2株石油降解菌的分离鉴定

为了筛选高效石油降解菌株,通过富集驯化培养,从江汉油田石油污染土样中筛选能以石油为唯一碳源生长的菌株。经过划线培养获得单菌落,并通过形态观察、生理生化及分子生物学分析对菌株进行了初步鉴定和系统分类。结果分离获得2株石油降解效率较高的菌(分别记为G-40和G-94),初步鉴定G-40为侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus),G-94为热带假丝酵母菌(Candida tropicalis)。     

噬菌体基因组DNA快速提取方法

针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法。其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体DNA释放、杂质去除、DNA吸附、DNA清洗和DNA洗脱等。结果表明,通过此法能快速提取以溶藻弧菌、大肠杆菌和阴沟肠杆菌为宿主菌的多种噬菌体基因组DNA,最快可以在2 h内完成,而且提取的产量和纯度均较高,DNA浓度超过100 ng·μL~(-1),OD_(260/280)达到1.8以上,提取产物不受宿主菌基因组DNA污染,可用于下游的实验分析。     

稻壳改良对不同烤烟品种生长发育和质量风格的影响研究

该试验研究了稻壳改良对K326、K346、NC89、KRK26、云烟87等5个烤烟品种生长发育和质量风格特征的影响,结果表明:稻壳改良对各品种的生长发育有较大影响,相比于对照而言,稻壳改良均使各品种的农艺性状变劣,且对各品种各项农艺性状的影响量不同;进行稻壳改良的各品种进入团棵期的时间明显变长,旺长期持续时间和成熟期明显缩短;撒施稻壳处理的各品种的经济性状明显低于对照各品种,对于撒施稻壳和对照2个处理而言,各品种综合经济性状表现的规律一致,即云烟87>K326>K346>NC89>KRK26;进行稻壳改良处理的各品种各项性状均比对照处理各品种差,可能与稻壳撒施时间较晚、垄体土壤墒情较差有关,建议今后进行稻壳改良时,撒施时间控制在2月底以前,并适当增加土壤墒情.     

苄嘧磺隆降解菌的分离及生长降解特性研究

苄嘧磺隆是一种磺酰脲类除草剂,被广泛应用于稻田土壤中防除一年生和多年生阔叶杂草。在土壤中的持效期较长,大量施用后易对后茬敏感作物产生药害,微生物降解是土壤中苄嘧磺隆转化的主要方式。本研究从长期施用该除草剂的稻田土壤中分离筛选到1株苄嘧磺隆降解菌株75B,经形态学及生理生化特征、16S rRNA基因扩增测序构建系统发育树分析,鉴定为Klebsiella pneumoniae(肺炎克雷伯氏菌)。75B菌株对环境的适应能力较强,在p H 5.0!9.0、0.5!5.0%Na Cl浓度下、培养温度为26!38℃的范围内生长良好。将该菌株按5%接种量置于p H 7.0、以苄嘧磺隆为唯一碳源的无机盐培养基(2.0%Na Cl浓度)中、34℃条件下培养,对50 mg/L苄嘧磺隆的5 d降解率为74.11%,培养至10 d时的降解率为97.65%。结果表明75B菌株可以有效地降解苄嘧磺隆,具有应用于该除草剂污染环境修复的潜力。     

桑叶在肉牛瘤胃中的降解特性研究

为明确桑叶在肉牛瘤胃中的降解率及饲用价值,试验以桑叶为研究对象,选用6头装有永久性瘤胃瘘管的肉牛,采用尼龙袋法,研究桑叶在肉牛瘤胃中停留时间为6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h的降解变化。结果表明,桑叶营养成分丰富,其粗蛋白含量较高,达到20.64%;其干物质、粗蛋白、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的降解率均随在瘤胃停留时间的延长而增大,大体上,24 h~72 h的降解率与24 h前的降解率变化差异显著(P0.05);24h之后,降解率变化较为平缓,72 h降解率最大。24 h时干物质的降解率为81.49%、粗蛋白的降解率为88.72%、中性洗涤纤维的降解率为72.59%,酸性洗涤纤维的降解率为18.94%。     

