小鼠超数排卵与早期胚胎体外培养效果研究

为探讨冲胚方法对小鼠超数排卵效果的影响,分别采用子宫切碎法与子宫冲胚法对超排小鼠进行了冲胚。结果表明:子宫冲胚法的平均采卵数和平均获胚数极显著高于子宫切碎法(P0.01),而平均可用胚数显著高于子宫切碎法(P0.05),两种方法的平均未受精卵数则差异不显著(P0.05),说明冲胚方法对小鼠超数排卵效果的影响显著,且子宫冲胚法明显优于子宫切碎法。小鼠早期胚胎发育观察结果表明:超排处理后,在公母鼠合笼后76~79.5 h采胚,胚胎大多处于桑椹胚期,而在公母鼠合笼后88~91.5 h采胚,胚胎大多处于致密桑椹胚期与囊胚期;采用TCM199+15%胎牛血清培养液对小鼠胚胎进行体外培养是可行的。     

不同超数排卵方法所获羔山羊卵母细胞体外成熟率及体外受精率的比较

本研究观察了不同超排处理方法对羔山羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响，并将体外受精胚胎进行了移植，以便探讨利用羔山羊卵母细胞生产体外受精胚胎的技术途径。对２～４月龄羔山羊用ＦＳＨ、ＦＳＨ＋ＬＨ（静脉注射）和ＦＳＨ＋ＬＨ（肌肉注射）三种方法进行超排处理，平均分别回收１６．０、２０．３和１５．０枚卵母细胞。将这些卵母细胞进行２０～２４ｈ的成熟培养后，其成熟率分别为４５．５％，４４．４％和７６．５％。成熟卵母细胞经体外受精，体外发育培养后其２～４细胞胚胎的发生率分别为５．６％ａ、６．７％和３１．７％ｂ（ｂ，ｖｓ，ａ，Ｐ＜０．０５）。将９枚２～４细胞期胚胎移植给６只受体母羊，结果有２只妊娠并产羔２只。     

重复手术法收集超数排卵后的家兔卵母细胞

采用促卵泡素(FSH)和FSH混合25%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)两种方法进行超数排卵,以正常排卵母兔作对照,经过3次重复剖腹手术(每次间隔至少50天以上)收集家兔卵母细胞,旨在探索大量获取家兔成熟卵母细胞简单有效的方法。结果超数排卵的两组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出3倍以上(P=0.001),两种超数排卵效果无显著差异(P>0.1)。3次连续手术均成活的家兔中,对照组和FSH组3次取卵效果无显著差异(P>0.05),FSH混合25%PVP组首次手术与第三次手术卵母细胞数出现显著差异(P<0.01)。本方法可有效获取大量家兔卵母细胞,并提高实验动物利用率。     

布尔山羊胚胎移植试验研究

2001年9-12月份，应用2种超排方案对35只布尔山羊（其中经产羊30只，处女羊5只）进行了超排处理，并对180只受体进行了胚胎移植。结果表明：35只供体共回收胚胎471枚，可用胚为349枚，可用胚胎率为74.10％（349/471），每只平均获胚胎11.91枚，只均可用胚9.97枚。其中经产羊30只，平均每只获胚胎12.43枚，只均可用胚胎10.37枚；处女羊5只，平均每只获胚胎8.8枚，只均可用胚胎7.6枚。鲜胚移植受体180只，每只1枚，妊娠率为63.89％（115/180），另外，试验表明，不同剂量的FSH对超排效果也有一定的影响。     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

