Fluorescence localization of epidermal cathepsins L and B in the Japanese eel

Histochemical localization of proteolytic activities in the dorsal epidermis of Japanese eel was demonstrated by fluorescent microscopy utilizing 4-methoxy-2-naphthylamide (4M$\beta$NA) derivatives as substrates and 5-nitrosalicylaldehyde as a trapping agent. Carbobenzoxy-L-phenylalanyl-L-arginyl-4M$\beta$NA (Cbz-Phe-Arg-4M$\beta$NA) and Cbz-Arg-Arg-4M$\beta$NA were used for direct detection of cathepsins L and B activities, respectively, in fresh frozen sections and unfixed cells of the eel epidermis. The fluorescing areas, where Cbz-Phe-Arg-4M$\beta$NA was hydrolyzed by cathepsin L, were shown in mucus secretory cells and club cells and broadly around skin surface. The fluorescing areas due to Cbz-Arg-Arg-4M$\beta$NA hydrolysis by cathepsin B were localized similarly in these tissues. The fluorescing intensity for both catheptic activities in mucus secretory cells was higher than that in club cells, where small fluorescing granules were distributed. These results indicate that eel cathepsins L and B are stored in epidermal secretory cells at different levels and probably serve as defense factors before or after secretion by these cells. Abbreviations: Cbz – carbobenzoxy; 4M$\beta$NA – 4-methoxy-2-naphthylamide; NSA – 5-nitrosalicylaldehyde.     

山姜对益生芽孢杆菌体外抑菌活性试验研究

为研究中草药山姜粗提液对益生芽孢杆菌体外抑菌效果,特采用试管二倍稀释法和管碟法检测不同浓度的山姜煎煮液和乙醇提取液在体外对蜡样芽孢杆菌PAS38菌株和枯草芽孢杆菌Pab04菌株的最小抑菌浓度(MIC)和抑菌直径,并以肠毒性大肠杆菌(ETEC)、4μg/mL硫酸庆大霉素作阳性对照,生理盐水作阴性对照。结果表明,山姜煎煮液和乙醇提取液对两株益生芽孢杆菌和ETEC无抑菌作用,硫酸庆大霉素对蜡样芽孢杆菌PAS38和枯草芽孢杆菌Pab04菌株MIC均为1.25μg/mL,对ETEC的最低抑菌浓度MIC为0.625μg/mL。山姜煎煮液和乙醇提取液对受试菌株抑菌直径与生理盐水相比差异不显著(P>0.05),硫酸庆大霉素与其相比差异极显著(P<0.01)。山姜粗提液对两株益生芽孢杆菌无明显抑菌作用。     

褐藻酸降解菌引起海带内皮层细胞储藏颗粒变化的初步研究

实验对正常海带用褐藻酸降解菌进行了人工感染，经培养使其产生烂斑，通过组织显微切片进行比较观察，发现褐藻酸降解菌首先侵入内皮层，然后再逐渐侵入到外皮层、髓部，最终导致海带病烂。切片中发现在侵染海带切片内皮层的细胞中，有大量储藏颗粒，形成椭圆或圆形。其直径范围在1．5－4．0μm之间，平均直径为2．7μm。该颗粒主要存在内皮层，从其产生到消亡的过程分析，与褐藻酸降解菌的侵入有关，并作为营养起到促进菌增殖的作用。     

饥饿和再投喂对日本黄姑鱼代谢率和消化器官组织学的影响

采用封闭式呼吸仪测定日本黄姑鱼(8.14±1.07 g)在饥饿和恢复投喂过程中的耗氧率;用石蜡切片法观察和分析饥饿和再投喂对日本黄姑鱼消化器官形态结构和组织学的影响。结果表明:随着饥饿时间的延长,其耗氧率逐渐降低;恢复投喂之后,其耗氧率开始逐步上升。从组织结构看,食道无明显变化,而胃、肠和肝胰脏则随着饥饿时间的延长出现不同程度的损伤;饥饿5 d组无明显变化,而饥饿15 d组变化明显,表现为胃腺细胞收缩,皱壁和上皮细胞高度减少,分泌颗粒减少,肠胃绒毛退化,肝组织致密,肝细胞内脂滴减少,胰腺泡缩小,排列不规则;饥饿10 d组介于饥饿5 d组和饥饿15 d组之间,再投喂各主要结构均有恢复。     

