兔IL-6基因真核表达载体的构建及其对pcDNA-VP60DNA疫苗佐剂效应研究

为研究兔白介素6（interleukin6,IL-6）真核表达质粒（pcDNA-IL-6）对核酸疫苗免疫效果的影响,本文构建了真核表达质粒pcDNA-IL-6,并将其与核酸疫苗pcDNA-VP60联合免疫家兔,以pcDNA-VP60和质粒载体pcDNA3．1（＋）作对照,用血凝抑制试验检测试验兔体内特异性抗体水平。结果表明：真核重组质粒pcDNA-IL-6对重组质粒pcDNA-VP60均具有免疫增强作用,从免疫后7d到70d,pcDNA-VP60／pcDNA-IL6联合免疫组抗体水平均高于pcDNA-VP60免疫组,差异具有显著统计学意义。     

柔嫩艾美耳球虫早熟株免疫剂量研究

为了确定柔嫩艾美耳球虫（Eimenatenella）早熟株合适的免疫剂量,本文设立7个早熟株免疫攻虫组、1个不免疫攻虫组和1个不免疫不攻虫组,免疫组的免疫剂量为孢子化卵囊100、200、400、600、800、1000和2000个／羽,经嗉囊感染,7日龄首次免疫,14日龄以同等剂量进行第二次免疫,21日龄以8×10^4个／羽的同源母株进行攻虫,28日龄结束试验,以存活率、增重、肠道病变记分、血便数量、卵囊减少率为观测指标。对免疫保护效果较好的3个免疫剂量进行重复试验,同时设置商品化球虫疫苗对照组,免疫方法、试验周期、试验指标同第一批试验。结果显示：攻虫后,不免疫攻虫组出现5％死亡,而各免疫组来出现死亡;各免疫组卵囊减少率在61．57％～69．52％;200～2000免疫组的增重与不免疫不攻虫组差异不具备显著统计学意义（P〉0．05）;600～2000免疫组的肠道病变记分和血便数量均明显少于不免疫攻虫组（P〈0．05）。用600、800和1000进行重复试验,三个免疫组攻虫期间均来出现死亡,而不免疫组和疫苗对照组均出现5％死亡;三个免疫组的增重均明显高于不免疫攻虫组和疫苗对照组（P〈0．05）;早熟株免疫组的肠道病变记分和血便数量明显低于不免疫攻虫组（P〈0．05）,而疫苗对照组与不免疫攻虫组的相当（P〉0．05）;卵囊减少率在66.30％-78．75％,高于疫苗对照组的51．82％。结果表明,该柔嫩艾美耳球虫早熟株保持了良好的免疫原性,不同免疫剂量均能诱发鸡产生免疫保护力,其中600、800和1000个／羽的免疫效果均优于疫苗对照组,可考虑以600个／羽作为该早熟株在疫苗制备中的推荐免疫剂量。     

“人为错误”造成巴拉圭2011年口蹄疫暴发

介绍了巴拉圭2011年疫病暴发的过程、处理措施及后果,分析了发生的可能原因,建议政府应进一步控制疫苗生产过程,确保疫苗质量,警惕人为因素导致该病发生。     

鸡马立克氏病三价活疫苗剂量配比和免疫剂量的研究

用马立克氏病病毒BJMDV-1株分别攻击由CVI988/B5、HCV2/B5和FC126/B5毒株组成的,剂量配比不相同的马立克氏病(MD)三价活疫苗免疫的鸡群,结果表明MD三价活疫苗中CVI988/B5、HCV2/B5及FC126/B5毒株的合适配比为2:1:2。按照此剂量配比制备的MD三价活疫苗,用RB1B超强毒株进行攻毒,当RB1B攻毒对照组MD阳性率为85.71%时,MD三价活疫苗的半数保护剂量(PD50)均数为111PFU/只,95%置信区间为585～53PFU/只的范围内,并确定MD三价活疫苗的免疫剂量为2500PFU/只。用该剂量对鸡进行MD三价活疫苗免疫,可使鸡体产生抗RB1B超强毒株攻击的坚强免疫力。     

鹅新城疫新型疫苗研究进展

结合新城疫病毒的保护性抗原,就近年鹅新城疫的DNA疫苗、基因工程亚单位疫苗、重组活载体疫苗、减毒活疫苗等新型疫苗的研究现状进行了综述,为鹅新城疫疫苗研制提供参考.     

