间接ELISA检测雏鸡烟曲霉菌抗体的研究

以烟曲霉菌丝提取物作为包被抗原 ,建立了检测雏鸡血清中烟曲霉菌抗体的间接 ELISA方法。特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高 ,重复性好 ,其抗原包被浓度为 1 2 4μg/ ml,血清最适稀释度为1∶ 1 6,抗原最佳包被时间为 4℃过夜 ,血清反应时间为 3 7℃作用 1 .5 h。对 1 2 0份人工感染烟曲霉菌的雏鸡血清试验发现 ,间接 ELISA检出时间比琼脂扩散试验早 7d以上 ,检出率高约 40 .8%。表明间接 ELISA试验是一种特异敏感的雏鸡血清烟曲霉菌抗体检测技术     

2种东风螺繁殖及苗种生长发育的比较

对方斑东风螺Babylonia areolata(Link)和台湾东风螺B·formosae(Sowerby)进行人工繁育试验,结果表明:在水温23·6±1·1℃和充气条件下,方斑东风螺的孵化时间为8d,台湾东风螺的孵化时间为7d;刚孵出幼体壳长方斑东风螺为482·7±10·6μm,台湾东风螺为398·2±10·3μm。在水温25·2±0·9℃、培育密度为0·1~0·2ind·mL-1左右时,方斑东风螺幼体壳长增长速度可达33·6μm·d-1,约在第18天开始进入附着变态,变态时壳高为1323·9±118·6μm;台湾东风螺幼体壳长增长速度为25·3μm·d-1,约在第16天开始进入附着变态,变态时壳高为955·5±74·4μm。在水温26·5±0·7℃、培育密度为2100ind·m-2左右时,方斑东风螺和台湾东风螺的稚贝壳高增长速度分别为0·21和0·20mm·d-1。     

不同供核细胞、处理方法及激活时间对猪核移植重构胚发育的影响

在不同的外界因素下,使用胞质内体细胞核注射的方法,为进一步提高猪体细胞核移植的效率来寻找新途径。利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞经过去核,注核及激活等操作后,研究猪颗粒细胞和胎儿成纤维细胞,血清饥饿处理法及不同的激活时间等因素对猪核移植重构胚体外发育的影响.结果表明,猪颗粒细胞和胎儿成纤维细胞用作核供体与猪卵母细胞构建重构胚,在卵裂率上无显著性差异。作为供核细胞的猪成纤维细胞,经过血清饥饿与不经过血清饥饿培养,核移植重构胚的卵裂率无显著性差异。在进行核注射后,使供核细胞与胞质受体作用适当的时间(1～6h)在进行激活,有利于重构胚的发育。提示颗粒细胞和猪胎儿成纤维细胞用作核供体与猪卵母细胞构建重构胚以及作为供核细胞的猪成纤维细胞,经过血清饥饿与不经过血清饥饿培养处理后,这二者对猪核移植重构胚发育的均无明显影响。但是使供核细胞与胞质受体作经过适当的时间(1～6h)的激活,却有利于重构胚的发育。     

Cryoprotectant microinjection toxicity and chilling sensitivity in gilthead seabream (Sparus aurata) embryos

Cryopreservation of fish embryos requires an optimal distribution of cryoprotectants inside all embryo compartments. Traditional techniques for the incorporation of cryoprotectants (CPAs) have failed to protect all fish compartments, especially the yolk sac which has been considered the principal point of embryo chilling sensitivity. In the present study, microinjection was used to incorporate cryoprotectants into the yolk sac of gilthead seabream (Sparus aurata) embryos at tail bud stage. The effect of microinjection viability, cryoprotectant toxicity and chilling resistance was evaluated through the hatching rate. Larval survival at first feeding was also determined in microinjection viability and cryoprotectant toxicity studies. Permeabilized seabream embryos were microinjected with 2.35 nl dimethyl sulfoxide (Me₂SO), methanol (MeOH), ethylene glycol (EG) (5 M, 10 M and pure) or sucrose (10% and 15%). In a second experiment, 29.5 nl and 154.0 nl of the highest concentration of each cryoprotectant were used in the same embryo stage. To test the effect of microinjected cryoprotectants on embryo chilling resistance, 29.5 nl of pure Me₂SO or 15% sucrose was microinjected into the yolk sac of tail bud stage embryos and then at a later stage, (tail-bud-free), were exposed to 3 M Me₂SO solution at − 10 °C for 30 min. Our results showed that microinjection technique did not affect the viability of tail bud stage embryos as is shown by the high hatching and survival rates. Hatching and larval survival rate at first feeding were not affected with any of the CPAs tested, showing percentages higher than 75% and 90%, respectively, when embryos were microinjected with a smaller quantity of cryoprotectant. Sucrose was the cryoprotectant better tolerated at higher concentration and volume. Cryoprotectant concentration inside the yolk higher than 1.18 M for Me₂SO, 1.5 M for EG and 2 M for methanol decreased the hatching rate. Microinjection allowed the delivery of high concentrations of CPAs into the yolk sac without deleterious effects on the embryo, but did not provide a significant level of protection for the whole embryo against chilling injury.     