不同起始时间超数排卵处理的昆白小鼠排卵、受精和胚胎发育时程研究

超数排卵技术是获得大量卵母细胞、受精卵或不同发育阶段胚胎的主要手段之一。本研究选择发情前期昆白系小鼠(Mus musculus),分别在超排当天的12:00、16:00、20:00和24:00,腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG),48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(hCG),随即以1∶1的比例与单笼饲养的公鼠合笼过夜,并于次日清晨检查配种情况。超排小鼠卵母细胞、受精卵和胚胎回收结果表明,在12:00、16:00、20:00和24:00注射PMSG开始超排的小鼠,获取输卵管卵母细胞的适宜时间分别为注射hCG后16.23、14.02、15.93和12.98 h;获取受精卵的适宜时间分别为24.62、23.60、26.53和20.03 h;获取卵裂胚胎的适宜时间分别为42.76、42.39、41.85和40.47 h;获取4-细胞胚胎的适宜时间分别为56.87、57.84、57.31和56.92 h;获取8-细胞胚胎的适宜时间分别为66.89、67.39、66.20和66.07 h;获取桑椹胚的适宜时间分别为76.31、76.21、76.29和75.11 h;获取囊胚的适宜时间分别为100.65、97.14、93.91和96.86 h;获取孵化囊胚的适宜时间分别为114.57、112.34、112.11和110.28 h。在本研究选择的不同时间注射PMSG进行小鼠超排时,超排小鼠的排卵、受精和早期胚胎发育时程基本一致;通过调整超排处理开始时间,可调整超排小鼠卵母细胞、受精卵和不同发育阶段胚胎的回收时间;可以根据不同研究对小鼠卵母细胞、受精卵或不同发育阶段胚胎的需要,合理安排小鼠超排起始时间。本研究为以小鼠卵母细胞、受精卵或不同发育阶段胚胎为研究材料的相关研究提供了技术支撑。     

影响山羊超排效果的因素研究

为探讨最佳的超数排卵方案,提高胚胎移植效率,试验以波尔山羊为研究对象,比较了不同超排方法、超排次数、超排季节、授精方式及生育状况等因素对供体超排效果的影响.结果表明:不同超排方法对超排效果有显著影响(P＜0.05);经两次超排处理的供体所得可用胚数显著的高于未经过超排过的羊只(P＜0.05);经一次超排处理的供体可用胚比例显著高于未经过超排过的羊只(P＜0.05);而授精方式、超排季节、生育情况等因素对超排效果没有显著影响(P＞0.05).     

南阳牛超数排卵研究

采用FSH共超排南阳牛60头次,共采卵258枚(头均4.87±3.69),其中可用胚153枚(头均2.89±2.58),育成牛超排反应有效率高于经产牛(86.2%︰71.0%),经产牛采卵数多于育成牛(头均5.22±4.53︰头均4.5±2.58),可用胚数也多于育成牛(头均3.07±3.06︰头均2.69±2.02),FSH的适宜剂量经产牛为340mg/头,育成牛为300mg/头。季节对南阳牛超排没有明显影响。     

奶牛超排方法的研究进展

超数排卵技术是胚胎工程研究的重要内容，随着胚胎生物技术的延伸以及发育生物学研究的不断深入，牛胚胎需求量日益增大，超数排卵，胚胎移植技术的为加快育种步伐，纯种扩群提供有力的技术支持，为了筛选一种有效，稳定的超数排卵程序，解决良种胚胎不足的矛盾，本文对近年来奶牛超排方法进行了综述。并比较了各种方法的优点及存在问题，从而得到将FSH溶解在PVP中进行超排，不但延长了FSH的半衰期，增加FSH的作用效果，而且一次注射避免了母牛的应激反应，是目前较理想的一种方法。     

波尔山羊胚胎移植产业化关键技术研究

为使波尔山羊胚胎移植形成产业,对供、受体羊的选择、同期发情、超数排卵、采胚、检胚与移植等关键技术进行了研究.在非繁殖季节(北京地区 4月至 8月),供体波尔山羊 15只,受体羊(马头山羊) 76只,受胎率为 71.0%,移植产羔率为 42.1%;在繁殖季节(北京地区 9月至翌年 3月),供体波尔山羊 34只,受体羊(马头山羊) 98只,受胎率为 68.4%,移植产羔率为 48.0%.这表明波尔山羊胚胎移植可以从研究阶段发展到产业化应用阶段.