鸡Bcl-2基因的克隆及其对卵泡颗粒细胞凋亡的影响

将鸡的 Bcl- 2基因克隆到真核表达载体 JL V中 ,构建了重组质粒 JL VB。 0 .2μg/孔 JL VB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞 ,应用流式细胞术等方法分析了转染 Bcl- 2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比 ,转染后的传代细胞分裂速度较快 (P<0 .0 1) ,凋亡比率较低 ,G2 / M S期细胞比例极显著高于对照组 (P<0 .0 1)。这些结果表明 ,Bcl- 2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用 ,这种作用是直接的。在转染时间为 12 h、DNA量为 0 .3μg/孔的条件下 ,较好的脂质体介导用量为 1.2 μL/孔。     

猪粪中除臭微生物的筛选和鉴定

用感官法初筛出20株菌株,再通过定性复筛试验,最后从猪粪便中共分离出5株除臭微生物,都具有很强的除臭效果,其中假单孢菌属(ZY-1)氨气的去除率高达47.70%,巴氏芽孢杆菌(WJ-2)硫化氢的去除率高达62.5%,显示出这类细菌在猪场粪便的处理过程中具有良好的应用前景。     

２，４-二叔丁基苯酚对啤酒花幼苗生长与光合特性的影响

前期对不同植龄啤酒花根系分泌物及根际土壤的化学物质进行了分离鉴定,结果发现有酚类物质的存在且２,４-二叔丁基苯酚含量较高,为了进一步证实啤酒花是否存在自毒作用,采用田间小区栽培试验,研究了不同用量［０（ＣＫ,Ａ０）,７．５（Ａ１）,１５．０（Ａ２）和２２．５ｍｍｏｌ／ｍ２（Ａ３）］２,４-二叔丁基苯酚处理对啤酒花幼苗生长及光合特性的影响。结果表明,２,４-二叔丁基苯酚用量Ａ１ 和Ａ２ 处理,啤酒花生长好,地上部、地下部、总生物量及日均光合速率均比对照高,且达到显著差异（犘＜０．０５）;２,４-二叔丁基苯酚用量Ａ３ 处理,啤酒花地上部、地下部和总生物量及光合特性均较对照降低,差异达到显著水平（犘＜０．０５）。啤酒花幼苗叶片光合速率日变化呈双峰型,最高峰出现在上午９：００左右,次高峰出现在中午１５：００左右,午间有明显的“午休“现象,与对照（Ａ０）相比,Ａ１、Ａ２、Ａ３ 三个处理的次高峰出现的时间均有推迟,且Ａ１ 和Ａ２ 处理的幼苗午休”现象不太明显,气孔因素是导致其“午休”的主要原因。     

黄河源区“黑土滩”退化草地CO2排放研究

采用静态箱-气相色谱法,对黄河源区“黑土滩”退化草地CO2释放特征的研究结果表明：“黑土滩”3种不同处理：“黑土滩”植被-土壤系统呼吸（BC）,土壤呼吸（BJ）和土壤微生物呼吸（BL）的CO2释放速率日变化具有相似性,均呈现出明显的单峰型特点,且白天大于夜间;CO2释放速率季节动态变化明显,且3者的变化趋势基本一致;“黑土滩”植被-土壤系统呼吸与地表温度及5cm地温呈极显著的正相关性（P〈0．01）;而土壤微生物呼吸与0～10cm土壤水分含量相关显著（P〈0．05）。     

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

用PCV2 Cap蛋白单克隆抗体预包被酶标板,将杆状病毒表达系统表达的PCV2 Cap蛋白作为检测用抗原,利用捕获包被法建立了间接ELISA法用于猪圆环病毒2型抗体的检测.通过优化ELISA条件,研制试剂盒并应用于圆环病毒2型疫苗的免疫效果检验.利用研制的试剂盒与IFA、商品化进口和国产同类试剂盒对178份猪血清进行平行检测,总符合率分别为96.63％、97.75％和84.27％,与其他几种常见猪病毒抗体阳性血清无交叉反应.试剂盒批内、批间变异系数分别为2.35％ ～4.06％和4.87％ ～ 6.54％,2～8℃保存15个月稳定,适合于对不同来源猪圆环病毒2型疫苗人工免疫猪血清抗体进行检测.     

