PBI121/GPAT质粒的构建及对非洲菊转化*

 为提高植物抗寒性,本文构建一个植物表达载体,并对非洲菊进行转化。用已克隆的强抗冷植物兵豆的甘油-3-磷酸转酰酶（GPAT）基因构建表达载体,将GPAT插入表达载体pBI121质粒取代该质粒上原有的GUS基因,并用PCR和酶切进行鉴定。用农杆菌介导的方法将该质粒转化到非洲菊中。结果表明该植物表达载体构建成功,同时对非洲菊高效转化体系进行探索,获得卡那霉素抗性苗7苗。     

卡特兰水培技术研究

为研究名贵兰花的水培技术,促进水培兰花的生产与消费,以兰科卡特兰为试材,从卡特兰水生根系诱导,营养液培养,筛选出水培卡特兰诱导根系的最适宜的NAA浓度和营养液配方,在培养的过程中,防治根腐烂和水藻的生成。结果表明,低浓度NAA（5mg/L）对诱导水生根系具有促进作用;KC营养液是水培卡特兰较好的营养液;加强根部通气有利于防止卡特兰根系的腐烂,在培养过程中添加2～3滴含氯霉素的滴眼液有助于防止藻类的生长。     

矮牵牛花特异表达启动子PchsA的克隆及蓝色基因F3′5′H表达载体的构建

[目的]克隆花特异表达启动子PchsA,将此启动子与蓝色基因“F3′5′H”构建新的表达载体,拟以该启动子驱动“F3′5′H”在其他花色中特异表达。[方法]根据GenBank报道的矮牵牛启动子的序列设计并合成一对特异引物,以蓝紫色矮牵牛总DNA为模板,用PCR仪扩增目的片段。[结果]PCR扩增出的启动子DNA片段长约550bp,回收后连接到PGM-T质粒载体上,经转化、筛选确定重组子,酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序,得到片段长度为553bp。经DNAMAN软件分析和GenBank上BLAST序列比对,显示序列与已报道序列同源性为98．55％。应用pcgene软件进行序列分析,结果表明试验克隆的启动子含有启动子所必须的所有调控元件,这与报道的序列基本一致。[结论]试验成功地克隆了CHSA启动子并将其与“F3′5′H”构建成能够在植物中进行道传转化的表达载体,为培育新型花色新品种奠定了基础。     

Application of ISSRs for cultivar identification and assessment of genetic relationships in rose

The inter-simple sequence repeat (ISSR) technique was evaluated for its applicability to cultivar identification and assessment of genetic relationships in rose. Nine ISSR primers that revealed informative patterns were selected to fingerprint (by Resophor agarose gel electrophoresis) 33 cultivars, including unrelated cultivars, sports and offspring obtained by sexual propagation from the same initial variety. A total of 159 fragments were generated using these nine primers, 149 of which (93.7%) were polymorphic. All 33 rose cultivars, except for the known colour sports, were differentiated. A Jaccard's dissimilarity coefficient matrix of the cultivars showed a low dissimilarity level between them (mean dissimilarity: 0.45). An unweighted pair group method with the arithmetic averages dendrogram and principal coordinates analysis separated them into four main groups according to their horticultural classification and pedigree. The ISSR technique is therefore a potentially useful tool for cultivar identification and assessing genetic relationships in rose because it is simple, fast, cost-effective, reliable and highly discriminating.     

VIGS实验技术体系在月季中的应用及优化

旨在月季中建立高效、快速的VIGS实验技术体系,以期能够改进VIGS技术体系在月季等木本植物表达效率低等缺陷。采用RT-PCR方法进行月季RhPDS 基因片段的克隆,在以pTRV2 为原载体,采用双酶切的方法构建了pTRV2-RhPDS 重组载体。经双酶切及测序验证后,通过电击法转化农杆菌GV3101,并分别采用高压喷枪法对月季植株进行侵染、采用真空渗透法对扦插苗以及组培苗进行侵染。采用qRT-PCR方法分析RhPDS 基因的表达。结果显示：构建的重组载体pTRV2-RhPDS,经双酶切验证,显示条带单一清晰,符合预期目标。在侵染方法和材料上,采用真空渗透法侵染组培苗是最为快速、高效的方式。该试验获得了较为高效、快速VIGS 技术体系,提高了VIGS 技术体系在月季上表达效率。     