日本鳗鲡胶原蛋白和小清蛋白的过敏原性

以日本鳗鲡皮与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型的小清蛋白(PV-Ⅰ和PV-Ⅱ),纯化的目标蛋白经动物特异性抗体的免疫印迹实验确证。酶联免疫吸附测定和免疫印迹分析结果显示,纯化的胶原蛋白和小清蛋白分别与鱼类过敏患者阳性血清发生特异性反应,且二者之间无免疫交叉反应。体外模拟胃液消化实验和SDS-PAGE分析结果显示,胶原蛋白和小清蛋白均具有较高的消化稳定性。结果提示,日本鳗胶原蛋白和小清蛋白具有较高的消化稳定性和免疫原性,二者可引发不同患者的IgE介导特异性超敏反应。     

不同贮前热处理对青种枇杷果实贮藏效应的研究

通过采用不同的贮前热处理温度和时间组合,研究白沙枇杷青种在低温条件下的贮藏的内外品质的变化.结果表明:3种贮前热处理中,B处理(45℃热水处理10 min+低温(6±1℃))的效果最好,不仅青种枇杷果实的失重率和腐烂率低;而且贮藏到30 d时,枇杷果实的固酸比最高,较好保持了果实的风味.     

红金银花组织培养试验研究

以红金银花的顶芽为外植体,采用正交试验设计,对红金银花顶芽的初代培养、继代培养、生根培养进行了研究.结果表明:初代培养的最适培养基为:MS+6-BA(1.0 mg/L)+NAA(0.1～0.2 mg/L),最适蔗糖浓度为20.0 g/L;继代培养的最适培养基为MS+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+GA3(0.5 mg/L);生根培养以1/2MS+6-BA 0.25 mg/L+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L,即可得到理想的生根苗.     

三系粳稻不育系开花习性与异交结实率的关系

以583A、7740A7、7237A、春江12A、春江16A、春江26A、99-44A、宁67A、旱稻A等9个不同柱头外露率和花时的三系粳稻不育系为母本,以粳稻恢复系CH89为父本,进行大田小区制种,对不育系的午前花率、柱头外露率与异交结实率之间的关系进行了分析。结果表明,不育系柱头外露率与异交结实率之间的简单相关系数和偏相关系数以及午前花率与异交结实率之间的简单相关系数均达到显著水平,异交结实率与柱头外露率、午前花率之间的复相关系数也达到显著水平。粳稻不育系异交结实率(y)与柱头外露率(x1)、午前花率(x2)的回归方程为y=26.06 0.51x1 0.28x2。通径分析表明,柱头外露率对粳稻不育系异交结实率起更重要的作用。对三系粳稻不育系的遗传改良及制种策略进行了讨论。     

杂交粳稻泗优422制种特性探讨

观察了７３１Ａ、六千辛Ａ、轮回４２２、７７３０２的开花习性，并对其相互杂交的结实率进行了调查。与六千辛Ａ相比，７３１Ａ开花持续天数较短，开颖角度较小，柱头外露率低，开闭时间略长。在相同授粉条件下，７３１Ａ与轮回４２２的结实率低于六千辛Ａ与７７３０２。     

高原粳稻子预44抗稻瘟病基因遗传分析和定位

 以高感稻瘟病的低海拔粳稻江南香糯与高抗稻瘟病的高原粳稻子预44作亲本进行杂交,获得F1、F2、BC1F1和以F2单粒传构建的、由276个株系组成的F7重组自交系群体。分别用稻瘟病菌生理小种ZB13和ZE1对两亲本江南香糯和子预44及其杂交后代群体F1、F2和BC1F1进行抗性接种鉴定和遗传分析。结果表明,子预44对稻瘟病菌生理小种ZB13和ZE1的抗性都表现为单基因控制的显性遗传。进一步利用重组自交系F7群体的266个有效株系作为定位群体,将抗稻瘟病菌生理小种ZE1的基因定位在水稻第11染色体上与SSR标记RM206间遗传距离为0 cM的位置,暂定名为Pi zy（t）。这些结果为进一步将子预44中的抗性基因用于水稻抗病育种及该抗稻瘟病基因的克隆奠定了重要基础。