胚胎干细胞体外定向诱导分化研究进展

胚胎干细胞是由早期内细胞团分离的一种多潜能细胞 ,在体外分化抑制培养时 ,可保持未分化状态而无限增殖。一旦撤除分化抑制因素 ,或添加适当的诱导剂 ,ES细胞可分化为内胚层、中胚层和外胚层的多种类型的特化细胞。文章综述了体外定向诱导 ES细胞分化为造血细胞、心肌细胞、神经细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、内皮细胞、上皮细胞、成骨细胞、软骨细胞和黑素细胞等的途径和方法。     

山羊孤雌胚胎的体外培养

系统地研究了培养液微滴的大小、培养液体系及血清浓度对山羊孤雌胚胎早期体外发育的影响。结果表明，培养液微滴以较大体积(200～500μL)的培养效果较好；在3种培养液中，添加10％的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好，囊胚率分别可达62．79％(81／129)、53．52％(38／71)、13．64％(12／88)；mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组，SOFaa组优于CRlaa组，尽管SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在本试验条件下，以SOFaa培养液，山羊孤雌胚胎体外培养72h时加入10％的NGs，500μL微滴培养，其发育效果较好，囊胚率可达62．79％。     

柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究

选用‘Peng柑’、‘锦橙’、‘桃叶橙’、‘华农本地早’花后7周幼果胚珠进行培养，其胚状体发生的百分率分别是：48.5%、21.2%、19.8%、6.4%；胚性愈伤组织则为：28.2%、13.5%、15.8%、5.8%。各品种胚状体和胚性愈伤组织发生的百分率明显不同，与品种胚数多少相一致。不同激素和有机物对柑桔胚珠培养、胚状体的发生及胚性愈伤组织形成产生不同的影响，多单胚的‘华农本地早’仅从基本培养基中产生胚状体和胚性愈伤组织。胚珠培养中，胚状体发生的方式，根据来源不同分为三种：第一种是由胚珠（或已黄的球形胚上）长出白色的胚性愈伤组织，继而产生胚状体；第二种是在已分化的幼苗下胚轴或根部产生胚性愈伤组织和胚状体；第三种是在畸形胚上直接不断的分化出胚状体。     

鸡常见的胚胎病及诊断

１　概述　禽胚胎病（Ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｆ　ａｖｉａｎ　ｅｍｂｒｙｏ）是指禽类胚胎在其发育过程中，由于某些异常的理化和生物因素的作用，其发育出现偏差，以致发生病变、畸形和死亡的现象。对家禽胚胎病的研究是一门新兴的学科领域，对禽类胚胎病的研究，保证禽类胚胎正常发育生长，提高孵化率，对家禽生产和科学研究领域都有十分重要的意义。但在日常的禽病防治工作中，人们往往只着重研究禽类本身的疾病，而对禽的胚胎病的研究较少。鸡胚胎病的发生，不但使孵化成绩（包括受精率、出雏率、健雏率等）明显降低，亦造成大量畸形雏和病…     

猪卵母细胞在不同条件下的体外成熟培养

研究了不同时间段添加外源激素及不同基础培养液和血清有无对猪卵母细胞体外成熟的影响。实验包括（1）猪卵母细胞以TCM199＋10％FBS＋10IU／mL pregnant more serum gonadotrophin（PMSG）＋10IU／mL human chorion gonadotrophin（hCG）＋2．5IU／mL follicle stimulate hormone（FSH）为成熟培养液体外培养44h，前22h在培养液中加激素，后22h不加激素及前22h不加激素，后22h添加激素和添加激素连续培养44h；（2）以实验（1）中激素添加的方案在体外添加激素连续培养44h，对不同基础培养液（TCM199粉剂、TCM199原液和改良TCM199（mM199））对猪卵母细胞体外成熟进行了研究；（3）以实验（2）中筛选出的mM199组为成熟培养液对比血清有无对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明，实验（1）中3种激素添加不同时间段其成熟率分别为45．67％、45．29％和46．07％，对猪卵母细胞体外成熟无显著影响（P〉0．05）；实验（2）中，mM199组的成熟率（54．10％）高于TCM199粉剂组的成熟率（46．16％）及TCM199原液组的成熟率（47．14％），但差异不显著（P〉0．05）；实验（3）中无血清组的成熟率（67．10％）高于有血清清组的成熟率（52．22％），差异显著（P〈0．05）。由此表明，mM199＋10IU／mL PMSG＋10IU／mL hCG＋2．5IU／mL FSH是一种适合于猪卵母细胞体外成熟的培养液，体外成熟率达67．10％。     

