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Cpf1是2类V型CRISPR-Cas系统的单个RNA引导的核酸内切酶,具有切割DNA的核酸酶活性。该系统由Cpf1核酸酶和CRISPR RNA(crRNA)组成,对于如何提高CRISPR/Cpf1系统的基因编辑效率主要集中在增强crRNA的稳定性、设计对PAM要求更简单的Cpf1变体或者鉴定新型Cpf1核酸内切酶。然而,其是否适用于构建双切刻系统还有待验证。因此,本研究旨在设计3种AsCpf1突变体以及成对的crRNA,进行瞬时转染,利用双荧光素酶报告基因检测评估AsCpf1双切刻系统的编辑效率;同时探究人工改造的crRNA能否提高AsCpf1双切刻系统的编辑效率;以及设计6对具有拓展PAMs序列的crRNA靶向位点,评估HkCpf1双切刻系统在哺乳动物基因组中的编辑效率。结果显示:3种AsCpf1突变体均能不同程度地提高报告基因的相对活性,并具有切割DNA单链的能力。在AsCpf1 crRNA发生突变和延伸后,它们仍然具有引导AsCpf1双切刻系统切割DNA单链的能力。HkCpf1不仅可以用做构建双切刻系统还具有较高的切割活性,并且可以识别5’-YTN和5’-TYYN PAMs序列... 相似文献
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王建彬 《河南畜牧兽医(综合版)》2010,31(3):3-4
1鸡粪用作再生饲料的意义
当前,规模化养鸡场的鸡粪已成为不可忽视的污染源,根据实际测算,一个10万只蛋鸡场,每天产生鲜鸡粪10万吨。2006年,根据有关部门统计,我国规模化养鸡63亿只,年产于鸡粪约2730万吨,这些鸡粪如果不能及时得到处理,将直接影响鸡的生产,造成环境污染和资源浪费。 相似文献
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鲜、干鱼腥草的成分差异必然影响到成品注射液的质量。实验表明:鲜鱼腥草采摘后24h内及时蒸馏釜蒸馏是批间成分相同质量可控的前提,可以避免各种不良反应,保证注射液的安全有效。 相似文献
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从生产实际出发,论述了高寒牧区绵羊生产性胚胎移植的组织及技术程序。主要包括:胚胎移植前的准备;选择供、受体羊和饲养管理;供体超排、胚胎回收及胚胎质量鉴定;受体同期发情处理及胚胎移植;完整的记录体系等。 相似文献
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《河南畜牧兽医(综合版)》2011,32(8)
锅底灰100克.白头翁45克。共研细末.开水冲服:锅底灰、鲜马齿苋各100克,风尾草、龙芽草各50克。煎水喂服:白术40克.陈皮100克.黄连20克.白头翁50克.银花25克.连翘30克.山楂40克.泽泻40克.车前子40克.锅底灰50克,侧耳根100克(此为体重50千克猪的剂量.可按猪的大小增减剂量), 相似文献
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为了建立猪胸膜肺炎放线杆菌(Actionbacillus pleuropneumoniae,APP)快速PCR诊断方法,试验依据APP的毒素基因Apx ⅣA的序列设计引物,对江西农业大学动物科学技术学院预防兽医学教研组保存的4个血清型APP菌株以及大肠埃希杆菌、沙门杆菌进行PCR扩增,同时对提取的4个血清型菌株的基因组DNA用EcoRⅠ酶切。结果表明:4个APP菌株均成功扩增出预期大小的基因片段,而其他G-菌没有扩增出;4个血清型菌株的基因组DNA经EcoRⅠ酶切后酶切片段有所不同。 相似文献
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