3种石斛兰以茎段为外植体的离体快繁技术1）

以肿节石斛（ Dendrobium pendulum）、尖刀唇石斛（ D．heterocarpum）和报春石斛（ D．primulinum）的无菌茎段为外植体,通过正交试验和单因子试验,研究不定芽诱导、生根和炼苗移栽等技术,筛选出各培养阶段的适宜培养基配方和培养条件,建立3种石斛兰离体快繁体系。结果表明：适合肿节石斛和报春石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS＋6-BA 0．5 mg· L-1＋NAA 0．1 mg· L-1＋椰乳100 mL· L-1,诱导率分别为93．75％和90．00％;适合尖刀唇石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS＋6-BA 0．25 mg· L-1＋NAA 0．1 mg· L-1＋椰乳100 mL· L-1,诱导率达到95．00％。适合肿节石斛和尖刀唇石斛生根的培养基为MS＋NAA 0．5 mg· L-1＋香蕉泥100 g· L-1,适合报春石斛生根的培养基为MS＋NAA 0．75 mg· L-1＋土豆泥100 g· L-1,生根诱导率高达100％。     

铁皮石斛鲨烯合酶基因的克隆及其组织表达模式分析

【目的】克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因(DoSS),并对其进行生物信息学与组织表达模式分析,为研究其生物学功能提供参考。【方法】采用RT-PCR和RACE技术,获得DoSS基因全长序列;利用生物信息学软件预测DoSS蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行DoSS蛋白氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助qPCR检测DoSS基因的组织表达模式。【结果】成功克隆获得铁皮石斛鲨烯合酶基因,命名为DoSS(GenBank注册号JX272631),其cDNA全长1 735bp,编码一条由410个氨基酸组成的多肽,分子质量46.99ku,等电点7.13;DoSS蛋白含有鲨烯/八氢番茄红素合成酶保守结构域(44-315位氨基酸);DoSS与其他多种植物SS基因的编码蛋白同源性很高(61%~75%),与水稻、玉米等单子叶植物的亲缘关系较近;DoSS基因为组成型表达,在根中的表达量最大,为叶的12.41倍;茎次之,为叶的1.87倍。【结论】成功克隆得到1个鲨烯合酶基因(DoSS)全长cDNA;DoSS基因的(在根中高)表达特征暗示,其可能在铁皮石斛根的生长发育中发挥重要的调控功能。     

氮磷钾配施对金钗石斛幼苗生长的影响

为探明金钗石斛高产栽培的氮磷钾最佳配方,以金钗石斛幼苗为材料,采用田间试验研究不同氮磷钾配比施肥对金钗石斛幼苗生长的影响。结果表明：不同处理对金钗石斛幼苗生长效果不同,其中,以施用尿素10．87 kg/667m2＋过磷酸钙31．25 kg/667m2＋硫酸钾10．00 kg/667m2效果最好,其药用部位（茎）的生长量为1．74 g/株,较 CK 增加5．45％,微量元素铜、锌、铁和锰含量分别较 CK 增加46．24％、50．80％、69．35％和25．70％,药用成分茎多糖和石斛碱分别较 CK 增加42．36％和46．67％。合适的氮磷钾配比能够明显促进金钗石斛幼苗产量和品质的提高。     

霍山石斛多糖的半仿生提取工艺优化与抗炎活性评价

[目的]优化霍山石斛多糖的半仿生提取工艺,并评价所提多糖的抗炎活性。[方法]以多糖得率为指标,采用单因素试验和正交试验方法对提取工艺进行优化,以LPS诱导的RAW264.7细胞为体外炎症模型,评价多糖的抗炎活性。[结果]半仿生提取法最佳工艺条件为:料液比1∶30、提取温度80℃、模拟胃液提取时间1.5 h、模拟肠液提取时间2.5 h,在此条件下多糖的得率为(60.9±1.2)mg/g,较传统水提法的多糖得率提高16.55%。细胞试验表明,霍山石斛多糖能抑制RAW264.7细胞NO及IL-1β的分泌,降低i NOS和IL-1βm RNA的表达。[结论]优化后的提取工艺合理可行,提取率高,所提多糖的抗炎活性优于传统方法制备的多糖。     

霍山石斛试管苗栽培技术研究

为了提高霍山石斛试管苗移栽成活率,以实现产业化生产,采用不同基质、不同继代次数及不同培养基培养的生根苗栽培试验,结果表明：在木屑＋碎石的基质上,试管苗继代在三年内,生根培养基不加任何激素的生根苗移栽成活率最高。种苗质量及生根苗培养基激素含量和栽培基质是霍山石斛组培苗产业化的根本保证。     

微波消解-ICP-AES法测定铁皮石斛中多种金属元素

建立微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱分析方法测定中草药铁皮石斛(Dendrobium officinale)中金属元素的含量.结果表明,铁皮石斛样品中含Ca、Mg、Na、K常量金属元素和Fe、Cu、Zn、Ni、Mn、Cr、Se等微量金属元素而不合Hg、Pb、Cd等对人体有害的元素.各元素加标回收率在97.7％～103.1％,RSD＜5％.该法灵敏度高,准确可靠,可用于铁皮石斛中的多元素分析.     

铁皮石斛产业发展存在的问题与对策

随着我国社会和经济的不断发展,铁皮石斛产业也逐渐发展壮大,逐渐成为社会十分有影响力的产业。主要分析贵州安龙县铁皮石斛产业发展存在的问题以及现状。     

铁皮石斛组培苗生根条件优化研究

以铁皮石斛无菌幼苗为材料,在不同生根培养基中添加不同配比的生长调节物质、香蕉汁、马铃薯汁以及活性炭,研究其对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。研究结果表明,生根培养基为：1/2 MS＋6-BA 0.2 mg/L＋10.0%香蕉汁＋10.0%马铃薯汁＋NAA 0.4 mg/L＋2.0%蔗糖＋0.04%活性炭,生根条件为光照强度2 000 lx、琼脂用量7.0 g/L、培养基pH为5.8是最适宜条件。     

基质和炼苗方法对春石斛试管苗假植的影响

以4个品种的春石斛为材料,研究了不同的假植基质和不同的炼苗时间和方法对春石斛试管苗假植成活率和初始生长的影响。结果表明,所涉及的基质中,水苔的成活率最高,而炼苗方法以封瓶炼10 d再开瓶炼1 d最佳。     

瑞丽石斛资源调查及产业发展现状

通过调查,云南瑞丽自然保护区及周边蕴藏野生石斛资源40种,建有石斛种质资源圃2个,收集保存石斛品种52种。自1999年瑞丽勐秀乡的农户开始仿野生种植石斛,截至2011年6月全市累计种植品种9个,种植面积908.8亩。其中,仿生种植533.8亩,集约化种植375亩(净面积15万平方米),辐射全市2区、5个乡镇的89个自然村、2个农场,共206户种植。2010年全市产量100.39吨,农业产值1000万元。