绿色木霉纤维素酶CBHI基因的克隆与原核表达

绿色木霉(Trichoderma viride)所产生纤维素酶可将秸秆天然纤维素组分转化为可发酵的糖,不仅对废物进行再利用,还可以减少环境污染.以纤维素酶工业生产菌株绿色木霉Sn-9106总RNA为模板,利用RT-PCR技术反转录合成外切葡聚糖水解酶(CBHI)基因约1545bp的cDNA片段.该序列与GenBank中的cbhI E00389序列比较,氨基酸序列同源性达91％.大肠杆菌BL21原核表达和SDS-PAGE结果表明,重组蛋白分子量约为53kDa,重组酶活力为5.3U· mg-1.     

酸牦牛乳中乳酸菌降胆固醇作用及胆盐耐受性研究

为了从分离自甘肃酸牦牛乳中的23株乳酸菌中筛选能够同时降低胆固醇并耐受胆盐的乳酸菌,通过邻苯二甲醛法测定降胆固醇能力,并比较各菌株对三种形式的胆盐:牛胆汁、胆酸、甘胆酸钠的耐受性。结果表明,这些菌株在不同条件下的降胆固醇能力差异显著(P<0.05),多数菌株在不含牛胆汁的培养基中培养比添加牛胆汁时有着更好的对胆固醇的去除能力;死菌体对胆固醇的去除能力较弱;对各菌株对不同形式的胆盐耐受能力比较分析得出,各种形式的胆盐对乳酸菌的生长均有抑制作用,抑制顺序由强到弱依次为:甘胆酸钠>胆酸>牛胆汁;各菌株对胆盐的耐受力与降胆固醇能力没有相关性。通过比较选择出H1,I10和W2三株菌,作为功能性菌株为开发应用进行深入研究。     

4种鲇形目鱼消化系统蛋白水解酶

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对4种鲇形目鱼——鲇[Silurus asotus(Linnaeus)]、怀头鲇(Silurus soldatovi Nikolsky et Soin)、乌苏里拟鲿[Pseudobagrasuss uriensis(Dybowski)]、黄颡鱼[(Pelteobagrus fulvidraco(Richardson)]的消化系统蛋白水解酶的种类和活性进行了检测,并比较了4种鱼消化系统各组织器官在不同pH条件下蛋白水解酶的分布和活性差异:4种鲇形目鱼蛋白水解酶的表达具有组织器官特异性,胃和前肠的蛋白水解酶活性最强;4种鲇形目鱼蛋白水解酶的表达有科属差异,同科鱼中存在分子量相同的蛋白水解酶,而不同科鱼中未见分子量相同的蛋白水解酶;怀头鲇消化系统蛋白水解酶的种类最多,活性最强;4种鲇形目鱼消化系统蛋白水解酶均表现出明显的pH依赖性。     

鲜食糯玉米优质高效栽培技术

糯玉米营养丰富,其胚乳淀粉主要为支链淀粉,蛋白质含量比普通玉米高3%～6%,赖氨酸、色氨酸含量均较高。糯玉米淀粉在淀粉水解酶的作用下消化率可达85%,而普通玉米淀粉的消化率仅为69%。支链淀粉易溶于水生成稳定的溶液,具有很强的粘度,凝滞性很弱,淀粉液贮存过程中不发生沉淀,在食品工业和淀粉工业生产中具有特殊的用途。糯玉米含有较多的赖氨酸、谷氨酸、清蛋白和胶蛋白,并含有较低的杂醇油;     

基于木质纤维素生物利用的多功能糖苷酶研究进展

木质纤维素是一种重要的可再生资源,多功能糖苷水解酶对于木质纤维素的高效利用具有重要意义。文中总结了近年来针对木质纤维素生物利用的多功能糖苷水解酶的研究现状,对比了多功能糖苷水解酶与纤维小体多酶复合体、传统单一功能糖苷水解酶在结构、催化特性等方面的特点和优势,指出了多功能糖苷水解酶在未来发展中的重要地位和广泛发展前景。     

Hg2+胁迫对小麦幼苗生长及其淀粉酶等同工酶活性的影响

以小麦品种郑麦9023为材料,采用水培方法,研究了不同浓度的Hg2+溶液对浸种后小麦幼苗株高、根长及其淀粉酶和蛋白水解酶同工酶活性的影响。结果表明,低浓度的Hg2+(<0.10 mmol/L)对小麦幼苗株高、根长的影响不大,对小麦幼苗叶片、根中的淀粉酶和蛋白水解酶同工酶的活性有一定程度的诱导作用。而高浓度的Hg2+(>0.10 mmol/L)对小麦幼苗株高、根长及幼苗中的淀粉酶和蛋白水解酶同工酶的活性等有明显的抑制作用,呈现出明显的负相关,导致小麦生长发育受到严重抑制。0.10 mmol/L的Hg2+可能是影响小麦幼苗早期正常生长的阈值。     

