青海省海北州藏羊群中牛病毒性腹泻病毒和羊边界病毒的流行病学调查

为掌握青海省海北州藏羊群中牛病毒性腹泻病毒和羊边界病毒的感染情况,本研究采用RT-PCR方法分别对青海省海北州的161份健康藏羊血清样品和34份腹泻藏羊组织样品进行了BVDV和BDV的抗原核酸检测。结果显示：195份样品中BVDV和BDV总阳性率分别为29.74 %和14.36 %;161份健康藏羊血清样品中BVDV和BDV平均阳性率分别为26.71 %和11.80 %,BVDV/BDV混合感染率为4.35 %;34份腹泻藏羊组织样品中BVDV和BDV平均阳性率分别为44.12 %和26.47 %,BVDV/BDV混合感染率为17.65 %。本研究表明青海省海北州健康藏羊群和腹泻藏羊群中均存在BVDV、BDV的单独感染以及混合感染,且感染情况在个别养殖场(户)较为严重,本研究为青海藏羊的综合防控措施提供了指导依据,丰富了我国羊群中BVDV和BDV的流行病学资料。     

雅安藏茶的分级和保健功能研究进展

雅安藏茶历史悠久,独特的渥堆工艺形成了其陈醇的品质特征。综述了近年来雅安藏茶的产品分级标准以及保健功能性研究进展,主要包括不影响睡眠、降脂减肥、抗氧化、抗辐射、助消化等。     

藏绵羊不同毛色皮肤组织miRNA表达谱及靶基因分析

【目的】藏绵羊又称藏系绵羊,是中国三大粗毛羊品种之一,主要分布在西藏及其毗邻的高寒牧区,如青海、甘肃、四川、云南等地。藏绵羊由于其被毛纤维粗长,毛质细腻且保暖性好,是制造藏式地毯的上好原料。而毛色作为一种重要的经济性状,同时制约羊毛的经济价值。然而,目前对于绵羊毛色的分子调控机制尚不明确,以藏绵羊为研究对象,对其不同颜色皮肤组织（黑色和白色）进行转录组测序,旨在探讨miRNA在藏绵羊不同毛色皮肤组织转录后水平中发挥的作用及其可能参与的调控通路。【方法】选取2只具有黑白花毛色的健康藏绵羊,减去体侧被毛使皮肤完全裸露并用75%酒精消毒处理,屠宰后快速切取皮肤组织并保存在组织样品保存液中防止RNA降解,提取RNA后通过miRNA测序和生物信息学分析,获得藏绵羊不同毛色（黑色和白色）皮肤组织miRNA表达谱,筛选组织差异表达miRNA并预测相关靶基因。通过靶基因分析,获得与调控藏绵羊毛色性状可能相关的信号通路。【结果】黑色和白色皮肤组织共获得85.76兆条原始读长,经过滤后得到85.08兆条clean reads;共鉴定出334个已知的miRNA和59个新的miRNA;从中获得23个差异表达miRNA,其中14个差异表达miRNA在白色皮肤组织中表达显著上调,9个表达下调。miR-2284b和miR-744仅在藏绵羊白色皮肤中表达,而miR-23b、miR-411a-5p、miR-30c、miR-423-3p和miR-324-5p则仅在藏绵羊黑色皮肤中表达,但表达量相对较低。表达量最高的miRNA为miR-10a,而倍数差异最大的为miR-23b。其中,miR-10a可参与调节多种信号通路,其作用涉及增殖、分化、凋亡、细胞粘附等各个方面,目前并无调控绵羊毛色方面的相关报道,但其功能及作用机制的研究仍在不断扩展。miR-23b则与Wnt、Notch等信号通路有关,这些信号通路中的部分基因也和黑色素的生成有密切关系。结合倍数差异和miRNA表达量分析,miR-411a-5p、miR103和miR-200b可能也和毛色调控密切相关。本研究共预测出981个靶基因可能参与毛色调控,多数基因和WNT信号通路、MAPK通路、EDNRB信号通路及黑素原生成通路（melanogenesis pathway）相关,其中黑素原生成通路显示和WNT信号通路、KIT信号通路及EDNRB信号通路相互关联。黑素原生成通路显示藏绵羊不同毛色可能最终通过MITF基因调控下游的TYR基因（酪氨酸酶基因）影响黑色素的合成。同时,筛选7个差异表达miRNA进行定量验证,结果表明,5个miRNA在黑色皮肤组织中上调表达,2个miRNA在白色组织中上调表达,定量结果与测序结果一致。【结论】获得了藏绵羊皮肤组织miRNA表达谱,并通过生物信息学分析得到可能和调控毛色性状相关的miRNA和信号通路。这些结果表明,藏绵羊毛色性状可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路,这有助于更进一步了解毛色转录后水平的调控过程,并对进一步的功能验证奠定基础。     