矮溲疏组培快繁中的茎芽增殖与生根培养研究

[目的]探讨矮溲疏试管苗的茎芽增殖和生根培养技术。[方法]分别研究培养基中不同的大量元素浓度（1/4MS、1/2MS和MS）、IBA浓度（0~0.8 mg/L）和蔗糖浓度（5、10、15和30 g/L）对矮溲疏试管苗茎芽增殖和生根培养的影响。[结果]大量元素浓度为1/2MS处理的茎芽增殖系数可达3.9,与MS处理差异不明显,但在0.05水平显著高于1/4MS处理;0~0.8 mg/L IBA对矮溲疏试管苗的茎芽增殖无明显作用;蔗糖浓度为5 g/L处理的茎芽增殖系数为3.8,与10和30 g/L处理无明显差异,但在0.05水平显著高于15 g/L处理。上述处理的试管苗生根率均为100%。以土取代琼脂作培养基支撑物进行矮溲疏试管苗的生根培养,生根率可达100%,根茎比大于琼脂支撑培养对照,根毛也长于对照。[结论]该研究为矮溲疏组织培养快繁技术体系的建立奠定了基础。     

小苍兰品种花香成分分析

为研究不同品种小苍兰花香成分的差异,采用顶空-固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术,对7个品种小苍兰的花香成分进行了分析。结果表明:醇类跟烯烃类化合物是小苍兰花香成分中的主要种类,其中Rose Marie品种的主要香气成分为烯烃类化合物,其他6个品种小苍兰以醇类化合物为主要香气成分,并且以芳樟醇的贡献率最大。聚类分析显示,Rose Marie品种与White Wing、金童、曙光、香玫、紫玉和Royal Blue等品种存在较大的遗传差异。     

密花莲翘和矮溲疏耐旱性差异比较

采用盆栽试验法,研究干旱胁迫处理对密花莲翘(Forsythia europaea‘Fiesta’)和矮溲疏(Deatzia‘hybrida Boule')生长及生理特性的影响。对新梢生长量、叶片中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性等指标进行了测定分析。结果表明:干旱胁迫下,两种植物的新梢生长量均减小,密花莲翘的新梢相对生长量高于矮溲疏;随干旱胁迫程度的加重,两种植物叶片中的MDA含量逐渐上升,SOD活性则逐渐下降,POD活性呈先上升后下降的趋势,且均表现为矮溲疏的变化幅度大于密花莲翘。综合各项指标及田间表现认为,密花莲翘的耐旱性较矮溲疏强。     

不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究

为建立不同矮牵牛品种的高频再生体系,以10个矮牵牛品种为材料,研究了不同基因型、不同生长调节剂配比、不同接种方式、叶片不同部位和不同外植体对不定芽再生的影响。研究结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素之一,从10个品种中筛选获得了5个品种的高频再生体系;6-BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛不定芽再生率和平均不定芽再生数量,其中0.2 mg.L-1NAA极显著的促进了矮牵牛不定芽再生,其次是0.1 mg.L-1NAA,而高浓度NAA抑制不定芽再生;不同品种适宜的分化培养基不同,筛选获得了不同品种适宜的分化培养基;不同接种方式对不同品种不定芽再生影响不同,其中不同接种方式对黄金紫罗兰的不定芽再生有极显著影响,对黄金肉红、珊瑚红则没有影响;叶片不同部位极显著影响黄金紫罗兰星条不定芽的再生,对其它品种没有影响;叶片外植体是矮牵牛不定芽再生的最佳外植体。     

园林废弃物堆腐产品在花卉基质栽培中的应用研究

【目的】研究由广东地区园林废弃物堆腐产品组成的基质对花卉生长的影响,探讨堆腐产品作为 园林植物栽培基质的可能性。【方法】测定由不同比例堆腐物组成基质的理化性质及其对非洲凤仙和矮牵牛两 种草花生长特性的影响。【结果】园林废弃物堆腐产品组成的基质容重低、总孔隙度高、有机质和氮、磷、钾 元素含量高,其中堆腐物中的有效氮磷钾分别为 686.80、453.20、10 120.90 mg/kg,是较为理想的花卉栽培基质。 堆腐物组成的基质可促进非洲凤仙和矮牵牛根系生长,提高地上部叶片的叶绿素含量,促进叶片生长,并且促 进花枝分蘖,增加植株冠幅和株高,从而提高干鲜质量和开花数。隶属函数法分析发现,最适合非洲凤仙生长 的基质为纯堆腐物组成的基质,函数值为 0.73;最适合矮牵牛生长的基质为市售栽培基质∶堆腐物 7 ∶ 3 的基质, 其函数值达到 0.97。【结论】园林废弃物堆腐产品组成的基质可作为非洲凤仙和矮牵牛两种草花的栽培基质组分。