水库鱼产量估测模型的初步研究

对浙江省60座大、中型水库的多年平均鱼产量与集雨面积、兴利库容、宜渔面积,多年鱼种平均放养量等因素作相关分析,以复蓄指数(x_1)、流域形态指数(x_2)、多年鱼种平均放养量(x_3)作指标,建立起鱼产量(y)的回归方程:y=-2.1967-0.6333x_1 2.1113x_2 0.1584x_3.经精度检验,51.7%的水库鱼产量估测相对误差为0—20%,90%的相对误差小于50%。     

免疫酶组化间接法诊断猪流行性腹泻的研究

建立了免疫酶组化间接法诊断猪流行性腹泻的方法。该法特异性好，简便快速，不需特殊仪器设备，普通显微镜或肉眼即可判定结果，利于基层使用。     

应用间接ELISA检测血清中副结核分枝杆菌抗体

副结核病是由副结核分枝杆菌引起的反刍兽的慢性肠道疾病.本病的特征是病畜表现慢性卡他性肠炎,长期顽固性腹泻、消瘦,易造成患畜死亡.本病在世界广泛流行,以奶牛业和肉牛业发达的国家受害严重.我国于1953年首次报道此病.副结核分枝杆菌主要引起牛发病,幼牛易感,羊和骆驼也可发病.本病不易被人察觉,平时不会造成突如其来的损失,但感染地区畜群死亡率可达2%～10%,严重的达25%,而且难从畜群中根除,其对养牛业的损失常常超过某些传染病.     

不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导仔猪细胞免疫的研究

将猪流行性腹泻病毒（PEDV）纤突蛋白S1基因片段插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG-2中,构建了重组表达载体pPG-sl,将其电转化干酪乳杆菌Lcasei393,获得了表达PEDVsl蛋白的重组乳酸菌杆菌。重组杆菌诱导后,经westernblot、间接ELISA实验表明,目的蛋白获得了分泌表达。     

魏氏梭菌α毒素基因的克隆表达及其间接ELISA方法的建立

对GenBank上发表的魏氏梭菌α毒素基因的氨基酸序列进行了二级结构、疏水性、抗原决定簇、跨膜区以及抗原性分析,在此基础上,对α毒素基因130～966nt位的837bp长的适合原核表达的区域进行PCR扩增、克隆、核酸序列测定和生物信息学分析。同时,建立了检测魏氏梭菌α毒素抗体的间接ELISA方法。     

基于山羊痘病毒P32蛋白ELISA检测方法的建立

P32蛋白是羊痘病毒株中特异性很强的免疫原性结构蛋白,本研究利用原核表达系统对山羊痘病毒P32基因进行表达,并应用该蛋白建立了检测山羊痘病毒血清抗体检测方法。将P32基因克隆至pGEX-6P-1表达载体,经抗性筛选,测序鉴定获得重组阳性克隆,成功构建了羊痘病毒重组pGEX-P32表达载体。经IPTG诱导表达,可稳定、高效地表达P32融合蛋白。融合蛋白纯化后SDS-PAGE结果表明,以终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导,8h后表达量最高,表达蛋白为融合蛋白,相对分子质量约56 000,表达产量约占菌体总蛋白的28%。Western-blotting检测表明,表达的融合蛋白能与羊痘阳性血清发生特异性反应,说明表达获得的产物具有良好的反应原性。用表达的融合蛋白建立了检测羊痘血清抗体的ELISA方法,经方阵滴定,确定抗原最佳包被质量浓度为每孔0.4mg/L,最佳血清稀释度为1∶20。符合率试验表明ELISA方法和琼脂扩散试验的阳性符合率为83.44%,并且所建立的方法具有很好的特异性、重复性和敏感性,这为应用该融合蛋白制备山羊痘病毒免疫血清学诊断试剂和疫苗研究奠定了基础。     

猪瘟疫苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体检测

采用间接血凝试验（IHA）和斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA)检测仔猪血清猪瘟母源抗体，其在10、20、30和40日龄的抗体阳性率分别为94.1%、96.9%、70.4%、31.0%和82.4%、96.9%、74.1%、34.5%，表明IHA用于仔猪早期的母源抗体检测比Dot-ELISA更敏感。在此基础上用IHA检测了10、15、20、25、30、35、40和45日龄仔猪血清母源抗体，其群体抗体阳性率分别为97.1%、95.1%、93.9%、80.0%、74.3%、38.2%、36.7%和33.3%，抗体平均效价分别为1：109、1：70、1：47、1：29、1：23、1：10、1：9和1：8。     

仔猪人工感染囊尾蚴后血清抗体消长规律的研究

间接酶联免疫吸附法是一种重要的检测猪囊尾蚴病血清抗体的免疫学诊断方法.本试验采取的ELISA法在韩宇等[1-2]建立的改良ELISA法的基础上进行了进一步优化,现介绍如下.     

间接ELISA检测鸡病毒性关节炎抗体方法的建立及其应用

用蔗糖密度梯度离心法提纯鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)作包被抗原,建立了间接ELISA的最佳工作程序,其中抗原包被浓度为0.61μg/孔,被检血清为1:50.酶结合物1:1600;其灵敏度为琼脂凝胶沉淀试验(AGP)的238.5倍.在受检的529份鸡血清中,该法检出率(85.1%)显著高于AGP(46.0%).间接ELISA对S1133疫苗及AVAV—J株接种鸡抗体消长情况的观察结果表明,S1133疫苗常量接种后所产生的免疫力足以抵抗强毒株AVAV—J的攻击,AVAV—J毒株的良好免疫原性.使其有可能成为研制国产疫苗的候选毒株.     

间接ELISA检测番鸭细小病毒抗体

鸭细小病毒病是由鸭细小病毒（Duck parvovirus,DPV）引起的一种急性病毒性传染病,以雏鸭易感,临床主要表现为气喘、脚软和渗出性肠炎,死亡率约50%～80%,在世界各养鸭地区都有分布,其预防和控制已直接关系到水禽养殖业的持续稳定发展[1]。临床和实验室试验证实番鸭细小弱毒疫苗是预防控制该病最有效措施,而对细小病毒特异性抗体的监测是评价疫苗免疫效果及鸭群合理制定免疫程序的关键[2]。目前国内已经报道[3]的检测番鸭细小病毒抗体的方法有血清微量中和试验、微量点凝试验、胶乳凝集反应、琼脂扩散试验,