光肩星天牛幼虫感染绿僵菌后血淋巴中游离氨基酸含量的变化

采用高效液相色谱法测定了感染绿僵菌Metarhizium anisopliae后光肩星天牛Anoplophora glabripennis幼虫血淋巴中游离氨基酸的含量。结果表明,光肩星天牛幼虫血淋巴中共检测出 17种游离氨基酸,感染绿僵菌后不同时段,游离氨基酸总量呈现先下降后上升的变化趋势。感染24 ~72 h时,幼虫血淋巴中游离氨基酸总量与对照组相比均呈小幅下降趋势,各时间点氨基酸总量互有高低,但相差不大;感染72 h后至120 h时,游离氨基酸总量明显下降,120 h时降到最低值1 042.33 mg/100 mL;之后急剧上升,144和168 h时分别为120 h时的1.44和1.51倍。赖氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、酪氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、组氨酸、亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蛋氨酸含量的变化与游离氨基酸总量的变化趋势大体一致;而脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸的含量呈波动变化。     

星天牛转录组及三大解毒酶家族相关基因系统发育分析

【目的】研究星天牛转录组信息及体内细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,CYP)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)三大解毒酶系的表达谱情况,通过构建系统进化树,探析其这3种酶系基因家族的类别及其系统演化关系,为星天牛对多寄主种类的适应性与杀虫剂的抗药性机制研究提供依据。【方法】采用新一代高通量测序技术Illumina HiSeq TM 2500 对星天牛进行转录组测序与数据分析,通过数据筛选并进一步与鞘翅目近缘物种的解毒酶同源蛋白进行系统发育分析。【结果】经测序、序列拼接得到55 260条unigenes,将其与公共数据库进行同源比对,注释了32 247条unigenes,在Swiss-Prot数据库注释的unigenes的数量最多(99.11%);注释到Nr数据库时与赤拟谷盗的unigenes同源性最高(60.25%);在GO数据库中,共有8 083个unigenes被成功注释,根据其功能大致可分为3 类47 亚类;在KEGG数据库中,4 600 条unigenes与162个预测路径可以匹配。通过基因注释发现248条解毒酶系基因在星天牛体内表达,包括139条CYP基因、72条CarE基因、37条GST基因。系统发育分析发现,星天牛的大部分CYP基因都至少与一种鞘翅目近缘物种的CYP基因聚类在一起,P450基因中的CYP6家族数量与其他近缘物种(鞘翅目)类似,包含的基因数量最多;CarE解毒酶蛋白基因主要为β-酯酶、神经趋化蛋白、外源性代谢酶、未知等4种类型,分别可能参与星天牛的一些激素以及信息素的加工、神经和发育过程、消化与解毒等生理过程;星天牛的GST基因聚类主要包含Microsomal GST、Sigma GST、Omega GST、Delta GST、Theta GST等亚家族,具有保护生物大分子免受氧化损伤、催化活力等功能。【结论】本研究获得星天牛的转录组信息,初步探明星天牛体内三大解毒酶系的表达谱及分化情况,可为星天牛对多寄主种类的适应性与杀虫剂抗药性的产生及遗传机制研究提供基础数据和参考。     

几种药剂对苗木中星天牛幼虫毒杀效果初探

试验选用25 g/L溴氰菊酯、40%氧乐果乳油、啶虫脒、40%辛硫磷、80%敌敌畏乳油、茶皂素、10%吡虫啉可湿性粉剂、45%杀螟硫磷等药剂对星天牛幼虫进行浸泡处理,并研究了部分药剂的混配浸泡效果,得出结果:溴氰菊酯500倍、溴氰菊酯500倍+啶虫脒500倍、辛硫磷500倍+敌敌畏500倍处理星天牛幼虫15 min,4d后幼虫死亡率达到100%。在对红枫嫁接苗中星天牛幼虫的药剂浸泡试验中,溴氰菊酯500倍处理在浸泡48 h、辛硫磷500倍+敌敌畏500倍处理在浸泡36 h都可完全杀死星天牛幼虫。     

硫酰氟对杨树包装材料中光肩星天牛幼虫的毒力测定

硫酰氟熏蒸木质包装材料中光肩星天牛(Anoplophora glabripennis Motsch.)幼虫的毒力试验表明,中毒天牛幼虫经过14天的人工饲养后,"垂死幼虫"全部死亡,存活幼虫死亡率约为10%左右;毒力分析结果显示:在4.4℃、10.0℃、15.5℃和21.1℃条件下熏蒸24h,达到LD99.9968要求的预期CT值分别为6183.5、3242.7、1019.1和692.6mg.h/L,在木材装载量为25%左右的情况下,致死剂量分别为309.5、217.0、87.8和75.7mg/L.     

