小鼠睾丸Hsc70t基因的克隆与序列分析

为了获得小鼠睾hsc70t基因的开放阅读框,根据GenBank中已发表的hsc70t的基因序列设计了特异性引物(GenBank accessionNo:NM_013558),提取睾丸中的总DNA,利用PCR方法扩增hsc70t基因序列,连接到pMD18-T载体上,然后进行序列测定与序列分析.测序结果表明PCR扩增得到一条1926 bp左右的基因片段.所测序列被GenBank收录,收录号为EU549780,与GenBank上公布的小鼠hsc70t基因序列同源性达99.9%,与大鼠(Rattus norvegicus)、猕猴(Macaca mulatta)、黑猩猩(Pantroglodytes)、蟾蜍(Xenopus)、人类(Homo)和青鲻(Oryzias latipes)的相似性分别为94.4%、85.4%、84.9%、72.7%、71.9%、67.1%;进化树构建结果表明小鼠与大鼠距离最近.证实了hsp70基因的高度保守性,并为hsc70t的进一步研究和应用奠定了基础.     

大鼠小鼠妊娠子宫植物性神经变化——HRP法研究

应用HRP顺向追踪法,研究了大鼠和小鼠子宫植物性神经的分布及妊娠后的变化。HRP自子宫阔韧带引入。结果发现,HRP标记神经分布于子宫壁各层,在内膜和环行肌层最多,其直径3～9μm(平均:大鼠4.81μm,小鼠4.60μm)。光镜下对子宫切片整个横断面计数发现,妊娠组(妇娠14天)与非妊娠组相比,子宫各段HRP标记神经数量显著下降(P<0.01),神经纤维直径也有减少的趋势。表明妊娠子宫植物性神经数量减少。     

犬子宫蓄脓摘除手术

犬子宫蓄脓是兽医临床常见的产科疾病之一。该病发生的主要原因是犬体内黄体酮分泌异常所致，常发生于老龄犬发情期后，犬表现为精神萎靡、食欲不振、腹围增大、多饮多尿，病程长或病情重的常表现为拱背、呕吐、呼吸急促，体温40℃以上或低于正常体温。临床上常见的犬子宫蓄脓分为开放性和闭合性两种。有些病犬表现阴部红肿且流出脓性、有腥臭味的分泌物，有些触诊可感觉腹部胀满、腹壁紧张并常伴有呻吟，直肠检查可在耻骨前缘摸到子宫并有波动感。     

一氧化氮对小鼠卵母细胞自发成熟的影响及作用机制

为研究一氧化氮（NO）供体硝普钠（nitroprusside sodium，SNP）对小鼠卵母细胞体外自发成熟的作用，并进一步探讨NO影响卵母细胞体外自发成熟的可能机制，我们采用了体外细胞培养方法和放射免疫分析法（RIA）。细胞培养研究结果显示，NO供体SNP（1mM）能够延迟卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs) 自发成熟过程中GVBD的发生，抑制PB1的释放。放射免疫分析（RIA）实验结果表明，1mM SNP能够显著的升高COCs内cGMP的水平，而可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）抑制剂ODQ（10μM）能够消除SNP对cGMP水平升高的促进作用。同时10μM ODQ还能够逆转SNP对卵母细胞自发成熟的抑制作用，而PKG抑制剂KT5823（1μM）却不能够逆转SNP对COCs自发成熟的抑制作用。以上结果说明NO是通过激活sGC，提高细胞内cGMP水平来发挥其作用的，但cGMP下游的PKG信号通路并不参与NO调控的COCs自发成熟过程。     

N-乙酰半胱氨酸对衰老小鼠抗氧化机能和肠道菌群的影响

本研究旨在探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对衰老小鼠抗氧化机能和肠道菌群的影响。试验利用D-半乳糖诱致衰老模型小鼠,并通过饮水给小鼠服NAC,测定回肠壁组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量抗氧化指标,采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术观察小鼠肠道菌群的变化,利用荧光定量PCR测定黏附相关基因表达。结果表明:NAC使衰老小鼠回肠壁组织中GSH-Px、CAT活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。NAC使衰老小鼠肠道乳酸杆菌、双歧杆菌和肠球菌数量增加,大肠杆菌数量减少。NAC使衰老小鼠回肠壁组织三叶因子3(TFF3)、黏液素3(MUC3)基因表达量显著升高(P<0.05)。因此,NAC能提高衰老小鼠抗氧化机能并通过抗氧化能力的调节来影响小鼠肠道菌群,而且NAC调节肠道菌群的机理可能与TFF3和MUC3基因表达有关。     