梅花鹿成纤维细胞因子受体2基因多态性及其与茸重性状的关联分析

【目的】探索梅花鹿成纤维细胞因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)基因多态性及其对茸重性状的影响。【方法】应用直接测序法对梅花鹿FGFR2基因的全部外显子进行测序分析,通过MassARRAY^® SNP分型技术对314头24月龄梅花鹿进行基因分型和单倍型分析,分析FGFR2基因不同基因型和单倍型与茸重的关联性。【结果】在梅花鹿FGFR2基因中共发现12个多态性位点,其中5个位于外显子区域,且突变均未引起氨基酸改变,属于同义突变,其余7个位点均存在于内含子区域。分型结果显示,g.80975864 T>G位点未分型成功,后续对其余11个位点进行了分析,g.80943673 T>C、g.80943683 C>A及g.80938352 C>T 3个位点属于中度多态位点(0.25＜P＜0.5),其余位点均属于低度多态位点(P＜0.25)。χ²检验结果表明,g.80998742 G>A和g.80987708 G>A 2个位点偏离Hardy-Weinberg平衡(P＜0.05),其他9个位点均处于Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。关联分析结果表明,11个多态性位点各基因型之间的茸重差异均不显著(P＞0.05)。单倍型结果显示,FGFR2基因存在5种单倍型,不同单倍型间梅花鹿茸重差异均不显著(P＞0.05)。【结论】FGFR2基因的11个突变位点可能不是影响梅花鹿茸重性状的关键位点。     

不同蛋白源饲粮下断奶仔猪小肠中增食欲素受体2的表达特征

为探讨不同蛋白源饲粮对断奶仔猪小肠中增食欲素受体2（HCRTR2）的表达特征,研究采用实时荧光定量PCR方法检测HCRTR2的mRNA在断奶后分别饲喂动物蛋白替代30％总蛋白饲粮（处理1）及全植物性蛋白饲粮（处理2）0、3、7、14日龄大约克猪空肠中的表达特征。结果表明,不同蛋白源饲粮对日CR豫2基因mRNA的表达均有影响;与断奶0日龄相比．在处理1中,断奶3、7和14日龄时,HCRTR2的表达分别上升了4.30、6．60和4．12倍;处理2中,断奶3、7、14日龄HCRTR2基因mRNA的表达量分别为断奶0日龄时的0．71、1．44和4．50倍。结论：不同蛋白源饲粮对HCRTR2基因mRNA的表达均有影响。     

2008～2011年中国部分地区猪圆环病毒2型的分子流行病学调查

为了解2008~2011年中国部分地区猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)分子流行病学变化趋势,本实验室共采集福建省、江西省、广东省、安徽省、浙江省、河南省、河北省、广西壮族自治区、内蒙古自治区、上海市、江苏省和山西省共12个省(市、区)的健康猪群和发病猪群共452份样品,对其进行病原学检测,并通过扩增、克隆和测序共获得31株PCV2 ORF2基因编码序列。结果显示,452份样品中,有354份样品检测为PCV2阳性,感染率高达78.3%。对31株ORF2基因序列的分析和比对结果表明,31株PCV2均为PCV2b基因型,其中有21株归类于PCV1A/1B基因亚群,而10株为PCV1C亚群;对31株PCV2 ORF2编码氨基酸序列比对分析表明PCV2基因亚型具有其特异的氨基酸变异位点,这对于临床上区别PCV2亚型具有一定的指导意义。从基因水平上来说,自2008年以来中国以PCV 1A/1B亚群为主要流行致病株,但值得我们关注的是,PCV 1C亚群毒株从无到有并有逐渐增多的趋势,将来可能在PCV2的流行毒株中占据主要地位。     

基于畜禽粪便养分含量的畜禽承载力研究

为了减少畜禽养殖带来的环境污染,许多发达国家规定畜牧场周围必须配备农田来消纳畜禽粪便,同时也有成熟的畜禽承载力的研究方法。根据我国区域养殖畜种较多、农田分散、农牧脱节等情况,本研究确定了适合我国国情的用特定地理区域范围消纳畜禽粪便氮(N)、磷(P2O5)能力的方法来确定畜禽承载力。本研究根据不同畜种平均每头(只)存栏动物每年的粪便养分产生量、每公顷作物每年的养分移走量,计算出每公顷大田作物地、蔬菜地和园地每季所能承载的各种畜禽数量,然后根据各地区的复种指数估算出作物地每年承载的畜禽数量。结果表明:牛、羊的年产粪便N/P2O5较大,禽类比值较小,其他畜种比值居中;蔬菜地可以承载的畜禽数量最多,大田作物地次之,园地承载的最少;以N作为承载标准时,农用地所承载的畜禽数量比以P2O5作为标准时多(最高为6.6倍)或者两者持平。可以根据区域需要,通过提高作物对肥料的利用率、调整化肥与粪肥用量、调整种植结构等方式改变畜禽承载力的大小。     

猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析

根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物,对我们分离鉴定的2005四川分离株进行毒力因子检测,并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板,获得了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)的2个片段,以及SLY的长度为1502bp目的片段(外引物)和1443bp的目的片段(内引物)。说明分离株SSsc0501为MRP+EF+SLY+,属于具有3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析,结果其与P1/7株的核苷酸序列完全一致,与1933株的同源性达99.7%,仅在128位、217位、744位、1380位、1386位的5个核苷酸发生突变。在氨基酸水平上SSsc0501株与1933株的同源性达99.6%,有2个氨基酸发生替代。