苹果子叶愈伤组织的诱导及植株再生的研究

试验用6个苹果品种的子叶作外植体,比较了不同激素配比对诱导愈伤组织的作用以及对进一步分化的影响.试验表明用2,4-D 作为苹果子叶去分化的激素是有效的,但影响再分化.当2,4-D 与 KT 等配合使用可以提高愈伤组织的诱导率,但其愈伤组织进一步分化同样很难,苹果子叶对 NAA 极为敏感,但高浓度的 NAA 同样会抑制芽的分化.当低浓度的 NAA 与KT 配合能100%的诱导出愈伤组织,同时有不定芽的分化;而用6BA 与低浓度 NAA 配合,所诱导的愈伤组织具有更强的分化能力,能在短期内形成大量的不定芽,通过生根培养获得再生植株.     

藜蒿离体培养再生体系的建立

采用植物组织培养技术,可以诱导藜蒿的幼叶和茎段产生愈伤组织和植株。以藜蒿幼叶、茎段为外植体,探索建立再生体系的最适条件和方法。研究表明:用70%酒精先消毒5 s,再用0.1%升汞消毒8 min,其消毒效果最好;MS+6-BA(1 mg/L)+2,4-D(4 mg/L)培养基适宜最适诱导藜蒿茎叶形成愈伤组织,MS+6-BA(4 mg/L)+NAA(0.4 mg/L)继代培养基最适诱导叶丛芽分化,而1/2 MS+NAA(0.5mg/L)+IAA(0.5 mg/L)为丛生菌生根最适培养基。     

化学杂交剂SX-1对不同生态区甘蓝型油菜的杀雄效果

【目的】研究在不同生态区化学杂交剂SX-1对甘蓝型油菜的杀雄效果。【方法】在冬油菜区和春油菜区分别采用4个不同质量浓度的化学杂交剂SX-1,对YD66A和Cn10 2个甘蓝型油菜品种(系)进行2次喷施杀雄处理,第1次喷施在油菜最大花蕾的花粉母细胞进入单核期时进行,第2次喷施在第1次喷施后10～15d内进行,以喷施等量清水为对照,研究在不同生态区喷施SX-1的杀雄效果,并探讨其对油菜生长发育、农艺性状和产量的影响。【结果】冬油菜区A2(6.0mg/L+7.0mg/L)和春油菜区B2(6.5mg/L+7.0mg/L)处理的YD66A和Cn10的全不育株率分别为:98.11%,100%和100%,100%,且无药害反应,植株叶色变浅,茎杆微紫,生长轻微受到抑制,株高和主花序长度有所降低,单株角果数和单株产量略有增加。【结论】SX-1在冬油菜区以质量浓度6.0mg/L+7.0mg/L,在春油菜区以6.5mg/L+7mg/L,分别在油菜最大花蕾的花粉母细胞进入单核期时进行首次喷施,首次喷施后10～15d进行第2次喷施,均可获得较好的杀雄效果。     

陆地棉品种在体细胞培养中愈伤组织褐化的生化基础研究

对陆地棉品种713、百棉1号、百棉3号的115d正常愈伤组织与褐化愈伤组织的可溶性蛋白、SOD酶、CAT酶、IAA氧化酶、PPO酶及棉酚的测定结果表明,愈伤组织褐化与PPO的活性和棉酚的含量有关,褐化导致了SOD酶、IAA氧化酶和CAT酶活性的降低及蛋白合成的减少。     

大穗黑麦草成熟种子愈伤组织诱导及分化的研究

以大穗黑麦草成熟种子为外植体 ,采用MS基本培养基 ,研究了不同浓度的 2 ,4-D和 6-BA及其组合对其愈伤组织诱导的影响 ,不同浓度的NAA和 6-BA组合对愈伤组织分化成苗的影响。结果表明 :不同浓度 2 ,4-D对大穗黑麦草愈伤组织诱导率差异显著 ,以 7mg/L效果最好 ,浓度过高 ,愈伤组织诱导率下降 ;在 0～ 1 .0mg/L范围内 ,6-BA浓度越高 ,愈伤组织诱导率越高 ,但长势渐差 ;2 ,4-D + 6-BA的不同配比浓度的愈伤组织诱导率存在差异 ,以MS + 7mg/L 2 ,4-D + 0mg/L 6-BA的组合为最优 ,产生的愈伤组织数量多、质量好 ;NAA+ 6-BA不同配比浓度的愈伤组织分化率存在一定差异 ,以MS +NAA 0 .5mg/L + 6-BA 1mg/L的愈伤组织分化率最高。初步建立了一个以大穗黑麦草成熟种子为外植体的愈伤组织诱导及分化体系     

彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。     

外源脯氨酸对盐胁迫下大豆愈伤组织蛋白质含量的影响

大豆小真叶愈伤组织分别在NaCl浓度为 0 % (CK)、 0 4 %、 0 8%、 1 2 %、 1 6 %及在各盐浓度中加脯氨酸(0 8mmol/L)的培养基中分别进行 2 4、 4 8、 72h培养 ,测定其可溶性蛋白质含量的变化。结果表明 ,愈伤组织在0 4 %、 0 8%、 1 2 %的不同盐浓度培养条件下 ,蛋白质含量都比对照增高 ,并有随培养时间延长而增加的趋势。外源脯氨酸可提高盐胁迫下大豆愈伤组织的蛋白质含量 ,盐浓度 0 4 %培养 2 4h最明显 ,盐浓度增至 0 8%和 1 2 % ,产生此作用的培养时间相应延长 ,效果相应减弱。     

不同小麦品种成熟胚愈伤组织的培养研究

[目的]通过对河北省小麦品种的种子进行组织培养,探索适合河北省栽培小麦品种的培养条件,为河北省小麦的遗传改良工作奠定基础。[方法]对4种不同小麦品种的成熟胚进行离体培养,研究影响小麦愈伤组织诱导的因素。[结果]结果表明:将成熟胚盾片向上放置可明显提高愈伤组织的诱导率;利用2 mg/L 2,4-D并添加水解酪蛋白,可使不同品种小麦愈伤组织得出愈率均高达80%;此外,不同品种的出愈率随着2,4-D浓度的升高存在较大差别。[结论]该研究探索影响小麦成熟胚愈伤组织诱导的因素,建立一套合适的植株再生体系,为加强我国小麦的遗传转化奠定了基础。     

国槐植株再生技术研究

[目的]筛选国槐组织培养的最佳培养基,建立国槐植株再生体系。[方法]将灭过菌的国槐种子分别接种到4种无菌苗诱导培养基上,待苗长出2～4片真叶时,将叶、下胚轴、子叶分别接种于4种愈伤组织诱导培养基上,然后将子叶产生的愈伤组织分别接种在2种芽分化培养基中,再将继代培养获得的有效苗转入生根培养基,对国槐种子进行无菌苗萌发和植株再生的研究。[结果]培养基的激素配比对种子萌发的影响不大;6-BA能促进愈伤组织的产生;最适宜的胚状体诱导培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.5mg/LKT;芽诱导培养基MS+6-1.0mg/LBA+0.1mg/LNAA;生根培养基为1/2MS+0.3mg/LNAA,活性炭不利于国槐的生根培养。[结论]种子的萌发率与国槐的种子质量有关,与培养基的种类关系不大。子叶最适合诱导愈伤组织。     

农杆菌介导胡萝卜转化体系的诱导培养基优化

高频再生系统是外源基因成功转化的先决条件,但再生系统不等同于转化系统。为提高农杆菌共培养后胡萝卜的再生频率,以日本新黑田五寸参和林丰改良五寸参2个品种胡萝卜下胚轴为外植体,利用农杆菌介导法将人源白细胞介素-2基因(IL-2)导入其中,探讨了共培养后诱导培养基中激素浓度和筛选剂对再生的影响。结果显示:不同基因型胡萝卜的分化对激素浓度的反应不同,林丰改良五寸参在3种培养基上的胚性愈伤率差异不显著;日本新黑田五寸参胚性愈伤率和每个外植体分化的抗性株数随激素浓度的提高而呈上升趋势,2,4-D和6-BA浓度为1.0mg/L时胚性愈伤率和每个外植体分化的抗性株数最高,分别为87.50%和59株;日本新黑田五寸参以bar基因为标记基因、PPT作筛选剂时,分化较好。因此,遗传转化过程中,为提高共培养后胡萝卜胚状体的分化率,对共培养后的诱导培养基进行再优化是必要的。