糯玉米离体培养获取耐盐变异体

为了获取糯玉米耐盐变异体,以120mg/L的平阳霉素预处理糯玉米自交系（S1、S2）种子20h,萌发后用茎尖诱导胚性愈伤组织,比较了激素组合对胚性愈伤组织诱导、继代和分化的影响。结果表明2, 4-D 2.0mg/L和6-BA 0.25mg/L组合诱导胚性愈伤的效果最好;在添加100mg/L CH、6-BA 0.25mg/L和2, 4-D 2.0mg/L的继代培养基上愈伤组织生长良好。将胚性愈伤组织依次在含NaCl 10g/L、15g/L和20g/L培养基中进行筛选,获得耐盐变异体,转入分化培养基中诱导再生植株,自交1代种子在含NaCl 15g/L、20g/L的培养基上萌发率较对照种子高数倍,在20g/L NaCl的胁迫下,变异体自交1代种子幼苗叶片中脯氨酸含量及K+ / Na+比例明显高于对照。     

影响玉米幼胚愈伤组织再生率的因素分析

为探讨影响玉米幼胚愈伤组织的再生率的因素,本试验以3个优良玉米自交系为材料,对影响幼胚的胚性愈伤组织诱导率、克隆指数和分化率的因素进行了研究。结果表明,3个玉米自交系幼胚的愈伤诱导率差异极显著。 生长环境对975-12影响显著,对18-599和416051影响不显著。18-599和416051的胚大小为2mm时II型胚性愈伤组织的诱导率最高,而975-12在胚大小为2.5mm时II型胚性愈伤诱导率最高。3个自交系的克隆指数和分化率一般在第3或第4代时达到最大值。综合分析表明,18-599和416051这2个自交系具有愈伤组织诱导率高、克隆能力强、易分化的优点,是玉米转基因研究中具有潜在利用价值的优良自交系。     

不同消毒方式对设施草莓花药愈伤组织诱导的影响

以栽培品种京藏香草莓(Fragaria ananassa Duch.)花药(单核靠边期)为材料,75%乙醇为对照,研究了5种不同组合的消毒方式对草莓花药愈伤组织的诱导影响。结果表明,处理T_1经过Tween-80消毒后,用75%乙醇进行消毒30 s可以有效控制花药污染,同时还能减少花药褐化率;其次是处理T_3,该处理虽能减少污染,但是褐化率略高于T_1;处理T_0(CK)、T_2均有不同程度的污染,处理T4褐化率最高。     

白术种苗的无性快速繁殖技术研究

以白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)的腋芽为外植体,以不同的光照时间、光照度和植物生长调节剂6-BA、NAA不同浓度配比以及MS、1/2 MS、1/4 MS培养基分别进行初代培养、愈伤组织诱导培养、愈伤组织增殖培养、愈伤组织丛生芽诱导培养、丛生芽生根培养,并炼苗移栽。结果表明,愈伤组织诱导培养基1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA的愈伤组织形成率为97.2%;愈伤组织增殖培养基MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA的愈伤组织增殖能力为9.5倍;愈伤组织丛生芽诱导培养基1/2MS+1.7 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的愈伤组织丛生芽诱导倍数为4.5倍;生根培养基1/4 MS+0.75mg/L NAA的生根率为96.7%,生根平均数为8.2条/芽,炼苗移栽的成活率在91.5%~93.0%。通过该方法进行白术种苗繁殖,有利于向国家作物种质资源库输送优质种质资源材料,丰富白术基因库,便于白术优质种质资源的交流与共享,从而提高育种水平与药材生产能力。     

基于LC-MS技术的代谢组学方法研究根肿菌对拟南芥代谢的影响

为探寻根肿菌侵染拟南芥后期寄主代谢的生物标志物,将罹患根肿病的油菜根切块进行组织培养,获得较为纯化的、单一的根肿菌接种体,与拟南芥种子在1/2MS培养基上共培养,利用液相色谱-质谱联用(LCMS)技术的非靶向代谢组学方法分析根肿菌侵染后期拟南芥根部代谢物差异。组织培养结果表明,根肿菌可以在愈伤组织中生长和繁殖;共培养结果显示45d后拟南芥侧根尖端肿大,显微观察显示根肿菌能完成侵染循环;代谢组数据PCA和PLS-DA分析结果显示试验组(接种根肿菌)和对照组(未接种根肿菌)明显分离;OPLSDA分析和t检验结果表明重要的差异代谢物包括油菜素内酯、类黄酮、木质素、萜类、甾体皂苷和磷脂等物质。提示这些物质可能在根肿菌侵染后期时拟南芥与根肿菌的相互作用中起重要作用。     

黄河三角洲耐盐小麦引种筛选试验初报

[目的]黄河三角洲中心城市东营市有大面积的滨海盐渍土,需筛选适宜盐渍土栽培的小麦品种.[方法]引进9个耐盐、抗逆、高产的小麦品种(系),以德抗961为对照,在全盐含量3～4 g/kg盐渍土上进行初步筛选试验.[结果]济南18号、盐鉴14品系、山融3号产量都显著高于对照德抗961,这3个品种(系),成熟期都在6月13号以前,生育期适中,不影响下茬作物播种.[结论]济南18号、盐鉴14品系、山融3号均适合在黄河三角洲轻、中度盐碱地推广种植.     

