啤酒糖酵母菌6-磷酸海藻糖合成酶编码基因tps1的cDNA克隆

本工作从抗逆性极强的啤酒糖酵母菌株 Ａ Ｓ２１４１６ 中分离纯化总 Ｒ Ｎ Ａ 和 ｍ Ｒ Ｎ Ａ ,以 Ａ Ｍ Ｖ 逆转录酶合成了单链ｃ Ｄ Ｎ Ａ 。采用保守引物扩增并克隆了该酵母菌的６ － 磷酸海藻糖合成酶编码基因ｔｐｓ１ ,建立了该基因 Ｄ Ｎ Ａ 片段的物理图谱,发现其酶切位点与已见报道的６ － 磷酸海藻糖合成酶编码基因相同。     

中国红豆杉紫杉烷10β-羟化酶的分子克隆及在酿酒酵母中的表达

天然产物紫杉醇是一种重要的抗癌药。其天然来源的匮乏和缺少商业上可行的化学全合成促进了对紫杉醇生物来源的深入研究。紫杉醇的生物合成是一个复杂的多步过程,主要包括四环骨架的构建和加入各种羟基和酰基基团,其中羟基的加入由细胞色素P450氧化酶催化。我们从中国红豆杉愈伤组织细胞mRNA构建的cDNA文库中克隆得到几个P450 cDNA片段。其中一个长1494bp的cDNA片段,编码497个氨基酸,推断蛋白分子量为56470 Da,等电点为9．42。序列比较显示,这个推断蛋白包含多个细胞色素P450氧化酶的保守区,具有典型的细胞色素P450氧化酶的特征,进一步的比较发现其与已鉴定的东北红豆杉紫杉烷-10β-羟化酶有92％的同源性。将这个cDNA片段连接在质粒pYeDP60上构建表达载体,导入相应的酵母表达菌株WHT和WVS进行表达,获得相应大小的蛋白表达条带,功能鉴定的工作正在进行中。     

布拉酵母高密度培养条件的研究

[目的]对布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)的高密度培养条件进行研究。[方法]以布拉酵母为试验菌株,通过分批发酵和流加培养筛,分别测定温度、pH、溶氧(DO)、起始葡萄糖浓度、残糖浓度及氨基氮浓度对布拉酵母生长代谢的影响。[结果]试验确定布拉酵母高密度培养的最佳工艺为:培养温度30～32℃,pH 5.0,溶氧30%,初始葡萄糖浓度30 g/L,培养过程中通过流加补料维持发酵液中葡萄糖浓度为0.5 g/L、氨基氮浓度为40 mg/L。在此条件下培养24 h后细胞干重最高可达56.6 g/L,细胞得率为42.4%。[结论]该研究对布拉酵母活菌制剂的生产制备具有重大参考价值。     

低能N+离子注入对酿酒酵母乙醇发酵活性的影响

[目的]研究低能N^＋离子注入对酿酒酵母乙醇发酵活性的影响。[方法]选取scerevisiaeAS2．399作为受体菌,经过不同剂量的低能N^＋离子注入后,确定最佳的注入参数,并研究离子注入对S．cerevisiae AS2．399乙醇发酵效率以及对乙醇发酵关键酶表达的影响。[结果]酿酒酵母As2．399在N^＋注入剂量为10×10^15 ions／cm^2条件下的存活率约为25％,传代培养后菌株发酵乙醇的产率约为0．42g/g（达到理论产率的84％）,相比于原始菌株有微弱提升,而与乙醇发酵相关的丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶酶活值分别达到0．53和2．47μmol／ml·min,大于原始菌株的相应酶活。[结论]该研究结果可为采用低能离子注入技术对酿酒酵母改良,以拓宽其利用底物的广度和提高发酵乙醇的效率奠定基础。     

酵母CFD1基因缺失菌株构建及其对复制寿命的影响

目的测定CFD1基因缺失对酿酒酵母复制寿命的影响。方法运用基因同源重组技术构建单基因缺失酵母菌株,利用光学显微镜检测酵母细胞的复制寿命。结果与野生型酵母菌株（29.29±8.71代对比,CFD1基因缺失酵母菌株复制寿命（27.27±8.01）代有所变短,但差异无统计学意义。结论 CFD1基因缺失不影响酿酒酵母的复制寿命。）     

The effect of Saccharomyces cerevisiae on digestion and mortality in the volcano rabbit (Romerolagus diazi)

