一株盐芽孢杆菌的筛选及其粗酶的酶学特性研究

从浙江舟山市双峰盐场中筛选出一株分泌蛋白酶的嗜盐菌,结合16S rDNA基因序列鉴定、菌株形貌特征确定其为特氏盐芽孢杆菌(Halobacillustrueperi)命名为HalobacillustrueperiB1。经研究,该菌株最适生长NaCl浓度为5%,表明其为中度嗜盐菌。该蛋白酶在50℃和pH 7.5条件下具有最高的蛋白酶活力。对发酵培养时间的优化实验表明发酵8 h后B1分泌的蛋白酶活力最大。对发酵培养基的优化结果表明,脱脂奶粉为最适氮源和碳源;75 g·L~(-1)为最佳发酵盐浓度,对钙镁离子的依赖不明显。确定优化后的发酵培养基:Na HCO_30.06 g,KCl_2.0g,CaCl_2·2H_2O0.48 g,Mg SO_4·7H_2O 1.0 g,FeCl_3 0.001 g,NaCl 75.0 g,脱脂奶粉10.0 g。在初始pH 7.5,温度为40℃条件下发酵8 h。     

海南甘薯主栽品种再生体系的优化

本研究以海南甘薯主栽品种‘心香’、‘广薯87’、‘川山紫’、‘宁紫薯1号’、‘薯绿一号’、‘高系14’和‘三角宁’为材料,从外植体的选择、不同消毒方案、培养基配方和防褐化剂筛选等方面进行研究,建立一套适合热带地区甘薯主栽品种的脱毒快繁优化再生体系。结果表明：侧芽增殖率与存活率最高;在不同的外植体消毒处理中,依次用75%酒精消毒60 s,2% NaClO消毒15 min,以及0.1% HgCl₂消毒15 min的污染率最低;最佳的生根培养基配方为：MS+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L GA₃;茎长生长最快的培养基配方为：MS+0.1 mg/L NAA+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA₃;干重增长最快的培养基配方为：MS+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA₃;在培养基中加入5~6 g/L硫代硫酸钠和1.25 g/L聚乙烯吡咯烷酮能有效地抑制外植体的褐变。     

诱导培养基对水稻胚愈伤组织形成和分化的影响

将10个籼稻品种(系)的胚分别接种于附加2,4-D(2mg/l)的4种诱导培养基上,研究其对盾片愈伤组织形成和绿苗再生的影响。结果表明:(1)10个品种(系)的盾片愈伤组织的开始形成时间,形成高峰和频率差异显著,但同一品种对不同培养基的反应差异不明显。(2)在绿苗再生率方面,各品种对4种培养基的反应不同,培养基相同,不同品种间愈伤组织再生绿苗频率存在显著差异。总之,不同基因型的水稻,其盾片愈伤组织的诱导与绿苗再生需要采用不同的培养基,才能获得理想的结果。     

蔗渣作蔬菜工厂化育苗基质的生物处理与施肥措施研究

本研究通过堆沤和增施氮肥处理，可使蔗渣成为育苗效果与泥炭相当的蔬菜工厂化育苗基质。研究结果表明，经３，６，９个月堆沤的蔗渣在施基本氮（１．０ｇＮＨ４ＮＯ３／Ｌ）时分别增施２．０，１．５和１．０ｇＮＨ４ＮＯ３／Ｌ，其效果与泥炭相当，而堆沤１２个月蔗渣施基本氮即可与泥炭的效果相当。在堆沤时适当增大堆体体积有利于促进蔗渣的使用效果；若堆沤时每１００ｋｇ蔗渣加入０．５ｋｇ尿素堆沤２个月，在使用时追施基本氮     

不同培养料栽培对虎奶菇菌核营养价值以及重金属含量的影响

以豆科牧草圆叶决明料、木屑料、棉籽壳料以及木屑 棉籽壳料栽培虎奶菇,研究不同培养料对虎奶菇菌核营养价值以及重金属含量的影响,以明确牧草作为培养料栽培虎奶菇的可行性及其重要意义。结果表明,圆叶决明培养料栽培的虎奶菇菌核中多不饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量最高,分别为53.6%和55.4%,依次比木屑料、木屑 棉籽壳料、棉籽壳料高16.8%、12.6%、55.0%和5.1%、10.8%、4.1%。木屑料、圆叶决明料、木屑 棉籽壳料、棉籽壳料栽培的虎奶菇菌核中所含3种重金属(Hg、As、Cd)量均达到国家卫生指标要求,其中豆科牧草圆叶决明料栽培的虎奶菇菌核中Hg、Pb含量最低,仅0.083和0.001mg·kg-1。4种培养料栽培的虎奶菇菌核中P、K、Ca、Mg、Na以及微量元素和氨基酸含量有所不同,但其蛋白质营养价值综合评价的位次为:木屑 棉子壳料>圆叶决明料>木屑料>棉子壳料。     