不同处理对刺葡萄愈伤组织花青素和原花青素生物合成的 影响

以刺葡萄 2 个同质不同型的愈伤组织细胞系为材料,研究不同处理因子对其花青素和原花青素合成能力的影 响。试验结果表明,刺葡萄 DLR 细胞系具有高产花青素和原花青素的能力,在培养至 45 d 时,其花青素与原花青素的 含量均达到最高值,分别为 113.85 μg/g（FW）和 3 562.95 μg/g（FW）;低温、高温、肉桂酸、壳聚糖、紫外线、黑暗 和 KT 等因子,对 DLR 细胞系花青素和原花青素的累积表现出不同的效应;其中,4 ℃低温处理下,DLR 细胞花青素 的积累效果最佳,比对照提高了 2.14 倍;壳聚糖处理下,原花青素积累效果最佳,是对照的 2.84 倍。刺葡萄 DLW 细 胞系不具有或极低的花青素和原花青素合成能力,处理因子调控对其作用效果不明显。本研究的结论为进一步进行刺 葡萄细胞花青素和原花青素合成调控奠定了基础。     

Sprouted Sorghum Extract Elicits Coleoptile Emergence,Enhances Shoot and Root Acclimatization,and Maintains Genetic Fidelity in indica Rice

The high growth-stimulating effect of plant extract has urged the plant biotechnologists to use natural supplements in the culture media instead of synthetic phytohormones. We advocated the effect of sprouted sorghum extract(SSE) on emergence, in vitro acclimatization, and genetic fidelity in coleoptile derived callus of indica rice variety ADT36. The use of SSE with Murashige Skoog medium efficiently acclimatized the root and shoot apical systems. A higher mat and seminal roots(3.4 g biomass) with an efficient shoot primordium elongation were observed with an increase in the concentration of SSE. Seeds treated with SSE medium showed higher germination and earlier coleoptile maturation about 48 h compared to untreated seeds, and there was a higher expression of e EF-1α with an increase in coleoptile length. B5 medium was effective on inducing embryogenic and nodular callus from 3-day-old coleoptile with 3.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and further proliferated effectively with 0.8 mg/L kinetin with a fresh weight of 180 mg. Highly significant regeneration was observed with combination of 2.5 mg/L 6-benzylamino purine and 3.0 mg/L α-naphthaleneacetic acid. The metabolic and genetic profiles of in vitro and directly cultivated plants were the same, examined through Fourier-transform infrared spectroscopy, random amplified polymorphic DNA(RAPD), inter-simple sequence repeat(ISSR) and R-ISSR(combination of RAPD and ISSR) markers, respectively, and thus confirming the significant efficacy of the SSE incorporated medium. Disarmed T-DNA was transformed to coleoptile derived callus through Agrobacterium tumefaciens LBA4404 and confirmed by GUS assay. The T-DNA integration was confirmed by DNA blot analysis using DNA from transient GUS-expressed explants. Thus, SSE can be used as a natural and organic supplement for organogenesis and efficient acclimatizations of shoot and root apical meristems in regenerated plants.     

黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养及其再生植株半薄切片观察

以黄独胚性愈伤组织为材料,对黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养的时间进行探讨,并对冻后黑暗培养胚性愈伤组织的显微结构及其再生植株进行半薄切片观察。结果表明,包埋玻璃化法超低温保存后,黑暗培养1~5 d,黄独胚性愈伤组织的冻后成活率随着时间的延长而增加,超过5 d,成活率显著下降。半薄切片观察结果表明,冻后黄独胚性愈伤组织直接置于光周期下培养,会造成细胞排列疏松,局部出现较大的细胞空隙;而经黑暗培养后再置于光周期下培养,细胞排列较为紧密,细胞空隙较小。经半薄切片观察,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织再生植株与常温继代再生植株相比较,根、茎、叶结构无显著差异,叶肉细胞的平均叶绿体数量也无显著差异。因此,冻后黑暗培养一定程度上保证了胚性愈伤组织细胞结构的完整性,且其再生植株无形态学变异。     

硝酸银对‘凤丹’牡丹愈伤组织褐变过程中酚类物质及相关酶活性的影响

以‘凤丹’牡丹组织培养获得的增殖幼苗为材料,在含有0~5.0 mg·L^-1硝酸银的初代培养基中进行培养后,通过测量总酚含量、单体酚种类及其含量的变化和相关酶活性变化,确定不同浓度的硝酸银对抑制愈伤组织褐化的作用。结果表明,培养基中加入硝酸银能明显减轻褐变,其中2.0 mg·L^-1的综合效果最好且对组培苗正常生长无影响;硝酸银对组培苗褐变过程中产生影响的单体酚有绿原酸、芦丁、香豆酸、对香豆酸、表儿茶素、二氢槲皮素。愈伤组织中总酚含量与褐变等级呈现极显著相关性（P<0.01）,过氧化物酶（POD）活性与褐变程度呈现显著负相关(P<0.05),多酚氧化酶（PPO）活性与褐变程度呈现显著正相关(P<0.05)。