沙蒿生物质炭在沙土中的降解特征

为明确不同炭化条件下沙蒿生物质炭的有机组分、炭化过程和降解特性。于不同炭化条件下无氧炭化制备沙蒿生物质炭并进行沙地封存。结果表明:H、O和N元素的质量分数及H/C、O/C和(N+O)/C均随炭化温度的升高和炭化时间的延长呈先降低后稳定的变化趋势,升温速率对其无显著影响。而C则呈相反趋势且均在炭化温度600℃、炭化时间60 min以后基本达定值,上述指标(H、O、N、H/C、O/C、(N+O)/C和C)的稳定值分别约为29.3 g/kg、79.8 g/kg、11.2 g/kg、0.40、0.07、0.08和879.7 g/kg。生物质炭的降解速率随着炭化温度的升高、炭化时间的延长和施用量的增大而降低,其半衰期为2~12年。综上,沙蒿的炭化既是有机组分富碳、去极性官能团的过程,同时也是芳香性增强、亲水性和极性减弱的过程,施用量和炭化温度是影响生物质炭降解的决定性因素。     

秸秆自然降解过程中优势菌群的筛选

[目的]筛选降解秸秆的优势菌。[方法]通过室内试验模拟秸秆在土壤中的状态,观测不同时期秸秆上微生物的变化及不同土层中碱解氮和总糖含量的变化。[结果]秸秆降解40d时,优势菌中真菌所占比例较大,降解60d时,细菌优势菌所占比例较大,其中菌株j-15、14和木霉12的数量占优势;第2层土壤中细菌数量最多,其次为第3和第6层,表层和底层土壤中细菌数量最少;表层土壤中真菌种类较多,第2和第3层土壤中木霉占绝对优势,其他菌层以毛霉为主。[结论]第3层土壤中优势菌较多,碱解氮和总糖含量最高;分离出的细菌以球菌为主,真菌以木霉为主。     

奶牛主要植物性蛋白质饲料蛋白质和纤维物质瘤胃降解率的研究

选用3头安装永久性瘤胃瘘管的健康荷斯坦产奶牛为试验动物,选取8种北方地区奶牛常用蛋白质饲料原料为试验样品,每个样品设3个重复,用尼龙袋法分别测定各个样品的粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)在瘤胃内的动态降解率和有效降解率。结果表明:(1)所选8种蛋白质饲料原料中葵花粕的粗蛋白质(CP)有效降解率均高于其他粗饲料,达到61.17%以上,酒精粕的粗蛋白质(CP)有效降解率最低,仅为19.03%。(2)在饲喂基础上,玉米蛋白粉所含的瘤胃降解蛋白质(RDP)的比例最高,达到30.99%以上,而酒精粕所含的比例最低,仅为5.52%。(3)豆粕所含的中性洗涤纤维(NDF)的有效降解率最高,达到50.74%以上,而菜籽粕的最低,仅为11.06%。(4)玉米蛋白粉所含的酸性洗涤纤维(ADF)的有效降解率最高,达到59.23%以上,而酒精粕的最低,仅为11.27%。     

几株纤维素分解菌对统糠的混合发酵研究

本试验以统糠为主要发酵对象,利用微生物发酵原理,通过全纤维素粉-Mandels氏营养盐琼脂双层平板培养基的筛选,得到了8株能有效分解纤维素的菌株,并对其和啤酒酵母等进行了颉颃实验,得到四种菌株的组合,并进行了以培养基、菌种比例和含水量三因素三个水平的L9(33)的正交试验,最终获得了一组固体发酵的最佳条件组合为:最佳培养基的组成为玉米粉21%,统糠65%,棉粕10%,白糖,尿素,食盐,麦饭石各1%,菌种比例为菌种1(A):菌种2(B):菌种3(C):啤酒酵母=3∶1∶1∶3,含水量为55%,接种量为8%,发酵温度为28℃,发酵时间为8d。混合菌发酵培养基中的粗纤维下降明显(P0.05),下降最大程度达到了11.64%。真蛋白的含量显著提高(P0.05),达到11.52%。通过发酵提高了统糠的粗蛋白的数量和品质,降低了粗纤维的含量,同时改善了饲料的适口性。     

高效降解纤维素菌株的选育

[目的]筛选纤维素酶活性高且酶活稳定的纤维素降解菌。[方法]以木霉为出发菌株,用紫外线对其进行诱变处理,通过平板初筛和摇瓶复筛筛选出纤维素酶活力高且酶活稳定的优良突变株,然后分别以滤纸、甘蔗渣、麦秆和稻壳为目标降解物对优良突变株进行底物降解试验。[结果]经紫外线诱变、初筛、复筛,共选育出3株纤维素酶活力高且酶活稳定的优良突变株N1、N2、N3,其中N3的产酶活力最高（348 U/ml）,为出发菌株的2.13倍;N3对各种底物的降解效果均优于出发菌株,分别以滤纸、甘蔗渣、麦秆和稻壳为唯一碳源时,其失重率分别为48.68%、41.28%、26.53%和23.47%。[结论]该研究选育出了高效降解纤维素的菌株N3。