猪蓝耳病卵黄抗体的制备与初步应用试验

为了制备猪蓝耳病(PRRS)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,采用高致病性猪蓝耳病灭活疫苗(NVDC-JXA1株)免疫产蛋鸡,收集高免蛋,通过水稀释提取法制备PRRS高免卵黄抗体,对其进行无菌检验、安全性检测、效力检验及动物保护性试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果发现,该方法制备的PRRS高免卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32,保护率达100%,临床试验治愈率为84.5%。研究表明,PRRS特异性卵黄抗体的制备具有操作简便、成本低廉等特点,可以用于PRRS临床治疗。     

反向遗传技术在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理、其基因组、蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传学技术为进一步研究PRRSV提供了技术支撑。本文从病毒拯救、疫苗研制、分子病原学诊断等方面综述了反向遗传学在PRRS研究中的应用。     

我国规模化猪场蓝耳病流行病学调查

2005年7月-12月,对10个养猪主产区53个规模化养猪场（母猪头数600头以上）进行PRRS流行病学调查。共采集2635份血样,使用IDEXX公司PRRS抗体检测试剂盒进行抗体检测。检测结果表明,所有送检猪场都至少有一个样本呈PRRSV抗体阳性,样本阳性率76．85％（2025份）。山东样本阳性率40％,福建和湖北的样本阳性率在90％以上。后备母猪共计采样239份,样本阳性率为88．70％;1～3胎母猪采样418份,样本阳性率82.54％;4～6胎母猪采样278份,样本阳性率78.06％。生产猪群从断奶到保育阳性率从56．62％降低到49.71％,以后逐渐上升,表明在保育期发生感染,保育猪是PRRSV多发猪群。     

猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染的流行病学调查及综合诊断

猪繁殖障碍与呼吸道综合征（PRRS）和猪圆环病毒2型（PCV-2）是近几年来严重危害猪群的两大免疫抑制性疾病。为研究2种病毒自然条件下混合感染的发病情况，本研究分别利用RT-PCR和PCR方法，对近2年来自山东及周边地区78家猪场的237份临床病例进行了PRRSV和PCV-2的检测，结果发现PCV-2和PRRSV混合感染病例48份，阳性率达20.2%。2种病毒混合感染已成为该地区猪病流行的重要特征。本研究对该地区猪群混合感染的现状、发病表现及病变特征等进行了系统调查分析。     

美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立

设计两套反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了检测美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株的RT-LAMP方法。采用RT-LAMP方法与实时荧光RT-PCR方法检测58份病料,结果一致,但RT-LAMP方法的灵敏度大约高出10倍。RT-LAMP方法特异性良好,检测猪瘟、伪狂犬病和细小病毒等均未出现交叉反应。结果表明,建立的美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株RT-LAMP检测方法具有特异、灵敏、高效和简便的特点,在我国猪蓝耳病快速检测领域将有广阔的应用前景。     

云南禄丰部分规模化猪场猪蓝耳病血清学调查

为了了解禄丰地区部分猪群中蓝耳病病毒感染情况及疫苗免疫情况,为蓝耳病的防控提供参考,试验用ELISA方法对云南禄丰部分规模猪场进行了猪蓝耳病血清抗体的检测,共检测8个规模化猪场的150份血清。结果显示：8个规模化猪场猪蓝耳病抗体阳性率分别为100％,93．30％,90．00％,82．76％,83．33％,14．70％,9．10％和3．70％;蓝耳病抗体平均值分别是0．117,1．395。1．115,0．036,0．075,0．603,1．286和0．758,离散度分别是0．164,0．566,0．527,0．071,0．061,0．691,0．548,0．577。结果表明不同猪场的猪蓝耳病阳性率及抗体水平存在一定差异,同时调查表明：云南禄丰地区大部分规模猪场的猪群蓝耳病免疫效果合格,同时也存在小部分猪群蓝耳病免疫效果欠佳的情况。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组遗传变异研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种传染病,该病主要引起妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病,导致高死亡率,生长发育受阻,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.PRRSV基因组存在高度变异性,美洲型和欧洲型的核苷酸序列差异较大,不同的ORF序列同源性存在不同程度的差异.论文就PRRSV基因组的遗传变异进行分析,对研究PRRS的致病机制、免疫机理及制定相应的防控措施有一定的指导意义.     

2007-2010年河北省部分地区猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学

为了弄清河北省秦皇岛、唐山、廊坊、邯郸等部分地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的ORF5和Nsp2基因变异情况,对采自以上地区在2007—2010年期间的临床发病猪肺组织,提取其RNA,通过RT—PCR扩增样本中PRRSV的ORF5和Nsp2基因,对目的基因测序,并以VR-2332、CH—la、MLV、LV、HB-1、HB-2、JXA1、HUB1、HEB1等毒株为参考序列,进行序列分析和进化树分析。扩增出42个ORF5基因,14个Nsp2基因,通过完整的ORF5和部分Nsp2基因序列比较分析发现所有毒株均为美洲型,且大多数毒株与国内2006—2007年间分离的JXA1、HUB1、HEB1等高致病力毒株同源关系很近。42个ORF5基因编码的氨基酸序列分析表明GP5蛋白的糖基化位点数量和位置已发生变异,主要中和表位存在氨基酸变异（L／F^35→I^39）,与毒力相关的13位和151位点为强毒株的氨基酸特性（R^13、R^151）。14个Nsp2基因推导的氨基酸系列比较发现,1株PRRSV Nsp2基因未发生缺失突变,而剩余的13个毒株Nsp2基因均发生了氨基酸缺失,在481位和532～560位2处分别缺失1和29个氨基酸。系统发育进化树结果显示河北部分地区流行株分为2个小分支,1个毒株与HB-1聚为1支;河北流行株的大多数毒株在另一个分支,与高致病力毒株JXA1等聚为一支。本研究结果揭示了河北省部分地区流行的PRRSV ORF5和Nsp2基因的变异特征,丰富了河北省的PRRSV分子流行病学资料,提示要针对ORF5和Nsp2基因的变异采取PRRSV的防控措施。     

猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗不同组合免疫效果观察

选择未免疫高致病性猪蓝耳病、O型口蹄疫和猪瘟疫苗的30～40日龄仔猪273头,随机分成5组,按5种免疫程序进行猪瘟、O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病免疫工作,并进行免疫副反应和免疫效果评估。试验结果表明：按照C组免疫程序节省时间,免疫效果好,免疫副反应率低。     

猪高致病性蓝耳病弱毒活疫苗免疫试验

为了更好地指导养殖户应用高致病性蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）,本中心从淋巴细胞计数、病毒核酸检测、免疫抗体检测等方面,分析了高致病性蓝耳病弱毒活疫苗免疫应答情况。本次试验选取30天龄的杜长大三元断奶仔猪20头,随机分成A、B两组,每组10头。A组注射JXA1-R株活疫苗,B组头注射生理盐水作对照。结果显示该疫苗免疫仔猪28天后,淋巴细胞由7．585×10^9／L上升到15．28×10^9／L,免疫抗体阳性率由0％上升到100％,免疫猪病毒核酸检出率由0％上升到90％。揭示了PRRS活疫苗（JXA1-R株）能使仔猪产生较好的免疫应答,疫苗毒感染持续时间多数超过28天。