双歧杆菌胡萝卜复合汁增菌培养基的优化筛选

选择胡萝卜为主要原料,以两歧双歧杆菌(Bbm)和长双歧杆菌(Blm)为试验菌株,研究了胡萝卜汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响,进一步利用正交实验筛选出Bbm菌胡萝卜复合汁增菌培养基;利用优选的胡萝卜复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明:大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖(P<0.01)而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长,又有缓冲培养基pH值的作用;利用L934筛选出Bbm的胡萝卜复合汁增菌培养基的最佳配比为:在胡萝卜汁中添加0.3%大豆蛋白胨,0.6%牛肉浸膏,0.5%酵母膏,0.4%玉米浆,0.2%磷酸氢二钾,将此培养基经37℃培养12 h,Bbm活菌数4.75×109cfu/mL,Blm活菌数4.82×109cfu/mL。     

莲雾组织培养和快速繁殖技术

以莲雾未萌发带顶芽茎段为材料研究其组织培养和快速繁殖技术。结果表明:莲雾组织培养的基本培养基为WPM;带顶芽茎段诱导芽的适宜培养基为WPM+0.5 mg.L-16-BA+0.02 mg.L-1NAA;通过腋芽增殖途径的适宜培养基为WPM+0.8 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;壮苗适宜培养基为WPM+0.2 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;生根适宜培养基为1/2WPM+0.5 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA。组培苗驯化移栽成活率达90%以上。剪取成活组培苗顶部枝梢进行嫩枝(幼态)扦插生根成苗,能提高繁殖率,降低成本。     

绿僵菌生防制剂助剂的筛选

使用绿僵菌油剂防治草原蝗虫曾收到很好的防效。实验对绿僵菌油剂助剂中介质油、增活剂、紫外保护剂进行筛选。结果表明,用色拉油与煤油的混合油,作为绿僵菌孢子粉喷洒介质比较理想;增C,50mg/kg为最佳的增活剂及浓度;UV-14∶10为最佳的紫外保护剂和紫外保护剂与孢子粉的配比。用该油剂对蝗虫进行室内生物测定,求得LT50为5.23d。     

冬性小黑麦花药培养的基因型和培养基效应的研究

为提高冬性小黑麦的花药培养效率,以5个冬性小黑麦杂交组合的F1为材料,分别接种到四种培养基上,研究了冬性小黑麦花药离体培养中不同基因型和不同培养基以及不同培养条件对花药培养效率的影响。结果表明,基因型差异和培养基差异对愈伤组织的诱导有显著影响,不同基因型对花药的愈伤组织的再分化频率也有显著影响。对冬H329转分化后的愈伤组织进行了4℃的低温处理,不同的处理时间对绿苗分化率也有一定的影响,处理96 h绿苗分化率最高达22.22%。     

兰花圆斑病研究初报

本文报道了作者1989～1990年对兰花圆斑病的研究结果。该病菌初步鉴定为Cylindrosporium dioscoreae Miyabe et Ito.病菌以菌丝和分生孢子在患病组织内越冬,病菌主要侵染叶片,病斑呈圆形、半圆形,边缘黑褐色,中间淡褐色。发病严重时造成全叶枯死。病害发生期4～11月。病菌在黄豆粉蔗搪琼脂培养基中生长最好;菌丝生长的适宜温度为20～30℃,最适为25℃,适宜pH值为4～8,最适为6,分生孢子萌发的最低温度为16℃左右,最高为32℃,适宜温度为20～25℃,糖分可促进孢子萌发。接种试验表明,不论有伤或无伤接种,均能致病。室内抑菌测定结果:75％百菌清WP,50％代森锰锌WP,50％稻瘟酞WP,50％克菌丹WP各1000倍,均可100％抑制孢子萌发与菌丝生长,等量式波尔多液100倍也可100％抑制孢子萌发与菌丝生长。