An experiment was conducted to evaluate whether supplementation with a probiotic could enhance digestion and reduce mortality in the volcano rabbit in captivity. Two enclosures at Chapultepec Zoo, Mexico(114 individuals) were used in a crossover design(two periods of 60 days) with the following treatments: control group and supplementation with Saccharomyces cerevisiae(2×108 CFU/exhibit/day). Supplementation with the probiotic negatively affected(P<0.01) the digestibility of dry matter, organic matter, neutral detergent fiber(NDF) and energy. Mortality increased(P<0.04) following supplementation with the probiotic(4.26% vs. 8.89%), primarily in the juvenile rabbits. The results indicate that yeast supplementation in the volcano rabbit negatively affects digestion and mortality in captivity.     

Evaluation of growth performance and intestinal barrier function in Arctic Charr (Salvelinus alpinus) fed yeast (Saccharomyces cerevisiae), fungi (Rhizopus oryzae) and blue mussel (Mytilus edulis)

Arctic charr (Salvelinus alpinus) were fed for 99 days on experimental diets with 40% of fish meal replaced, on a crude protein basis, with intact yeast (Saccharomyces cerevisiae) (ISC), extracted yeast (ESC), Rhizopus oryzae fungus (RHO) or de‐shelled blue mussels (Mytilus edulis) (MYE). The fish were evaluated for growth performance, nutrient digestibility and fish intestinal function. Growth performance, retention of crude protein and sum of amino acids were not affected in fish fed diets ISC or MYE compared with those fed the reference (REF) diet. However, fish fed diet ISC displayed decreased digestibility of crude protein and indispensable amino acids and decreased intestinal barrier function compared with fish fed the REF diet. Fish fed diet ESC exhibited decreased growth performance and protein retention, but had comparable digestibility to fish fed the REF diet. Fish fed diets MYE and RHO showed similar performance in terms of growth, nutrient digestibility and intestinal barrier function. Overall, the results indicated that blue mussel and intact S. cerevisiae yeast are promising protein sources for Arctic charr.     

豆腐渣混合苹果渣固态发酵改善纤维适口性

为了改善豆腐渣发酵后膳食纤维的适口性,适量混合部分苹果渣,利用其糖分提高酿酒酵母的发酵效率,并对其固态发酵工艺条件进行优化。采用单因素和正交试验方法优化的较佳发酵条件为pH值为8、发酵温度22℃、豆腐渣与苹果渣质量比2∶1、酿酒酵母接种量8%、发酵时间48 h。在优化发酵条件下,豆腐渣和苹果渣混合物中粗纤维的质量分数由发酵前的107.8 mg/g下降到发酵后的64.2 mg/g,降解率为40.45%。混合苹果渣的固态发酵极大地改善了膳食纤维的适口性,可以作为健康食品原料广泛使用。     

富铬酿酒酵母的单倍体原生质体复合诱变选育

对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)单倍体菌株SY8的原生质体进行紫外线(UV)和微波(MW)复合诱变,获得1株高抗性突变菌株SY8-4-29,其Cr3+抗性水平为20 mmol/L,是出发菌株(5 mmol/L)的4倍,其铬含量为6.211 mg/kg,约是出发菌株(1.265 mg/kg)的5倍,拮抗紫外线6、0Co辐射和清除羟基自由基的能力显著增强。50世代培养结果表明,其遗传稳定性在95%以上。     

空间诱变高细胞壁多糖酿酒酵母突变体

研究了从SF8卫星搭载的4个酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)样品中筛选所得酵母突变株FL01-M、FL03-M、2.0016-M、2.1424-M的生物量、细胞壁及其多糖含量变化。结果表明,不同酿酒酵母菌株对空间环境的反应不同。与原始菌株2.0016相比,2.0016-M各项指标增加均达极显著水平(P<0.01),其中生物量增加46.7%,细胞壁占酵母干重比率增加3.8%,细胞壁厚度增加62.6%,β-葡聚糖含量增加146.8%,甘露聚糖含量增加18.8%,连续转接8次,各项指标均未出现回复突变状况。菌株FL01-M、2.1424-M生物量、细胞壁占酵母干重比率、细胞壁厚度、β-葡聚糖含量及甘露聚糖含量与源菌株相比无显著变化。FL03-M生物量变化不显著,其他各项指标都显著降低。可见不同酵母菌株对空间环境的敏感性不同,空间诱变是提高酵母菌株细胞壁多糖含量的一种有效手段。