胸腺肽对幼龄雌性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响

研究了胸腺肽对幼龄雌性小鼠生殖器官指数及性激素水平的影响.以幼龄雌性小鼠为试验动物,连续30d皮下注射不同剂量的胸腺肽,观察各剂量胸腺肽处理对幼龄雌性小鼠卵巢、子宫脏器指数的影响,并检测血清中促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_2)的含量.结果表明,与正常饲养对照组比较,各剂量胸腺肽处理的小鼠卵巢指数、子宫指数降低,差异显著或极显著(p<0.05,p<0.01).其中,0.30mg·mL~(-1)胸腺肽处理组小鼠卵巢指数最低,比正常饲养对照组下降了 36.07%.0.60mg·mL~(-1)胸腺肽组小鼠子宫指数最低,比正常饲养对照组下降了38.08%.与正常饲养对照组相比,各剂量胸腺肽处理小鼠FSH、E2水平降低,差异显著或极显著(p<0.05,p<0.01).其中,0.60mg·mL~(-1)胸腺肽组FSH和E2含量都为最低,分别比正常饲养对照组下降14.48%和17.59%.可见,胸腺肽能降低幼龄雌性小鼠生殖器官指数及血清中性激素水平,从而影响幼龄雌性小鼠的生殖内分泌系统.     

杨梅素对小鼠髓鞘损伤精神分裂症样行为学的研究

为观察杨梅素对髓鞘损伤精神分裂症样小鼠行为的治疗作用,将40只健康雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、杨梅素组、氯丙嗪组。正常组给予正常饲料,用混有0.2%(w/w)双环己酮草酰二腙(CPZ)的饲料喂养其他3组小鼠构建脱髓鞘模型。每日用20 mg/kg的杨梅素对杨梅素组小鼠灌胃给药,用4 mg/kg的氯丙嗪对氯丙嗪组小鼠腹腔注射给药。造模给药5周后对小鼠进行各项行为学试验,观察小鼠行为改变。用固蓝(LFB)对髓鞘进行染色并观察各组小鼠髓鞘损伤情况。结果表明:杨梅素组小鼠在行为学试验中各项指标均比模型组有显著改善,对髓鞘损伤小鼠的精神分裂样行为治疗效果与氯丙嗪相当。在固蓝染色中,杨梅素组髓鞘颜色显然比模型组均匀致密。杨梅素对髓鞘损伤小鼠的精神分裂样行为有潜在治疗作用,为其临床应用奠定试验基础。     

比色法测定小鼠巨噬细胞的吞噬活性

巨噬细胞广泛存在于机体的各个脏器和组织，又称为单核吞噬细胞系统（MPS），是机体免疫系统中重要的细胞成分之一，可以吞噬微生物和其他异物颗粒，在吞噬过程中产生过氧化氢（H2O2）。在各种药物及病原菌对机体免疫功能影响作用的研究中，吞噬细胞吞噬功能的检测是一个重要的非特异性免疫功能的监测指标。国内外研究巨噬细胞的吞噬活性方法很多，     

猪胰多肽粗品对小鼠生长及血浆FT3和FT4浓度的影响

５周龄的雄性昆明小鼠９０只随机分为５组，Ⅰ组为对照组，每天每只灌服０．２ｍｌＰＢＳ。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别灌服０．２ｍｌ不同浓度的猪胰多肽（ＰＰＰ）粗品，剂量分别为４μｇ、１２μｇ、３６μｇ，Ｖ组灌服等量胰岛素注射液，剂量为０．００２ＩＵ。观察ＰＰＰ对小鼠生长、血浆中游离甲状腺激素浓度的影响，试验期３周。结果表明：用ＰＰＰ精品处理的Ⅱ￣Ⅳ组小鼠的平均体重高于对照组，其中试验Ⅱ组的平均体重显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）；试验Ⅱ、Ⅲ组的血浆ＦＴ３浓度和ＦＴ４浓度均高于对照组，但差异不显著。结果提示：给小鼠灌服一定剂量的猪胰多肽粗品对昆明小鼠的生长具有促进作用。