不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊生长发育的影响

本试验旨在研究不同蛋白质水平饲粮对藏羔羊生长发育的影响。试验采用单因子随机试验设计,选取2月龄断奶、体重(20.80±2.75)kg的藏公羔羊90只,随机分成3个组(每组30个重复,每个重复1只羊),分别饲喂蛋白质水平为10.8%、12.0%和13.2%的试验饲粮。试验期为127 d,其中预试期7 d,正试期120 d。结果显示:1)12.0%蛋白质水平组藏羔羊的试验第60~90天及第90~120天日增重和平均日增重最高,料重比最低。2)12.0%蛋白质水平组藏羔羊的腹泻率及尿道感染率较低,死亡率最低。3)在试验第60天,12.0%蛋白质水平组血清总蛋白(TP)含量与10.8%和13.2%蛋白质水平组均没有显著差异(P0.05),但10.8%和13.2%蛋白质水平组之间差异显著(P0.05);在试验第90、120天,血清TP含量在12.0%和13.2%蛋白质水平组之间差异不显著(P0.05),但二者均显著高于10.8%蛋白质水平组(P0.05)。在各阶段,随着饲粮蛋白质水平的升高,血清葡萄糖(GLU)和总胆固醇(TC)含量均没有显著发生变化(P0.05)。4)12.0%蛋白质水平组的单位成本增重最高,达到73.05元/kg,总收入和净收入最高,净收入达到7 800.51元。本试验条件下,饲粮蛋白质水平影响早期断奶藏羔羊的生长发育,12.0%蛋白质水平可提高藏羔羊的日增重,降低料重比和死亡率,改善血清生化指标,提高生长性能,并降低饲养成本。     

不同品种猪感染HP-PRRSV后肺组织间PRRSV受体基因差异表达的研究

为进一步了解藏猪、藏梅猪和大约克夏猪对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV） JXA1分离株具有不同易感性的分子机理,本研究建立实时荧光定量RT-PCR方法比较分析藏猪、藏梅猪和大约克夏猪感染JXA1分离株前、感染后4、7和14 d肺脏中HSPG2、SIGLEC1、CD163、VIM和NMMHC-ⅡA 5个PRRSV受体基因的差异表达情况。结果显示,藏猪感染JXA1分离株后4和14 d肺脏中HSPG2的表达量显著高于感染前（P < 0.05）,而感染后7 d HSPG2的表达量显著低于感染前（P < 0.05）,藏梅猪在感染后14 d HSPG2的表达量显著高于感染后7 d（P < 0.05）;藏猪感染后4和14 d肺脏中SIGLEC1的表达量显著高于感染前（P < 0.05）,大约克夏猪感染后4、7和14 d SIGLEC1的表达量均显著低于感染前（P < 0.05）;藏猪和藏梅猪感染后14 d肺脏中CD163的表达量均显著高于感染前（P < 0.05）,大约克夏猪则感染后7和14 d均显著低于感染前（P < 0.05）;藏猪感染后7 d肺脏中VIM的表达量显著高于感染前（P < 0.05）,大约克夏猪在感染后7 d显著低于感染前（P < 0.05）;藏梅猪感染后4 d肺脏中NMMHC-ⅡA的表达量显著高于感染前（P < 0.05）,大约克夏猪在感染后4和14 d NMMHC-ⅡA的表达量显著高于感染前（P < 0.05）。结果表明,5个PRRSV受体基因中,SIGLEC1和VIM基因可能是影响藏猪、藏梅猪和大约克夏猪对JXA1分离株易感性存在差异的潜在关键基因。     

