一株产淀粉酶海洋放线菌菌株的选育及发酵条件的研究

为筛选到海洋来源的淀粉酶,采用Yoo改良法测酶活,对从浙江舟山群岛海域潮间带海泥样中筛选到的一株玫瑰暗黄链霉菌A46进行选育,通过紫外线和DES诱变处理,得到一株酶活为105.6 U/m L的突变株,该突变株酶活提高213.3%,经过10次传代,酶活仅下降3.6%,是一株性状稳定的优良菌株。在单因素实验的基础上应用Plackett-Burman实验设计和响应面分析方法(RSA)对该菌株的发酵条件进行系统优化,得到优化发酵条件:培养温度33℃、接种量2.25%、盐度23.4、初始p H值为8、转速200 r/min、装瓶量为20%、淀粉含量为0.5%、培养时间为72 h。研究表明,在此条件下的酶活为125.8 U/m L,酶活比优化前提高了19.1%。     

富锌灵芝发酵培养条件的响应曲面法优化研究

采用Plackett-Burman设计对影响灵芝富锌率的发酵环境条件进行筛选,所选取的3个关键因子为:培养基初始pH、接种量和摇床转速。采用响应曲面法(Response Surface Methodology,RSM)对影响灵芝富锌率的关键影响因素作进一步研究,通过二次多项回归方程求解可知,当培养基初始pH 8.30、接种量11.1%、摇床转速179 r/min、培养温度26℃、装液量0.32 mL/mL时,可获得最大灵芝富锌率,最大预测值31.01%。     

Screening of medium components by Plackett-Burman design for carotenoid production using date (Phoenix dactylifera) wastes

This work was conducted to use palm date wastes in the production of carotenoids. Three strains of Lactobacillus plantarum (QS1, QS2 and QS3) were isolated from food samples including bakery's yeast, olive fermentation and cheese. Strains were investigated for their structural recA gene by PCR. The recA gene was successfully amplified from all strains under study. The ability of isolated L. plantarum strains to produce carotenoids in MRS broth was investigated. QS3 isolate gave the highest ability for production of carotenoids. Statistical screening of media components for production of carotenoids by L. plantarum QS3 using date syrup as a source of sugar was carried out using Plackett-Burman design. Date syrup at 5% sugar concentration produced 16.21 mg/kg dry cell of carotenoids when used alone. Increase in carotenoids production was recovered (54.89 mg/kg dry cell) with supplementation of MRS medium with salts and organic nitrogen after optimization of pH and temperature using date syrup as a carbon source. Plackett-Burman design showed peptone, K₂HPO₄, sodium acetate and date juice as main components affecting carotenoids production.     

水解猪血蛋白制备肉味香精工艺优化研究

研究以猪血水解物为原料制备肉味香精的工艺。利用SAS软件中的Plackett-Burman(PB)设计,结合感官评价,对影响产物风味的相关因素进行评价,并筛选出了有显著效应的酶解液、硫胺素及反应温度等因素。然后用Box-Behnken设计及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件。最佳反应工艺条件:酶解液37.4 mL,硫胺素1.6 g,温度101℃,葡萄糖20.0 g,牛磺酸2.0 g,半胱氨酸2.5 g,反应时间60 min,pH值6.0。Plackett-Burman(PB)试验设计结合响应面分析可用于肉味香精工艺优化,理论感官评价得分为28.6分。     

热水法提取荞麦壳黄酮工艺优化及抗氧化活性

以水为提取溶剂对荞麦壳黄酮的提取工艺进行了优化,同时考察了黄酮得率与抗氧化活性的相关性。基于Plackett-Burman试验设计考察了各因素对荞麦壳黄酮得率及DPPH自由基清除活性的影响。试验结果表明:以黄酮得率为响应值的模型不显著,提取次数和料液比对DPPH自由基清除活性的影响显著(P0.05)。最佳提取条件:料液比(g∶m L)1∶20,80℃热水提取时间20 min,重复提取3次,黄酮得率最高,为1.273%,且抗氧化活性较强。荞麦壳黄酮得率与DPPH自由基清除活性具有一定的相关性,相关系数为0.650 4。     

