tiron、Paraquat（PQ）和稻白叶枯病菌弱毒每株75－l进行诱导处理,测定诱导处理后3、24、48、72h叶中超氧化物歧化酶（SoD）活性、o2产生速率及丙二醛（MDA）含量的动态变化,并于3叶期用白叶枯病菌强毒株76－25进行挑战接种,结果表明：75－1和PQ均诱导两品种产生了系统抗性,并使诱导叶中o2产生速率和MDA含量增加。75－1使o2产生速率在24h达峰值,比对照升高3o．6％（余水糯）和25.3％（浙辐8o2）;而PQ使o2产生速率在24～72h维持较高水平,比对照升高49.4％（余水糯）和39．7％（浙辐8o2）。MDA含量的变化晚于o2产生速率的改变,在72h达最高值。75-1使SoD活性降低,并在24h达最大降幅;而PQ使SoD活性升高,并在48h达峰值。Tiron使PQ和75－l的诱导效果减弱,并使75－l对余水糯和浙辐8o2的互作由非亲和性互作转变为类似亲和性互作,导致侵染斑的形成。     

茶树—假眼小绿叶蝉—白斑猎蛛间化学通讯物的分离与活性鉴定

用Tenax TA吸附法捕集正常茶梢、机械损伤茶梢和茶树-假眼小绿叶蝉取食复合体挥发物，经GC/MS鉴定各处理挥发物的组成和含量，并就茶梢挥发物及其单组分进行了对假眼小绿叶蝉天敌蜘蛛优秀种之一-白斑猎蛛的生物活性鉴定，研究表明，捕食性天敌白斑猎蛛对正常茶梢挥发物和机械损伤茶梢挥发物的趋性明显弱于受假眼小绿叶蝉危害后茶梢的挥发物。在供试挥发物组分中，2，6-二甲基-3，7-辛二烯-2，6-二醇和吲哚两种成分是茶梢被害所形成的特异性化合物，并对白斑猎蛛具有明显的引诱活性，认为是白斑猎蛛受引诱的主要活性化合物。     

农大高诱1号对玉米不同种质类群诱导单倍体的效果初探

利用农大高诱1号对玉米不同种质类群S1代进行单倍体诱导,结果表明：不同种质类群平均单倍体诱导率为3．2％,不同类群间存在显著差异,对Lancaster群授粉所产生的群单倍体诱导率最高为4．6％,比Reid、唐四平头和旅大红骨类群诱导率高,达到5％显著水平,对热导地方种质群最低为1．8％,达到1％极显著水平。因此,最优诱导单倍体类群为Lancaster群。对5个基础种质群进行诱导,都表现为单倍体雌稳自然育性恢复较高,果穗结实株率平均达到92．9％。雄稳自然育性恢复极低,不同基因型材料诱导产生出的单倍体雄穗育性存在很大差异,5个基础种质群单倍体平均散粉率7．4％,旅大红骨和Lancaster群中诱导出的单倍体的散粉株率最高。获得的13个DH系在株高、散粉期和果穗特性等农艺性状表现一致,并且试配参加田间试验。     

琼脂糖凝胶电泳在水稻EcoTILLING技术中的应用

为构建低成本的基于琼脂糖凝胶电泳的EcoTILLING技术体系,用于水稻及其他生物自然群体变异的检测,对基于琼脂糖凝胶的EcoTILLING技术进行了优化。结果表明,从芹菜中提取的CEL Ⅰ核酸酶粗提物结合琼脂糖凝胶电泳检测技术,可以成功地检测到目的基因位点的突变。利用该技术,在云南地方水稻品种大吊糯中检测到2 个SNPs。     

GnRH-6与麦芽糖结合蛋白的融合表达及鉴定

将人工合成的哺乳动物型GnRH六聚体基因插入原核表达质粒pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠埃希菌BL21中,采用IPTG进行诱导表达,用多糖树脂亲和层析法纯化蛋白,用SDS-PAGE对纯化蛋白进行分析,用间接ELISA方法鉴定融合蛋白的反应原性.结果表明,与麦芽糖结合蛋白基因融合的GnRH六聚体基因在大肠埃希菌BL21中能够高效表达;用多糖树脂进行亲和层析纯化蛋白,具有良好的纯化效果;表达的融合蛋白分子质量大小与理论值一致,且融合蛋白与GnRH抗体的反应较好.     