热稳定6-磷酸-β-葡萄糖苷酶TteBglB异源表达、分离纯化及酶学性质分析

6-磷酸-β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.86)催化6-磷酸-葡萄糖苷类化合物(如6-磷酸-纤维二糖、6-磷酸-纤维素寡糖)产生6-磷酸-葡萄糖而使纤维素完全分解,在微生物碳源利用过程中起重要作用。腾冲嗜热厌氧杆菌是一株嗜热厌氧微生物,提供了丰富的热稳定性蛋白基因资源。从该菌株中克隆编码6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因Ttebgl B,并在E.coli BL21(DE3)进行了异源表达。结果表明,TteBglB催化反应的最适p H为6.0、最适温度为70℃,在pH 4~10或70℃时有着良好的稳定性;同时证实,TteBglB属于糖基水解酶家族1(GH1)成员,可不依赖Mn2+、Ni2+、Co2+或Fe2+等二价金属离子而发挥催化作用。以pNPβG6P为底物时,催化反应的Km为0.054 mmol/L,Kcat为81.47/min,Vmax为0.003992 mmol/min,酶比活为18.093 U/mg。     

玉米、豆粕和麦麸提取物对4 株乳酸杆菌胆盐耐受力的影响

模拟猪十二指肠高胆盐环境,研究玉米、豆粕和麦麸提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的影响.将约氏乳酸杆菌JJB3、SNZ10 ,罗伊氏乳酸杆菌MNZ8、KNZ4 等4株菌在分别含有玉米、豆粕和麦麸提取物的1.0％ 胆盐、pH 7.0的磷酸盐缓冲液中作用4 h ,检测活菌数;另以不同浓度葡萄糖和酵母提取物替代3种提取物,探讨饲料原料提取物对乳酸杆菌胆盐耐受力的作用机制.结果表明:在未添加提取物的对照组,4株乳酸杆菌活菌数极显著下降( P＜0.01) ,其中MNZ8对胆盐最敏感,活菌数下降1.74个对数值,而KNZ4的耐受力最强,仅下降1.16个对数值.分别添加3种提取物后,4株乳酸杆菌的胆盐耐受力均显著提高( P＜0.05) ,其中,玉米、豆粕和麦麸提取物对JJB3的胆盐保护作用最强,菌株存活率从对照组的78.12%分别提高到99.35%、99.48%、99.74%,对MNZ8的胆盐保护作用最弱.葡萄糖能显著提高乳酸杆菌耐胆盐能力,而酵母提取物作用较弱.说明在胆盐环境中,3种提取物均能显著提高4株乳酸杆菌的耐受力,对乳酸杆菌的保护作用是:麦麸提取物＞ 豆粕提取物＞ 玉米提取物.     

外源乙烯对不同成熟度网纹甜瓜果实细胞壁水解酶活性的影响

用浓度为10μL·L-1的外源乙烯处理不同成熟度网纹甜瓜(20℃,24 h),研究外源乙烯对果实硬度、ⅱ呼吸速率、乙烯释放量及细薄壁水解酶活性(多聚半乳糖醛酸酶、果胶甲酯酶和羧甲摹纤维素钠酶)、脂氧合酶和外渗电导率的影响.结果表明,无论果实是否达到完熟状态,与对照组相比,外源乙烯处理能够显著提高成熟和完熟网纹甜瓜果实呼吸速率和乙烯释放量以及细胞壁水解酶和脂氧合酶活性和外渗电导率,使它们的果实硬度迅速降低.但是不同成熟度的甜瓜果实对外源乙烯的敏感性存在差异,即与成熟果实相比,外源乙烯更显著地提高完熟果实的以上各个指标,从而使乙烯处理后的成熟果实硬度下降的速度更快.另外从对外源乙烯的相应时间来看,外源乙烯处理后完熟果实的以上各指标立即升高,而成熟果实在乙烯处理后1～3 d与成熟果实对照差异不明显,处理后6～12 d乙烯处理组和对照组差异逐渐加大.说明外源乙烯处理可以进一步提高成熟和完熟果实中细胞壁水解酶活性,进而促进细胞的降解,加快不同成熟度甜瓜果实后熟软化进程.