利用响应面法对柳小皮伞液体发酵培养基的优化

首先采用Plackett-Burman设计对影响柳小皮伞(Marasmiussalicicola)AS5.166发酵胞外多糖培养基的组成成分进行了筛选,所选取的10个相关因素为:葡萄糖、蔗糖、酵母膏、蛋白胨、K2HPO4、KH2PO4、CaCl2、FeSO4、MgSO4、VB1。在此基础上,再采用响应曲面法(ResponseSurfaceMethodology,RSM)对影响柳小皮伞发酵胞外多糖培养基的关键影响因素蔗糖、酵母膏和FeSO4的最佳水平范围作了进一步的研究与探讨,通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为蔗糖23.28g/L、酵母膏12.21g/L和FeSO447.80mg/L时,胞外多糖产量的最大预测值为94.74mg/100ml。     

响应面法优化灵芝AM21菌株液体深层发酵培养基配方

为了提高灵芝(Ganoderma lucidum)AM21菌株菌丝产灵芝三萜的能力,采用响应面法对其液体发酵培养基配方进行优化.首先采用Plackett- Burman设计法对影响菌丝体三萜含量的9个相关因素进行筛选,确定主要影响因子为豆粕粉和山药,然后用最陡爬坡试验逼近2个主要因素的最大响应区域,并通过中心组合设计和响应面分析,确定主要影响因子的最佳浓度.优化后的培养基组成为1.84％豆粕粉,1％玉米粉,1％葡萄糖,0.92％山药,0.5％酵母粉,0.1％麸皮,0.1％ KH2 PO4,0.1％ MgSO4·7H2O,0.01％ VB1.使用该培养基生产的灵芝菌丝体中三萜含量较使用基础发酵培养基生产的高29.13％.     

粪肠球菌R-WL发酵培养基的优化

本试验旨在优化培养基提高粪肠球菌(Enterococcus faecalis)R-WL发酵液的菌体密度,为高效、优质的微生态制剂产品研制奠定基础。首先通过生长曲线的测定、培养条件和培养基成分的单因素试验,确定菌种RWL的最适培养条件为:时间14 h、pH 8.5、温度37℃、接种量3%,最适碳源为乳糖,浓度为10 g/L,最适氮源为蛋白胨+酵母膏,浓度为30 g/L。然后通过Plackett-Burman试验分析培养基中对粪肠球菌发酵影响最重要的主要因素为蛋白胨、乙酸钠和柠檬酸二铵,再通过最陡爬坡试验获得主要因素的最适范围,最后通过Box-Behnken试验和响应面分析得到主要因素的最适添加量。结果表明:最优发酵培养基配方为:乳糖10 g/L、酵母膏15 g/L、蛋白胨12.18 g/L、乙酸钠4.5 g/L、柠檬酸二铵4.5 g/L、硫酸镁0.58 g/L、硫酸锰0.25 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、轻质碳酸钙3 g/L,初始pH 8.5。通过试验验证,优化后发酵培养基的发酵菌液活菌数可达(6.44±0.10)×109cfu/mL,比原MRS培养基活菌数提高了71.28%。     

枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对枯草芽孢杆菌B908菌株的培养基配方进行优化,确定了影响B908菌株发酵液含菌量的3个重要因子依次为玉米粉、碳酸钙和豆饼粉;对这3个因子进行爬坡路径试验,通过响应面分析法确定了主要影响因子的最佳条件。优化后的培养基配方使摇瓶发酵液每毫升的含菌量从0.6×109个/ml提高到1.18×1010个/ml。     

光合细菌Ⅰ的分离及其培养条件的优化

从虾塘淤泥中分离出1株能降解亚硝酸盐的光合细菌I,初步鉴定其为球形红假单胞菌。利用Plackett-Barman设计法,对影响光合细菌I生长量的11个因素进行了筛选,确定影响该菌生长的培养基的主要因素为NH_4Cl、NaHCO_3、温度和接种量;采用响应面法对其中的4个显著因子的最佳水平进行研究,结果表明,当NH_4Cl为0.99 g/L、NaHCO_3为1.68 g/L、温度30.18℃、接种量8.90%时,经过5 d培养,菌体密度显著提高,培养液OD_(660)可以从0.972提高至1.343。