藏羊白细胞介素-7基因的PCR扩增及生物信息学分析

为了获得藏羊白细胞介素-7（interleukin-7,IL-7）基因序列,并研究其序列特征及编码蛋白的结构和功能,本试验采用RT-PCR方法,从藏羊脾脏中扩增了IL-7基因,应用DNAStar软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,与经BLAST比对后的参考序列进行同源性比对,并构建系统进化树,同时利用DNAStar软件和在线服务器预测该基因编码蛋白的二级结构、三级结构、亲水性、信号肽和蛋白翻译后修饰位点。结果表明,藏羊IL-7基因长度为531 bp（含终止密码子）,编码176个氨基酸。藏羊IL-7基因与绵羊、山羊、藏羚羊、水牛、瘤牛、美洲草原野牛、黄牛和牦牛的IL-7基因核苷酸序列同源性在97.2%~99.8%之间,氨基酸序列同源性在94.9%~99.4%之间,藏羊与绵羊的亲缘关系最近。蛋白结构预测结果表明,IL-7蛋白主要由α螺旋组成,是一种亲水性和分泌型蛋白。该蛋白含有6种蛋白质翻译后修饰位点,包括1个N-豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点、1个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、3个N-糖基化位点、4个蛋白激酶C磷酸化位点、6个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。本研究结果可为藏羊IL-7基因的进一步研究与临床应用提供参考。     

班玛藏茶与云南普洱茶中咖啡因含量对比分析

[目的]测定青海班玛藏茶和云南普洱茶茶叶中的咖啡因含量。[方法]采用索氏抽提法提取咖啡因,并对提取出的咖啡因含量进行粗略评价。[结果]班玛藏茶平均回收率为36.3%,咖啡因总量极少(0.000 7 g);云南普洱茶平均回收率为34.3%,咖啡因总量为0.207 5 g。[结论]不同生境的茶叶咖啡因含量各不相同。     

日光温室球茎茴香栽培技术

球茎茴香是伞形花科茴香属茴香种的一个变种,原产意大利南部,主要分布于地中海沿岸及西亚。由叶鞘基部层层抱合形成扁球形的脆嫩＂球茎＂,可用于炒食和凉拌,嫩叶用于做馅。含有特殊的香辛味,可增进食欲,具有温肝胃、暖胃气、散寒结的保健功能,并含有丰富的氨基酸、维生素、矿物质。近几年在大中城市郊区少量种植,用于宾馆、饭店和节日装箱礼品菜,颇受消费者的欢迎。     

天峻藏羊链球菌病流行情况调查与综合防控

<正>羊链球菌病俗称"嗓喉病",是由溶血性链球菌(Streptoccus hemolyticus)引起羊的一种急性、热性败血性传染病,病畜以体温升高,全身性出血性败血症,浆液性、纤维素性胸膜肺炎,咽喉部及颌下淋巴结肿胀、坏死,胆囊肿大为主要特征。本病绵羊最易感,山羊次之,家兔、小鼠、鸽也可感染。羊链球菌病发病急,致死率高,在牧区常呈散发性流行,是危害天峻藏羊养殖业的重要疫病之一。     

山羊、藏系绵羊和黄牛肉中次黄嘌呤核苷酸含量比较

采用高效液相色谱法测定了乐至黑山羊、藏系绵羊和黄牛的背最长肌中次黄嘌呤核苷酸(Ionsine monophosphate,IMP,又名肌苷酸)的含量。结果显示,山羊和藏系绵羊的背最长肌中的IMP含量极显著高于黄牛(P0.01),山羊的背最长肌中IMP含量不同程度地低于藏系绵羊(P0.05),但用75%蚕沙或100%蚕沙替代精料的试验组与藏系绵羊差异不显著。初步研究表明,用蚕沙替代精料可能有助于山羊肌肉中IMP的合成。