减毒沙门氏菌介导H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究

构建获得含有H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组真核表达质粒pCAGGS-HA。重组质粒电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,获得重组沙门氏菌SL7207(pCAGGS-HA)。重组菌SL7207(pCAGGS-HA)以5×109cfu的剂量2次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡后,再以油乳剂灭活疫苗加强免疫1次,并设立重组菌单独免疫组、灭活苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。联合免疫组和重组菌单独免疫组的小肠黏膜抗体效价与其他组之间存在显著差异(P<0.05),且两组的攻毒免疫保护水平与空载体组之间差异显著(P<0.05),其中联合免疫组的免疫保护率最高,达100%,而灭活苗免疫组保护率为80%,表明减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用具有良好的免疫协同作用。     

日本血吸虫合成表位肽疫苗对小鼠的保护性免疫

为观察日本血吸虫合成表位多肽疫苗诱导的保护性免疫,将用日本血吸虫抗原免疫血清筛选噬菌体随机12肽库得到的、具有较好免疫保护性的4个模拟抗原表位短肽进行人工合成,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测它们的抗原性.将合成多肽分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)连接后免疫昆明小鼠,第3次免疫后收集血清,检测其针对各个多肽和可溶性成虫抗原(AWA)的IgG抗体滴度,以及补体介导的小鼠体外杀日本血吸虫童虫作用.结果显示,4个合成多肽均能被相应的抗体识别,具有良好的抗原性;能诱导产生特异性IgG抗体.这些抗体在补体参与下能在体外有效毒杀血吸虫童虫.与正常小鼠血清比较,4个合成多肽免疫血清的杀童虫率分别为31.7%,41.3%,21.1%和17.3%,均具有显著性;与KLH免疫血清相比时,杀童虫率分别为23.7%,34.4%,11.8%(P=0.077,无显著性)和7.5%(P=0.102,无显著性).这些结果表明,这4个合成表位多肽具有良好的抗原性和免疫原性,与KLH连接后能诱导明显的抗体反应和显著的细胞毒作用.     

基于免疫信息学方法设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒S、M及E蛋白的多表位疫苗

【目的】设计针对猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV) S、M及E蛋白的多表位疫苗。【方法】本研究选用IEDB预测SADS-CoV S、M及E蛋白T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;用NetMHCIIpan 4.0 Serve预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位;用Immunomedicine Group、IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出重叠表位区域作为优势表位,运用IEDB、AllerTOP v 2.0 Servers筛选出高保守性、非致敏性的优势表位区域,通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力,最后进行基因克隆。【结果】经筛选后的高保守性、非致敏性优势表位构建的多表位疫苗相对分子质量为35.30 ku,为稳定亲水蛋白,具有良好的抗原性,存在1个N-糖基化位点,在二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和β-转角分别占22....     

草鱼“四联”疫苗在草鱼池塘养殖生产中的应用

利用4口池塘,每公顷放养75～100g/尾的草鱼种31 612尾～36 486尾。其中2口池草鱼种放养时接种草鱼"四联"疫苗,另2口池设为对照。经6个月的饲养试验,结果表明:接种疫苗的试验池草鱼与未接种疫苗的对照池相比,发病率比对照池低10.7%,成活率与平均产量比对照池分别提高12.8%和20.8%。试验初步证明,接种草鱼四联疫苗能有效地增强草鱼对"四病"的抵御能力,提高草鱼养殖成活率,是有效防治草鱼"四病"的有效措施之一。     

Efficacy of koi herpesvirus DNA vaccine administration by immersion method on Cyprinus carpio field scale culture

Koi herpesvirus specifically infects and causes mass mortality on koi and carp, resulting in severe economic losses. In this study, we presented the efficacy of KHV DNA vaccine administration by immersion method on Cyprinus carpio. Two different immersion densities of fish were applied, namely 800 fish L^?1 and 1200 fish L^?1. Thirty‐day‐old common carp juveniles were immersed for 30 min in the water containing 1.3 × 10⁸ CFU mL^?1 of heat‐killed Escherichia coli carrying DNA vaccine encoding glycoprotein‐25, and without vaccination treatment as controls. The challenge test was performed at 30 days post vaccination by injecting 0.1 mL KHV filtrate (10^?3 of dilution rate). The result showed that higher relative per cent survival of KHV‐challenged fish was obtained in 800 fish L^?1 (P < 0.05). Furthermore, significant specific antibody anti‐KHV response (P < 0.05) was detected on 28 and 36 days post vaccination in 800 and 1200 fish L^?1, respectively, compared to the controls there was no specific antibody detected. In conclusion, the KHV DNA vaccine could provide good protection in common carp against KHV infection, which has practical applications in aquaculture practices.