肠出血性大肠杆菌O157:H7抗原基因及毒力基因多重荧光定量PCR检测方法的建立

根据Gen Bank公布的大肠杆菌O157:H7的菌体抗原基因rfb E、鞭毛抗原基因fli C、溶血素基因hly A、紧密黏附素基因eae A和志贺样毒素基因stx1和stx2的序列,同源性比较后选择保守序列分别设计6对特异性的引物及相应的Taqman探针,rfb E/eae A、Stx1/hly A、fli C/Stx2探针5'端分别标记为FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3'端均标记为BHQ1荧光淬灭基团。通过优化反应体系和程序,建立2个能够快速、特异性地检测大肠杆菌O157:H7及其4个主要毒力基因的三重荧光定量PCR方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、rfb E、fli C、eae A、hly A、stx2的最低检测限分别为20、30、20、20、30和40拷贝数/μL;特异性试验证明,该菌与其他菌种无交叉反应;重复性好,变异系数均小于2%;检测过程耗时约1 h。将建立的荧光定量PCR体系应用到人工染菌模拟猪肉样品试验中,未富集或富集8 h后测得大肠杆菌O157:H7的最低检出限分别为200 cfu/m L与1 cfu/m L。以上结果表明,本试验所建立的三重荧光定量PCR方法的敏感性、重复性及特异性均较好,可作为同时快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7及其毒力基因的方法。     

不同佐剂和免疫途径对柔嫩艾美耳球虫SO7抗原免疫保护效果的影响

利用PGEX-6P-1融合表达系统将SO7基因在大肠杆菌中进行融合表达,对表达产物进行初步纯化和复性,制备免疫原。分别使用不同剂量的人参总皂甙和重组γ-干扰素以及弗氏完全佐剂作为免疫佐剂,于5日龄、12日龄和19日龄对雏鸡进行3次免疫,同时设立蛋白口服免疫组、蛋白皮下注射免疫组、卵囊口服免疫组、未免疫未攻毒组和未免疫攻毒组作对照,于26日龄用105个柔嫩艾美耳球虫卵囊进行攻毒,8d后扑杀,对各组的存活率、相对增重率、病变减少率、相对卵囊产量和抗球虫指数ACI等指标进行统计分析,比较免疫保护效果。与非免疫攻毒组以及不加佐剂的免疫攻毒组相比,佐剂使用后各组的增重、病变记分、相对卵囊产量、ACI等指标均有一定的改善,对柔嫩艾美耳球虫的人工感染可以提供部分保护。3种佐剂中,γ-干扰素和人参总皂甙能增强重组蛋白的免疫保护效果,且佐剂的剂量对免疫保护的效果有一定的影响,以5000Uγ-干扰素效果最佳,效果与E.tenella活卵囊免疫相当,弗氏完全佐剂的免疫增强效果不明显。单独使用重组蛋白皮下注射或口服免疫,虽有一定的保护作用,但不明显。一定剂量的γ-干扰素对SO7抗原的免疫保护效果起明显的增强作用,是一个具有很好临床应用前景的新型佐剂。     

VFP6.0中查询表单的开发研究

科研成果查询表单在设计中充分利用了VFP6.0可视化和面向对象编程的优势，查询表单的最终界面友好，具有良好的交互性、查询功能强大，查询结果具有多种输出方式，充分满足了用户的需要。     

具有脉冲的非自治多种群Lotka—Volterra竞争系统的周期性

研究了一类具有脉冲和时滞的非自治n种群Lotka．Volterra竞争系统,利用重合度理论中的延拓定理,获得了保证系统正周期解存在的充分条件,揭示了当非自治n种群的出生率与投放率足够大或者种群内部竞争率足够小时,系统将产生生物性周期振荡现象．     

GA4+7+氯吡脲对重瓣百合'Thalita'生长的影响

以重瓣百合'Thalita'为试材,采用4个不同浓度(10、20、40、80 mg·L-1)的GA4+7+氯吡脲(1∶1),对其进行叶面喷施处理,以清水为对照,测定其株高、茎粗、叶面积等指标,探讨GA4+7+氯吡脲对重瓣百合'Thalita'生长的影响,以期为其推广提供参考.结果 表明:20 mg·L-1 GA4+7+氯吡脲对'Thalita'花苞直径和叶面积促进作用最大,分别比对照高14.18％和55.13％,均达显著差异;茎粗随着GA4+7+氯吡脲的浓度升高表现出一定抑制作用;20 mg·L-1GA4+7+氯吡脲在花苞开放率和花期上综合效果最好;80 mg·L-1 GA4+7+氯吡脲对'Thalita'株高促进效果最好,比对照高2.67％;所有处理组种球鲜质量和根长均比对照低,其中20 mg·L-1 GA4+7+氯吡脲效果最为明显,分别比对照低36.77％和48.18％,均达显著差异.综合比较来看,20 mg·L-1 GA4+7+氯吡脲对重瓣百合'Thalita'生长影响最大,效果更佳.     

microRNA let-7调控动物个体发育的研究进展

microRNA(miRNA)是一类广泛存在于多细胞动物中的进化保守的大小为18~25nt的非编码小分子RNA,可以通过与靶基因mRNA的非编码区(3′UTR)结合导致mRNA降解,或阻断mRNA翻译而调节基因表达。let-7是在线虫中发现的具有转录后调节功能的小分子RNA,具有高度的保守性,研究发现,let-7参与动物个体多个器官组织的发育过程。作者综述了近年来let-7参与调控脑、神经系统、心肺系统和肌肉发育等组织器官的研究成果,初步阐述了let-7调控组织器官发育的作用机制,以期为进一步探索let-7在动物体内的功能奠定基础。     

4%喷特EC防除油菜田杂草试验

试验结果表明：４％喷特防除油菜田看麦娘的效果较为理想，对阔叶杂草近乎无效。     

三种杀真菌剂对金龟子绿僵菌产孢及生长的影响

三种杀真菌剂在一定浓度范围为（氯硝胺在１００×１０￣（－６），孟加拉红在５００×１０￣（－６）和柯赛得在２０００×１０￣（－６）内）对金龟子绿僵菌的菌落形成没有明显影响，而柯赛得（含５０％氢氧化铜）和孟加拉红分别在１００×１０￣（－６）和５００×１０￣（－６）浓度时显著地增加金龟子绿僵菌的产孢量，柯赛得还具有缩短产孢时间的作用。氯硝胺在１～１００×１０￣（－６）浓度范围内，随着浓度增加，对产孢能力和菌落大小的抑制作用加强。柯赛得和孟加拉红随浓度的增加对菌落的抑制作用也有所加强，但没有像氯硝胺的抑制作用那么强。     

结球莴苣对氮磷钾肥需求特点

结球莴苣为绿叶蔬菜,但由于其结球特性决定了其生长发育与一般绿叶菜有许多不同之处。本试验着重研究了其对主要营养元素的需要特点,为大面积结球莴苣栽培提供参考。结果表明：ＰＫ肥对结球莴苣的生育期、营养生长、同化物积累及产量形成具有重要的促进作用,与对照相比,可使结球期提早３天,产量提高４１．５～４８．０％,在ＰＫ基础上加施Ｎ肥不会出现徒长且对干物质积累及产量的提高有加成作用。综合产量及品质性状,结球莴苣前期控制氮肥施入,且施氮磷钾全肥。