Rapid changes in induced non-volatile secondary metabolites in damaged Pinus massoniana Lamb

Plants initiate the development of defense mechanisms as soon as pests start to cause damage to them. In order to have a thorough understanding of the physiological mechanisms of the Pinus massoniana self-defense mechanism, and to provide a theoretical foundation for an effective ecological management of this plant, levels of tannin, polyamine and phenolic acids were analyzed in undamaged (UDL), insect-damaged (IDL) and artificially-damaged (ADL) leaves at different times. Results show that, although the content of tannin significantly increased in IDL and ADL compared to UDL, its peaks appeared earlier in ADL than in IDL treatment. Tannin concentration substantially increased again 48 h after IDL treatment. On the other hand, the damage mode considerably affected putrescine and spermidine levels in leaves. Their concentrations in IDL plants remained higher than in UDL after a relatively long time (72 h), but spermine was barely detected in any of the samples. In general, total content of phenol acids significantly increased in damaged leaf treatments (ADL and IDL), with a higher level in IDL for most of the investigated phenolic acids, except for ferulic acid. Our study showed that, when damaged by insects, Pinus massoniana rapidly produces substances required in resistance induction to insects in order to insure its self-protection. __________ Translated from Scientia Silvae Sinicae, 2006, 42(1): 55–62 [译自: 林业科学]     

活性氧对稻白叶枯病叶片超微结构的影响

为探寻水稻抗稻白叶枯病菌的机制,用稻白叶枯病黄单孢菌弱毒株７５－１、特异的超氧阴离子产生剂Ｐａｒａｑｕａｔｅ和清除剂Ｔｉｒｏｎ对水稻感病品种浙辐８０２进行诱导处理后,挑战接种稻白叶枯病黄孢菌强毒株７６－２５,被处理水稻叶片的扫描电镜观察结果表明：７５－１和Ｐａｒａｑｕａｔｅ均能诱导水稻产生抗性反应,出现的病斑缩小,说明７５－１也和Ｐａｒａｑｕａｔｅ一样能诱导Ｏ＾－２的累积,并引发系统抗性反应的产生     

柑橘溃疡病抗性SNP验证及其相关钙依赖性蛋白激酶基因诱导表达

【目的】前期根据转录组数据挖掘柑橘单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点,通过关联分析获得14个与柑橘溃疡病耐/感性关联的SNP。以此为基础,本研究利用柑橘杂交群体验证这些位点与柑橘溃疡耐/感性的相关性,以期获得显著相关的SNP,并对其相关的基因进行柑橘溃疡病菌（Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc）和植物激素诱导表达分析。【方法】以抗病和敏感柑橘品种及其杂交F₁代群体共143个材料为试材,采用离体叶片针刺接种法进行溃疡病抗性鉴定;利用高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）技术,对F₁群体进行SNP分型;使用DPS软件对F₁群体的溃疡病耐/感性表型和SNP基因型进行相关分析;实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）分析其中一个SNP相关的柑橘钙依赖性蛋白激酶基因（calcium-dependent protein kinase gene,CDPK）的诱导表达模式。【结果】供试杂交F₁代群体的病斑面积在0.75—3.29 mm²;病情指数在30.2—100,而抗病品种‘金弹’病情指数为11.1,敏感品种‘冰糖橙’病情指数为100。病情指数较低的杂交后代,其亲本至少有1个为耐病性品种,母本耐病性强的居多。根据病情指数确定免疫材料1个,高抗17个,中抗31个,中感38个,高感56个。SNP分型结果显示,14个SNP位点在143个供试材料间均有多态性,可分为3种不同的基因型,2种纯合型和1种杂合型。简单相关分析结果表明,多个SNP位点的基因型与病斑面积及病情指数相关性显著。典型相关分析结果显示,其中5个SNP位点与病斑面积相关性较高,相关系数绝对值均>0.2,其编号分别为HP31、HP42、HP85、HP87、HP170,可利用这5个SNP位点的基因型预测柑橘溃疡病耐性的强弱。其中SNP位点HP31位于CsCDPK（CAP ID: Cs4g10370）的编码区,对柑橘离体叶片接种溃疡病菌诱导处理6、12、24、48和72 h后进行基因相对表达量分析,发现‘金弹’（高抗）、‘新生系3号椪柑’（中抗）和‘冰糖橙’（高感）中该基因的表达量均呈先升后降趋势,且均在48 h其相对表达量达到最高;接菌处理后12 h,‘金弹’中该基因的相对表达量为对照的3倍,而‘新生系3号椪柑’和‘冰糖橙’中无明显差异。此外,CsCDPK受水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）和脱落酸（ABA）诱导表达,且在不同溃疡病耐/感性品种中该基因诱导表达的模式不同。【结论】获得5个与溃疡病耐/感性显著相关的SNP,可用作柑橘溃疡病耐/感性筛选标记。SNP位点HP31相关的CsCDPK受溃疡病菌和SA、MeJA和ABA诱导表达,该基因可能在柑橘应答溃疡病菌侵染的信号转导过程中具有重要功能。