胚胎移植受体牛行为的观察与分析

胚胎移植也称为受精卵移植,是将一头良种母牛配种后的早期胚胎用冲洗子宫的方法取出,或是经体外受精获得的胚胎移植到另一头同种的、生理状态相同的母体内,使之继续发育成为新个体,俗称“借腹怀胎”或“人工受胎”。提供胚胎的个体称为供体,而接受胚胎的个体称为受体。胚胎移植基地是用黄牛     

转MsLEA4-4基因拟南芥株系的耐盐性分析

为了深入研究紫花苜蓿（Medicago sativa）MsLEA4-4基因的抗逆性,本试验对前期获得的转MsLEA4-4基因的拟南芥（Arabidopsis thaliana）株系进行不同浓度盐胁迫处理,以验证MsLEA4-4基因在拟南芥植株体内的耐盐性。试验结果表明：盐胁迫后转基因株系的发芽率达到55%,比对照植株（Control plant,CK）高81%;转基因株系的鲜重、叶绿素含量均高于CK（P<0.05）;盐胁迫后转基因株系的存活率比CK提高75.0%~81.3%;盐胁迫明显抑制根系生长,但转基因植株的侧根数量比CK多4~5根（P<0.05）;盐胁迫后转基因株系体内的可溶性糖含量（P<0.05）和超氧化物歧化酶（P<0.01）,过氧化氢酶（P<0.01）,过氧化物酶（P<0.05）活性均高于CK,脯氨酸（P<0.01）和丙二醛（P<0.05）含量均低于CK。综上可得,MsLEA4-4基因参与了拟南芥体内的耐盐性调控,提高了转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究为进一步探索MsLEA4-4在转基因紫花苜蓿盐胁迫中的功能及培育耐盐性紫花苜蓿品种提供依据。     

山羊卵巢卵母细胞的体外受精试验

将18枚细胞质均匀、包有完整致密卵丘细胞的山羊小卵泡(2～5mm)卵母细胞培养于含有hCG(20μg/mL)和FCS(10％)的TCM_(199)中30h,然后用经含有肝素(20μg/mL)和BSA(10mg/mL)的BO液诱导获能的山羊新鲜精子进行授精处理,授精后8h,转移入含有10％FCS的TCM_(199)中继续培养12h,结果有10枚卵子成熟,成熟率为55.6％,7枚卵子受精,受精率为70％。把7枚原核期受精卵移植给3只同期发情的受体山羊,2只妊娠,妊娠率为66.7％,并获得一只雄性试管山羊胎羔,胎龄为52d。     

饲养水平对供体奶牛超数排卵的影响

不同饲养水平的供体奶牛超数排卵结果表明 ,高饲养水平组头均获胚数、可用胚数分别为 1 0 5枚和 6 9枚 ,低饲养水平组头均获胚数、可用胚数分别为 5 2枚和 3 3枚 ,经t检验 ,两组差异极显著 (P <0 0 1 ) ;超排反应率两组差异显著 (P <0 0 5) ;胚胎可利用率两组差异不显著 (P >0 0 5)。     

不同培养条件对牛核移植胚胎体外发育的影响

[目的]进一步优化牛核移植胚胎的体外培养体系。[方法]在培养液中添加谷胱甘肽和胚胎培养的0~3 d采用5%O2浓度,在不同培养条件下对牛核移植重构胚胎进行体外培养,测定卵裂率8、细胞发育率、桑椹胚率以及囊胚发育率。[结果]结果表明,试验组B的8细胞发育率(38.3%)、桑椹胚率(17.0%)和囊胚率(8.5%)与对照组A(17.9%、1.3%、1.3%)差异显著(P<0.05)。试验组B和试验组C的桑椹胚率(17.0%、11.8%)、囊胚率(8.5%、7.8%)与对照组A(1.3%、1.3%)均差异显著(P<0.05)。[结论]在培养液中添加谷胱甘肽和胚胎培养的0~3d采用低O2浓度(5%O2),能够提高牛核移植胚胎的体外发育率。