西咪替丁对鸡离体外周血淋巴细胞增殖的作用

本试验系统观察了西咪替丁对离体鸡外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）增殖及ＣｏａＡ诱导细胞（ＣＩＣ）活性的作用;西咪替丁以剂量依赖性方式促进鸡ＰＢＬ的增殖;低浓度与ＣｏｎＡ对促进鸡ＰＢＬ增殖无协同作用,但高浓度与ＣｏｎＡ呈现协同途径地ＬＰＳ激活鸡ＰＢＬ具有明显促增殖作用;逆转磷酸组胺对ＣｏｎＡ激活鸡ＰＢＬ增殖的抑制作用;损坏抗肾上腺素对ＣｏｎＡ激活鸡ＰＢＬ增殖的抑制作用,可拮抗氢化可的松对ＬＰＳ激活鸡ＰＢＬ增     

雏鸡血清蛋白含量与生长性状间相关的通径分析

本研究估测了２４０只８周龄Ｓ２２０母雏血清蛋白各组分百分含量与其体重、日增重和相对生长的表型相关，再分别以体重、日增重和相对生长为依变量对性状间相关进行了通径分析。结果表明，８周龄母雏血清白蛋白百分含量对其体重、日增重才相对生长的正直接影响均；较大，其通径系数分别为０．３９０３、０．３４１７，且均极显著（Ｐ＜０．０１）；γ球蛋白百分含量对上术３个生长性状的负直接影响均较大，其通径系数分别为－０．３     

PCR方法鉴定牛早期胚胎性别研究进展

对用于早期胚胎性别鉴定的多重PCR、巢式PCR、引物一扩展预扩增PCR、非电泳PCR和LAMP法等扩增技术进行了综述,并针对早期胚胎性别鉴定技术在养牛业生产中的应用现状和存在问题进行分析与讨论,展望了PCR性别鉴定技术在养牛业中广阔的商业应用前景。     

进口奶牛胚胎移植效果的研究

2007年5月8日至2010年11月9日以来,笔者在北京奶牛中心良种场及中国农机院小王庄牛场移植进口奶牛胚胎。引进美、加系优质荷斯坦奶牛胚胎的目的是选育优秀后备种公牛和建立种子母牛群。截止2010年11月,累计使用胚胎369枚,移植受体牛367头,妊娠212头,平均移植妊娠率为60.40%。移植结果说明,本研究成功建立了一套先进的进口胚胎移植方法。     

根癌农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化影响因素的研究

为了进一步完善根癌农杆菌介导的小麦遗传转化体系,以小麦成熟胚为转化受体,研究了根癌农杆菌介导法转化小麦的主要影响因素,结果表明,以gus基因瞬时表达率、抗性愈伤组织获得率和分化率为转化指标,小麦成熟胚在预培养基CM4C1P上预培养14d后,用侵染培养液Ⅰ侵染3 h,再经干燥共培养方式处理3 d,是根癌农杆菌介导成熟胚转化的合适条件.在优化条件下,转化约30 d后GUS稳定表达的愈伤组织数占受体组织总数的15.83%;GUS稳定表达的抗选择剂G418的植株数占受体组织总数的0.28%.     

新城疫病毒单克隆抗体研究Ⅲ酶标单克隆抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原

应用双抗体ELISA夹心法检测禽类新城疫病毒(NDV)抗原,用单克隆抗体或多克隆抗体包被固相载体,将活化的40孔板作为捕捉待检新城疫病毒抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)与单克隆抗体的结合物作为示踪抗体,比较了单克隆抗体和多克隆抗体的捕捉效率.结果表明,NDV单抗2C₁₂、4H₁₀优于血清IgG,同时确定了双抗体ELISA夹心法对不同日龄健康鸡组织产生背景反应的O.D.值基本参数,以X+2SD为判定阈值.捕捉抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为500～400μg/ml;示踪抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为1:3000～1:2000,ELISA夹心法的灵敏度可达4μgNDV蛋白/ml;对NDV不同毒株感染鸡各脏器的NDV检出率为:肾100%、肺90%.证明用双抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原特异,敏感,是禽类新城疫病毒检测的新途径.