黄斑星天牛溴甲烷检疫熏蒸技术研究

对杨树木质包装溴甲烷熏蒸试验结果进行机率值法分析，推算出溴甲烷在4.4℃、10.0℃、15.5℃和21.1℃温度条件下达到黄斑星天牛（Anoplophora nobilis）幼虫死亡机率值9要求的CT值分别为：1133.78、938.21、642.39和349.87g.h/m^3；根据毒力试验结果进行的室内验证试验证明：在上述4个温度条件下，只要熏蒸中CT值达到了毒力测定的要求，就能够完全杀灭杨树携带的光肩星天牛（A.glabripennis）和黄斑星天牛幼虫、蛹，以及芳香木蠹蛾东方亚种（Cossus cossus orientalis）和杨干透翅蛾（Sphecia siningensis）幼虫。在此基础上，提出了木质包装溴甲烷检疫熏蒸处理的技术指标。     

椴树科树种抑虫机制的研究

通过调查研究发现 ,在不同立地条件下 ,光肩星天牛 ( Anolophora glabripennis)在椴树上卵的孵化率不尽相同 ,它与椴树韧皮部厚度、刻槽大小、卵的位置及生长速度没有直接的关系。椴树枝干的内含物直接影响着天牛幼虫的发育和存活     

基于植物代谢组学和昆虫肠道细菌分析光肩星天牛的寄主适应性

为探究光肩星天牛Anoplophora glabripennis对传统抗性树种白蜡的适应性机制,利用代谢组学分析不同白蜡品种木质部次生代谢产物,利用16S rRNA测序技术对取食白蜡后的光肩星天牛肠道细菌群落组成进行检测,并采用Pearson方法分析两者的相关性。结果表明,在洋白蜡Fraxinuspennsylvanica和中国白蜡F. chinensis木质部中共筛选出27类抗虫性差异代谢产物,其中黄酮苷、双黄酮及多黄酮、简单酚类、香豆素及其衍生物和木质素苷在中国白蜡中含量较丰富;而2-芳基苯并呋喃类黄酮、阿朴啡类、麦角林及其衍生物和有机氮化合物在洋白蜡中占优。光肩星天牛取食洋白蜡和中国白蜡2种寄主后肠道细菌群落组成存在明显差异,优势菌门分别为变形菌门和厚壁菌门;优势菌属分别为拉乌尔菌属Raoultella（55.79%）和乳球菌属Lactococcus（57.52%）;筛选到21个差异菌属,其中13个菌属在中国白蜡中的相对丰度显著高于洋白蜡。相关性分析结果表明,尽管类黄酮、简单酚类、香豆素及其衍生物和木质素苷等酚类化合物在中国白蜡中含量更高,但取食中国白蜡后光肩星天牛肠道内一方面存在优势菌群参与代谢上述物质,如肠球菌属Enterococcus、拉乌尔菌属对类黄酮和木质素苷的代谢;另一方面中国白蜡通过一些特异菌属和共有菌属的增殖参与代谢,如乳杆菌属Lacto-bacillus和放线菌属Actinomycetes对类黄酮、乳球菌属对简单酚类、鞘氨醇杆菌属 Sphingobacterium对香豆素及其衍生物、放线菌属和肠球菌属对木质素苷的代谢。生物碱在中国白蜡中的含量低于洋白蜡,未发现特殊菌属降解该类物质。推测相对于洋白蜡,取食中国白蜡后光肩星天牛肠道菌群更具特异性和多样化,可以帮助光肩星天牛快速代谢相关次生物质,顺利完成其在中国白蜡上的生活史。     

杨树人工接虫方法的研究

１９９５￣１９９６年,对美洲黑杨树上套笼接虫,室内离体接虫和网室接虫三种人工接光肩星天牛成虫的方法进行了研究,利用天牛刻槽数对这三种方法进行了比较和评价。结果表明,天牛刻槽产卵与杨树的抗虫性无关,可用来进行人工接虫方法的比较,孵化幼虫数和越冬后存活幼虫数是评价杨树抗虫性大小的标准。树上套笼接虫不受树木的胸径大小影响,成本较低,能够早期鉴定林木抗虫性,是一套经济,有效,科学的杨树人工接虫方法。     

沈阳城市绿地有害生物风险分析体系的构建及应用

以多指标综合评价体系为基础,结合沈阳市绿地生态系统的特点及有害生物的危害过程,确立了评估指标及相关的计算方法,构建了沈阳市绿地有害生物风险分析体系。利用该体系对光肩星天牛(Anoplopho-ra glabripennis)进行了风险分析。结果表明:光肩星天牛的风险值为1.5,是对沈阳市绿地具有中度危险的有害生物。结合沈阳市光肩星天牛的实际发生情况证明该体系是评估沈阳市绿地有害生物风险的一种有效方法。